用同源重组法将人肝金属硫蛋白突变体ββ基因整合在集胞藻6803中表达 被引量：12

1

作者 宋凌云 施定基 +4 位作者 宁叶 罗娜 邵宁 俞梅敏 茹炳根 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2001年第4期399-404,共6页

将集胞藻 (Synechocystissp .)PCC 6 80 3上psbB的一段序列 (从 # 6 93bp到 # 2 5 6 3bp)插入pBluescriptKS的多克隆位点 ,构建带有整合平台的载体pKSB。再将人工合成的 ββ基因插入中间载体pRL_439上启动子PpsbA的下游 ,并将pRL_ββ... 将集胞藻 (Synechocystissp .)PCC 6 80 3上psbB的一段序列 (从 # 6 93bp到 # 2 5 6 3bp)插入pBluescriptKS的多克隆位点 ,构建带有整合平台的载体pKSB。再将人工合成的 ββ基因插入中间载体pRL_439上启动子PpsbA的下游 ,并将pRL_ββ上PpsbA和 ββ基因插入pKSB构建成整合表达载体pKSB_ββ。利用自然转化将整合表达载体导入集胞藻 6 80 3,并通过单交换同源重组使 ββ基因整合到集胞藻 6 80 3基因组DNA上。逐步提高氨苄青霉素浓度 ,筛选得到遗传性状稳定的转基因集胞藻 6 80 3。PCR检测转基因集胞藻 6 80 3,结果证实 ββ基因已整合到集胞藻 6 80 3的染色体上 ;Westernblotting结果表明 ,ββ基因在转基因集胞藻 6 80 3细胞中得到表达 ,ELISA测定表明在 5 0 μmol/L的Zn2 +诱导下 ββ在新鲜集胞藻 6 80 3中的蛋白表达量为 0 .739mg/g ;重金属耐受性实验表明 ,得到能耐受Cu2 +的转基因集胞藻 6 80 3。经原子吸收光谱法测定 ,转基因集胞藻 6 80 3在含低浓度Cu2 +(10 μmol/L)的培养液中对Cu2 +的去除率可达到 82 % 展开更多

关键词 人肝金属硫蛋白ββ突变体 集胞藻6803 单交换 同源重组 蓝藻基因工程 铜去除

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集胞藻6803的混合培养——光照强度和葡萄糖的影响 被引量：6

2

作者 王永红 李元广 +4 位作者 施定基 沈国敏 茹炳根 袁航 张嗣良 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期193-197,共5页

利用摇瓶研究了混合营养条件下单细胞蓝藻集胞藻6803(Synechocystissp.PCC6803)的生长特性,以及葡萄糖和光照强度对集胞藻6803生长的影响。实验结果表明,在葡萄糖消耗完之前,集胞藻6803的混合营养型生长处于对数生长期,且葡萄糖浓度及... 利用摇瓶研究了混合营养条件下单细胞蓝藻集胞藻6803(Synechocystissp.PCC6803)的生长特性,以及葡萄糖和光照强度对集胞藻6803生长的影响。实验结果表明,在葡萄糖消耗完之前,集胞藻6803的混合营养型生长处于对数生长期,且葡萄糖浓度及光照强度都对集胞藻6803的混合营养型生长有显著影响:在初始葡萄糖浓度097～480g/L范围内,同一光照强度培养下藻细胞的比生长速率随葡萄糖浓度的增大而降低;而在光照强度15～55μE·m-2·s-1范围内,初始葡萄糖浓度相同条件下藻细胞的比生长速率及对葡萄糖的藻体得率都随光照强度的增强而增大,但当光照强度在55～96μE·m-2·s-1时,集胞藻6803混合培养的比生长速率基本不变,出现了光饱和现象。 展开更多

关键词 集胞藻6803 混合培养 葡萄糖 光照强度

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封闭式光生物反应器集胞藻6803光自养和混合营养培养比较 被引量：3

3

作者 王永红 李元广 +3 位作者 施定基 沈国敏 茹炳根 张嗣良 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期247-250,共4页

