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QSOX1在子痫前期胎盘中的表达及其对滋养细胞凋亡和增殖功能的影响 被引量：5
1
作者 李金津 童超 漆洪波 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期6-11,共6页
目的:探究静息巯基氧化酶-1(quiescin sulfhydryl oxidase 1,QSOX1)在子痫前期(preeclampsia,PE)胎盘中的表达情况,QSOX1对滋养细胞的生物学行为的影响,及其参与PE发生的潜在机制。方法:收集2015年11月至2016年12月于重庆医科大学附属... 目的:探究静息巯基氧化酶-1(quiescin sulfhydryl oxidase 1,QSOX1)在子痫前期(preeclampsia,PE)胎盘中的表达情况,QSOX1对滋养细胞的生物学行为的影响,及其参与PE发生的潜在机制。方法:收集2015年11月至2016年12月于重庆医科大学附属第一医院产科住院行选择性剖宫产术的孕妇的胎盘组织,包括正常足月妊娠组(31例)和PE组(35例)。正常氧条件下,人绒毛外滋养细胞系(human transformed primary extravillous trophoblast cell line,HTR8/SVneo)细胞分为小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)阴性对照组(siControl)和QSOX1特异siRNA干扰组(siQSOX1),每组6例样本,实验重复3次。缺氧条件下,HTR8/SVneo细胞分为4组,分别为正常氧处理组(0 h)、缺氧6 h处理组(6 h)、缺氧12 h处理组(12 h)和缺氧24 h处理组(24 h),每组各6例样本,实验重复3次。采用Western blot法检测正常孕妇与PE孕妇胎盘中QSOX1的差异表达以及HTR8/SVneo细胞缺氧处理后QSOX1和缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的蛋白表达。利用siRNA技术干扰HTR8/Svneo细胞QSOX1的表达,用Western blot法检测转染细胞活性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Cleaved cysteinyl aspartate specific proteinase,Cleaved caspase)相关蛋白和细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的表达水平。并利用流式细胞术检测转染细胞凋亡,比色法检测转染细胞的增殖情况。结果:QSOX1在PE胎盘中的表达明显高于正常胎盘(0.955±0.285 vs. 3.921±0.960)(P=0.001)。缺氧处理HTR8/SVneo细胞后QSOX1和HIF-1α的表达均明显升高(1.183±0.160 vs. 3.987±0.098;1.051±0.444 vs.1.912±0.118)(均P=0.000)。下调QSOX1后HTR8/SVneo细胞Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9蛋白表达明显减少(2.940±0.514 vs. 1.075±0.121;9.223±1.230 vs. 1.011±0.019)(P=0.004;P=0.000),而CyclinD1的蛋白表达增加(1.851±0.972vs. 4.189±0.399)(P=0.018)。QSOX1干扰后HTR8/SVneo细胞凋亡能力减低[(21.007±2.214)%vs.(10.057±0.388)%](P=0.001),增殖能力增加(0.389±0.162 展开更多
关键词 凋亡 增殖 滋养细胞 子痫前期 静息巯基氧化酶-1
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乳腺癌细胞QSOX1的CRISPR/Cas9基因编辑及其对增殖侵袭的影响研究 被引量：2
2
作者 何秀娟 胡凤枝 +3 位作者 刘秋丽 刘玉萍 祝玲 郑文云 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1-9,共9页
目的:乳腺癌细胞的恶性增殖和易于侵袭转移特性与其对患者的危害直接相关,因此,探究其产生的分子机制,对其有效防治具有重要意义。静息巯基氧化酶-1(QSOX1)是巯基氧化酶家族成员之一,有研究证明其对细胞内蛋白质折叠过程中二硫键形成及... 目的:乳腺癌细胞的恶性增殖和易于侵袭转移特性与其对患者的危害直接相关,因此,探究其产生的分子机制,对其有效防治具有重要意义。静息巯基氧化酶-1(QSOX1)是巯基氧化酶家族成员之一,有研究证明其对细胞内蛋白质折叠过程中二硫键形成及细胞外基质的形成发挥重要作用。由于QSOX1在乳腺癌和胰腺癌等多种癌细胞中过表达,将探索QSOX1对乳腺癌细胞过度增殖和侵袭转移方面的可能作用。方法:通过利用CRISPR/Cas9技术构建QSOX1基因敲除和敲入的乳腺癌细胞模型,检测分析QSOX1对乳腺癌细胞MCF-7的分裂增殖、侵袭迁移能力等方面的影响。结果:利用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功构建了QSOX1基因敲除和敲入的乳腺癌MCF-7细胞株,其与对照野生型组细胞相比,QSOX1基因敲除株的增殖能力显著下降,癌细胞在体外的迁移和侵袭能力受到明显抑制;而QSOX1基因敲入株的增殖能力和体外迁移侵袭能力却明显有提高。结论:初步揭示了QSOX1在癌症发生与发展中的作用,为进一步阐明其作用的分子机制和设计靶向药物奠定了重要基础。 展开更多
关键词 静息巯基氧化酶-1(QSOX1) 乳腺癌MCF-7细胞 增殖和侵袭能力 CRISPR/Cas9基因编辑
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