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携带人CTLA4-Ig融合基因的非增殖腺病毒载体的构建及表达 被引量：2
1
作者 平季根 严春寅 吕金星 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1265-1267,I0001,共4页
目的研究携带人细胞毒T淋巴细胞相关抗原(CTLA)4-Ig融合基因的非增殖腺病毒载体的生物学特性。方法构建含人CTLA4-Ig的非增殖腺病毒载体质粒pAdTrack-CMV-hCT-LA4-Ig,与非增殖腺病毒骨架质粒pAdEasy共转化大肠杆菌DH5α,在细菌内同源重... 目的研究携带人细胞毒T淋巴细胞相关抗原(CTLA)4-Ig融合基因的非增殖腺病毒载体的生物学特性。方法构建含人CTLA4-Ig的非增殖腺病毒载体质粒pAdTrack-CMV-hCT-LA4-Ig,与非增殖腺病毒骨架质粒pAdEasy共转化大肠杆菌DH5α,在细菌内同源重组,获得重组非增殖腺病毒载体质粒pAdTrack-hCTLA4-Ig,转染293细胞,经过包装、扩增、纯化后,获得携带人CTLA4-Ig融合基因的非增殖腺病毒。体外感染人近端肾小管上皮细胞株HK-2细胞,72 h后检测其外分泌性表达。结果获得携带人CTLA4-Ig融合基因的非增殖腺病毒,滴度为6×1013空斑形成单位/毫升(pfu/ml);在其感染的人近端肾小管上皮细胞株HK-2细胞培养上清液中能检测到可溶性重组蛋白CTLA4-Ig的表达。结论制备的重组非增殖腺病毒在体外能有效感染人近端肾小管上皮细胞株HK-2细胞,受感染细胞能表达、分泌可溶性蛋白CTLA4-Ig。 展开更多
关键词 细胞毒T淋巴细胞相关抗原4-Ig 非增殖腺病毒
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