采用封闭式光生物反应器进行了蓝藻基因工程常用宿主系统集胞藻 Synechocystis sp.PCC 680 3的混合营养培养 ,并与光自养培养进行了比较。在两种培养方式下 ,集胞藻 680 3的饱和光强基本相同 ,都为 50 0 0 lx。当入射光强为 50 0 0 lx... 采用封闭式光生物反应器进行了蓝藻基因工程常用宿主系统集胞藻 Synechocystis sp.PCC 680 3的混合营养培养 ,并与光自养培养进行了比较。在两种培养方式下 ,集胞藻 680 3的饱和光强基本相同 ,都为 50 0 0 lx。当入射光强为 50 0 0 lx、初始葡萄糖浓度为 1 .74g/L时 ,混合营养生长在葡萄糖消耗完 ( 69.5h)时的藻细胞密度为 1 .36g/L、叶绿素浓度为 2 0 .0 8mg/L、能量得率为1 6.7% ,分别为同期光自养生长的 3.8倍、2 .3倍和 2 .6倍。这表明封闭式光生物反应器混合营养培养方式在促进集胞藻 680 展开更多

关键词 集胞藻6803 混合营养培养 光生物反应器 葡萄糖 蓝藻 基因工程 光自养培养

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以集胞藻6803为生物模板制备二氧化硅中空微球 被引量：5

4

作者 张博 任天瑞 +2 位作者 吴青海 王全喜 冯浩 《过程工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期107-112,共6页

以蓝藻类的集胞藻6803为生物模板,用溶胶凝胶法合成了不同形貌的SiO2,并对集胞藻6803和所制SiO2进行了分析.建立了选择性合成单分散SiO2微球和空心SiO2的反应条件,探讨了不同形貌材料的形成机理.结果表明,形成的SiO2微球形貌规整,分散良... 以蓝藻类的集胞藻6803为生物模板,用溶胶凝胶法合成了不同形貌的SiO2,并对集胞藻6803和所制SiO2进行了分析.建立了选择性合成单分散SiO2微球和空心SiO2的反应条件,探讨了不同形貌材料的形成机理.结果表明,形成的SiO2微球形貌规整,分散良好,粒径分布较窄,平均粒径为1.5μm,能保持细胞分裂阶段的原貌,呈无定型态.SiO2纳米粒子能均匀包覆在藻细胞表面,形成的空心SiO2微球壁厚均一,能保持藻细胞的形貌.证实了空心SiO2和SiO2微球形成机理是吸附和渗透过程不同. 展开更多

关键词 生物模板 集胞藻6803 SIO2微球 空心SiO2

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气升式反应器培养集胞藻6803过程中光能利用特性研究 被引量：4

5

作者 张志斌 颜日明 +1 位作者 曾庆桂 朱笃 《海洋通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期54-61,共8页

在气升式光生物反应器中,对集胞藻6803分批培养条件下的光衰减、平均光强、光的分布以及藻细胞生长对光能的利用特性进行分析。结果表明:Lambert-Beer定律可较好描述细胞浓度及光程对光衰减的影响;随着藻细胞密度的增加,光生物反应器内... 在气升式光生物反应器中,对集胞藻6803分批培养条件下的光衰减、平均光强、光的分布以及藻细胞生长对光能的利用特性进行分析。结果表明:Lambert-Beer定律可较好描述细胞浓度及光程对光衰减的影响;随着藻细胞密度的增加,光生物反应器内平均光强不断减小,藻细胞的比光能吸收速率和比生长速率也不断降低,反应器中"暗区"体积在培养6d后超过总体积的80%;利用Pirt细胞生长生物能量模型描述比生长速率和比光能吸收速率的关系,在入射光强为58.73KJ/(m2·h),求得基于光能的细胞得率YG和维持系数m分别为9.98×10-3g/kJ和0.445kJ/(g·h)。 展开更多

关键词 集胞藻6803 光衰减 光分布 平均光强 光能利用

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集胞藻6803在封闭式光生物反应器中的混合营养培养 被引量：1

6

作者 王永红 李元广 +3 位作者 施定基 沈国敏 茹炳根 张嗣良 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第5期28-30,共3页

