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基于Gluconobacter oxydans膜结合脱氢酶的静息细胞催化合成2-酮基-D-葡萄糖酸 被引量：2
1
作者 陈鸿胜 李克非 +3 位作者 舒行宙 刘浏 林金萍 魏东芝 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第19期177-181,共5页
基于G.oxydans DSM2003膜结合葡萄糖酸-2-脱氢酶(GA-2-DH)的催化特性,利用静息细胞催化技术合成D-异抗坏血酸(EA)的主要前体2-酮基-D-葡萄糖酸(2-KGA)。利用高浓度底物自适应筛选技术,筛选到高产2-KGA菌株并对其摇瓶催化进行优化,优化... 基于G.oxydans DSM2003膜结合葡萄糖酸-2-脱氢酶(GA-2-DH)的催化特性,利用静息细胞催化技术合成D-异抗坏血酸(EA)的主要前体2-酮基-D-葡萄糖酸(2-KGA)。利用高浓度底物自适应筛选技术,筛选到高产2-KGA菌株并对其摇瓶催化进行优化,优化后最适条件为:温度30℃,pH6.0,细胞浓度20g/L,底物浓度1100mmol/L,摇床转速250rmin,此时时空产率为24.68mmol/L/h;摇瓶优化工艺基础上在7L发酵罐中对重点影响参数(转速与底物浓度)进行了进一步优化,优化后2-KGA的时空产率提高到74mmol/L/h,并且催化细胞可有效重复利用3次。 展开更多
关键词 2-KGA 氧化葡萄糖酸杆菌 静息细胞催化 工艺优化
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痤疮丙酸杆菌亚油酸异构酶在毕赤酵母中的异源表达及其静息细胞催化合成共轭亚油酸 被引量：1
2
作者 李秀清 陈海琴 +3 位作者 唐鑫 赵建新 张灏 陈卫 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期87-91,共5页
来源于痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes)的亚油酸异构酶(PAI)是一种能够通过单酶催化,生成共轭亚油酸(t10,c12-CLA)的亚油酸异构酶。为实现PAI的高效表达,以pPink为表达载体,毕赤酵母(PichiaPinkTM Strain2)为宿主菌,构建毕赤酵... 来源于痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes)的亚油酸异构酶(PAI)是一种能够通过单酶催化,生成共轭亚油酸(t10,c12-CLA)的亚油酸异构酶。为实现PAI的高效表达,以pPink为表达载体,毕赤酵母(PichiaPinkTM Strain2)为宿主菌,构建毕赤酵母重组菌株(Pichia-pPink-His-opai),实现了PAI在毕赤酵母中的异源表达。对毕赤酵母重组菌进行初步筛选获得蛋白表达量最高的转化子,通过单因素实验优化毕赤酵母重组菌的诱导条件。毕赤酵母重组菌最佳诱导条件为:诱导时间24 h,诱导剂甲醇体积分数2%。在最佳诱导条件下,将毕赤酵母重组菌制成静息细胞催化剂催化合成t10,c12-CLA。在28℃、200 r/min、亚油酸质量浓度4 g/L、反应时间6 h条件下,t10,c12-CLA产量为2.12 g/L,转化率可达53%。 展开更多
关键词 毕赤酵母 亚油酸异构酶 异源表达 共轭亚油酸 静息细胞催化
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