采用摇瓶和封闭式光生物反应器进行了蓝藻基因工程常用宿主系统集胞藻Syne chocystis680 3的混合营养培养研究。在摇瓶中对集胞藻 680 3利用有机碳源特性进行研究的结果表明 ,光照是集胞藻 680 3利用葡萄糖的必需条件 ,混合营养培养是... 采用摇瓶和封闭式光生物反应器进行了蓝藻基因工程常用宿主系统集胞藻Syne chocystis680 3的混合营养培养研究。在摇瓶中对集胞藻 680 3利用有机碳源特性进行研究的结果表明 ,光照是集胞藻 680 3利用葡萄糖的必需条件 ,混合营养培养是集胞藻 680 3的最佳培养方式。以葡萄糖为基质 ,在 2 5L封闭式光生物反应器中经过 58.5h的混合营养培养 ,集胞藻 680 3的藻细胞密度和平均生长速率分别达到 2 .50g/L和 1 .0 1 g/L/d,分别是光自养培养同期的 9倍和 1 1倍 ,这表明封闭式光生物反应器混合营养培养方式在促进集胞藻 680 3生长上有显著作用。 展开更多

关键词 集胞藻6803 混合营养培养 光生物反应器 葡萄糖 蓝藻

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利用同源重组构建蓝藻集胞藻6803ndhO基因突变株及其分子鉴定 被引量：2

7

作者 龙宗娟 赵娇红 +2 位作者 魏兰珍 王全喜 马为民 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期31-35,共5页

蓝藻NADPH脱氢酶(NDH-1)是一种重要的光合膜蛋白复合体,参与CO2吸收、围绕光系统I的循环电子传递和细胞呼吸。迄今为止,人们在蓝藻细胞中已鉴定出15种NDH-1复合体亚基(NdhA-NdhO)。然而,人们对NdhO亚基的研究尚不够,至今未见有反向遗传... 蓝藻NADPH脱氢酶(NDH-1)是一种重要的光合膜蛋白复合体,参与CO2吸收、围绕光系统I的循环电子传递和细胞呼吸。迄今为止,人们在蓝藻细胞中已鉴定出15种NDH-1复合体亚基(NdhA-NdhO)。然而,人们对NdhO亚基的研究尚不够,至今未见有反向遗传学等方面的研究。在通过构建同源重组载体、自然转化和多次继代筛选后,对转化子进行了PCR和蛋白免疫印迹鉴定。结果表明,卡那霉素基因已成功地插入到ndhO基因的保守区域,并完全破坏了ndhO基因的蛋白表达,从而获得了ndhO基因缺失的突变株,为进一步研究NdhO亚基对NDH-1复合体的稳定性和生理功能等奠定了实验基础。 展开更多

关键词 NDH-1复合体 ndhO基因缺失突变株 集胞藻6803

原文传递

增强型绿色荧光蛋白在集胞藻6803中的表达 被引量：1

8

作者 陈伟伟 郭正红 +2 位作者 康升云 魏兰珍 王全喜 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期229-233,共5页

利用聚球藻7942热休克基因groESL的启动子和报告基因egfp,构建了表达载体pUC-Tegfp并转化集胞藻6803,并通过所制备抗体对转基因藻进行蛋白免疫印迹检测.结果发现,在转基因藻株T-egfp的细胞粗提液中含有能与eGFP抗体特异结合的蛋白质,表... 利用聚球藻7942热休克基因groESL的启动子和报告基因egfp,构建了表达载体pUC-Tegfp并转化集胞藻6803,并通过所制备抗体对转基因藻进行蛋白免疫印迹检测.结果发现,在转基因藻株T-egfp的细胞粗提液中含有能与eGFP抗体特异结合的蛋白质,表明外源增强型绿色荧光蛋白基因(egfp)在集胞藻6803中成功表达. 展开更多

关键词 集胞藻6803 增强型绿色荧光蛋白 转基因藻

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集胞藻6803基因组DNA提取方法的比较 被引量：2

9

作者 陈雪峰 焦文冬 +2 位作者 刘宁 马文锦 孙玉姣 《陕西科技大学学报（自然科学版）》 2016年第1期123-127,共5页

比较了PVP法、CTAB法和SDS法对集胞藻6803(Synechocystis sp.PCC6803)基因组DNA的提取效果,并采用紫外-可见分光光度计、琼脂糖凝胶电泳及PCR扩增检测基因组DNA质量.结果表明,三种方法均能提取到符合分子生物学要求的基因组DNA,其中SDS... 比较了PVP法、CTAB法和SDS法对集胞藻6803(Synechocystis sp.PCC6803)基因组DNA的提取效果,并采用紫外-可见分光光度计、琼脂糖凝胶电泳及PCR扩增检测基因组DNA质量.结果表明,三种方法均能提取到符合分子生物学要求的基因组DNA,其中SDS法提取的DNA综合质量最高.以提取的基因组DNA为模板,以sll0853引物进行PCR扩增,三种方法均能扩增出目的条带,其中CTAB法及SDS法的条带更为清晰. 展开更多

关键词 集胞藻6803 基因组DNA提取 PCR扩增

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三种不同磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的克隆、表达及其对宿主菌生长的影响 被引量：1

10

作者 李会玉 赵鹏 +1 位作者 葛喜珍 田平芳 《北京化工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期87-92,共6页

应用PCR技术分别克隆了集胞藻6803、鲍曼不动杆菌和大肠杆菌的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)基因,构建重组大肠杆菌。SDS-PAGE凝胶电泳结果显示,来自集胞藻6803和大肠杆菌的PEPC实现了高效表达,而来自鲍曼不动杆菌的PEPC表达较弱,提示... 应用PCR技术分别克隆了集胞藻6803、鲍曼不动杆菌和大肠杆菌的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)基因,构建重组大肠杆菌。SDS-PAGE凝胶电泳结果显示,来自集胞藻6803和大肠杆菌的PEPC实现了高效表达,而来自鲍曼不动杆菌的PEPC表达较弱,提示密码子偏好性的影响。前两菌提前进入对数生长期,来自鲍曼不动杆菌PEPC工程菌却延迟生长,但这3种重组菌发酵24 h后的生物量与对照菌几乎相同。如果排除质粒复制造成的代谢负荷,过表达PEPC促进了宿主菌的生长,推测是因为重排了代谢流量。 展开更多

关键词 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶 CO2固定 集胞藻6803 鲍曼不动杆菌 大肠杆菌

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集胞藻6803藻胆体藻蓝蛋白多克隆抗体制备及其初步应用 被引量：1

11

作者 张劲松 陈李萍 +3 位作者 高复旦 杜玲瑜 王全喜 马为民 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1-5,9,共6页

通过PCR扩增出集胞藻6803 C-PC编码基因cpcA,构建表达质粒pET32a(+)-cpcA,转化大肠菌株BL21(DE3)pLysS,用IPTG诱导表达、经His-tag纯化后免疫日本大耳白兔获得多克隆抗体。间接ELISA法揭示该抗体效价可高达1∶1 025 000;蛋白免疫印迹确... 通过PCR扩增出集胞藻6803 C-PC编码基因cpcA,构建表达质粒pET32a(+)-cpcA,转化大肠菌株BL21(DE3)pLysS,用IPTG诱导表达、经His-tag纯化后免疫日本大耳白兔获得多克隆抗体。间接ELISA法揭示该抗体效价可高达1∶1 025 000;蛋白免疫印迹确定该抗体具有高度特异性。应用该抗体进行蛋白免疫印迹检测,结果发现C-PC蛋白在生长光与高光培养条件下的数量,以及与2个光系统间的连结数量均存在显著差异,为进一步研究藻胆体的杆在响应与适应机制中所承担的重要角色奠定了生化基础。 展开更多

关键词 藻蓝蛋白 多克隆抗体 集胞藻6803

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集胞藻6803中S2P同源基因sll0528在多种胁迫下的表达谱分析 被引量：1

12

作者 陈谷 王玉玲 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2014年第9期44-48,54,共6页

为考察集胞藻6803中S2P同源蛋白sll0528的功能,应用实时荧光定量PCR技术研究sll0528基因在各种胁迫条件下不同时间点的表达谱变化。结果表明:sll0528在多种胁迫条件下被显著诱导,根据表达谱特点不同可分为以下三组(1)对高光、双氧水、... 为考察集胞藻6803中S2P同源蛋白sll0528的功能,应用实时荧光定量PCR技术研究sll0528基因在各种胁迫条件下不同时间点的表达谱变化。结果表明:sll0528在多种胁迫条件下被显著诱导,根据表达谱特点不同可分为以下三组(1)对高光、双氧水、山梨醇和葡萄糖混养等胁迫的响应属于早期响应,表达量诱导上调的峰值出现在0.5 h内,前三者在0.25 h分别上调约10、80和100倍,后者在0.5 h上调9倍左右;(2)对高温和低温胁迫的响应属于中期响应,前者在1 h上调30倍,后者在2 h显著上调280倍;(3)对酸和盐胁迫的响应属于后期响应,在6 h分别上调90和190倍。由此推断,sll0528可能在响应多种外界环境胁迫中起到重要作用,在不同的胁迫条件下可能参与了不同的信号转导途径从而诱导表达的峰值出现时间和数量有所不同。本研究结果为进一步探讨sll0528基因在胁迫条件下的生理功能及其作用的分子机制奠定了基础。 展开更多

关键词 集胞藻6803 S2P同源蛋白 sll0528 胁迫响应 实时荧光定量PCR

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一种快速构建集胞藻6803 petBD必需基因定点突变株的方法 被引量：1

13

作者 芦亚菲 曲娜 +1 位作者 陈晓波 匡廷云 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期957-961,共5页

集胞藻6803(Synechocystis sp.Strain PCC 6803)是能够进行光合自养的原核生物,因其遗传背景清楚,特别是它具有天然的同源重组转化能力,是研究光合作用的模式生物之一[1—3]。以集胞藻进行分子生物学研究,最常用的方法是基因敲除,即基... 集胞藻6803(Synechocystis sp.Strain PCC 6803)是能够进行光合自养的原核生物,因其遗传背景清楚,特别是它具有天然的同源重组转化能力,是研究光合作用的模式生物之一[1—3]。以集胞藻进行分子生物学研究,最常用的方法是基因敲除,即基于同源重组原理,利用抗生素的抗性基因插入到目的基因内部,使其功能丧失[4];如进行定点突变常规的方法是首先构建一个缺失质粒。 展开更多

关键词 定点突变 pet BD必需基因 酶切位点 集胞藻6803

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集胞藻PCC6803中ORF sll0260对于维持基本生命活动的必要作用 被引量：1

14

作者 罗泉 徐旭东 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期789-794,共6页

集胞藻(Synechocystis sp.)6803的未知功能基因中有很多是细胞的基本生命活动所需要的,这些基因插入失活往往会导致细胞死亡,因而得不到分离完全的突变株,难以进行遗传学研究。构建突变株以铜离子调控的启动子PpetE来控制此类未知功能... 集胞藻(Synechocystis sp.)6803的未知功能基因中有很多是细胞的基本生命活动所需要的,这些基因插入失活往往会导致细胞死亡,因而得不到分离完全的突变株,难以进行遗传学研究。构建突变株以铜离子调控的启动子PpetE来控制此类未知功能基因的表达则可能获得完全分离。构建PpetE-sll0260突变株并对sll0260必要作用进行研究。在完全分离的突变株中,去除铜离子可关闭sll0260的表达。此时,突变株生长受到严重抑制,色素含量大为降低,类囊体膜结构破坏,光合作用消失,呼吸能力下降。这些结果表明该基因对于维持集胞藻6803的基本生命活动来说是必需的。亚细胞定位研究显示sll0260编码一个膜蛋白,位于质膜和外膜混合物中。Sll0260可能作为某些离子的转运蛋白起作用,或者直接与类囊体膜的发生过程相关。 展开更多

关键词 集胞藻6803 sll0260 PpetE 膜蛋白

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光生物反应器中集胞藻6803的光衰减及其生长动力学研究 被引量：1

15

作者 张文婷 任越 +1 位作者 张英俊 张志斌 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第19期9957-9958,9967,共3页

[目的]分析集胞藻6803细胞培养体系的光衰减及分批培养条件下藻细胞的生长特性。[方法]以集胞藻6803(Synechocystis sp.PCC6803)为供试藻种,用尤尼柯7200型分光光度计测定藻细胞浓度和用ST-85自动量程照度计测定光强在通过不同光程、不... [目的]分析集胞藻6803细胞培养体系的光衰减及分批培养条件下藻细胞的生长特性。[方法]以集胞藻6803(Synechocystis sp.PCC6803)为供试藻种,用尤尼柯7200型分光光度计测定藻细胞浓度和用ST-85自动量程照度计测定光强在通过不同光程、不同浓度藻液时的变化。[结果]随着藻细胞浓度和光程的增加,光强迅速下降。在同一光程下,光强随着藻细胞浓度的增加而下降。在培养初期藻细胞浓度较低时,光衰减程度较小;在培养后期,随着藻细胞浓度的增加,光衰减程度逐渐增加。在培养过程中藻体细胞的生长规律与微生物发酵过程中菌体的生长规律相似。藻体细胞生物量曲线与微生物发酵时的菌体生长曲线相似。[结论]Lambert-Beer公式Ln(I/I0)=-KaXL能较好描述藻细胞浓度和光程对光衰减的综合影响;Logistic方程能很好描述藻细胞的生长曲线。 展开更多

关键词 集胞藻6803 光衰减 Lambert-Beer定律 LOGISTIC方程

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集胞藻Synechocystis sp. PCC 6803 slr1501的克隆及原核表达分析 被引量：1

16

作者 张燕 岳寿松 +3 位作者 陈高 游银伟 钟怀荣 于金慧 《山东农业科学》 2019年第7期1-4,16,共5页

组蛋白乙酰基转移酶上调表达与抗逆性有一定相关性。集胞藻Synechocystis sp.PCC 6803 Slr1501是一个未知蛋白,预测其属于组蛋白乙酰基转移酶GNAT家族N-乙酰基转移酶。为了进一步明确slr1501基因功能,本研究从集胞藻6803中克隆slr1501基... 组蛋白乙酰基转移酶上调表达与抗逆性有一定相关性。集胞藻Synechocystis sp.PCC 6803 Slr1501是一个未知蛋白,预测其属于组蛋白乙酰基转移酶GNAT家族N-乙酰基转移酶。为了进一步明确slr1501基因功能,本研究从集胞藻6803中克隆slr1501基因,成功构建了pET-28a(+)-slr1501原核表达载体,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)进行分析。经1 mmol/L IPTG诱导2 h后Slr1501蛋白成功表达,表达量随诱导时间的延长而增加,且主要以包涵体形式表达。Western blot检测结果显示Slr1501重组蛋白特异性表达。本试验结果为进一步研究该基因的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 集胞藻6803 乙酰基转移酶 slr1501 原核表达 基因功能

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细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂Roscovitine对3种蓝藻生长和活性的影响

17

作者 周晓潮 王春梅 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2014年第2期71-76,共6页

为了明确蓝藻中丝氨酸/苏氨酸激酶的功能是否与调控细胞的生长分裂相关,以丝状鱼腥藻7120、单细胞集胞藻6803和聚球藻7002为对象,利用OD750光吸收测定和MTT方法研究了不同浓度丝氨酸苏氨酸激酶抑制剂roscovitine对其生长和脱氢酶活性的... 为了明确蓝藻中丝氨酸/苏氨酸激酶的功能是否与调控细胞的生长分裂相关,以丝状鱼腥藻7120、单细胞集胞藻6803和聚球藻7002为对象,利用OD750光吸收测定和MTT方法研究了不同浓度丝氨酸苏氨酸激酶抑制剂roscovitine对其生长和脱氢酶活性的影响。结果表明:4 h roscovitine处理后对鱼腥藻7120和集胞藻6803生长量影响不大,对聚球藻7002的生长有促进作用。4 h roscovitine的处理对鱼腥藻7120有浓度依赖的显著抑制活性,对集胞藻6803的活性无影响,但是却促进聚球藻7002的活性。药物作用4 d后,7120的生长和活性均显著降低,并有浓度效应;6803的生长量较对照减少,但活性变化不明显;聚球藻7002的生长和活性均未受影响。显微观察结果显示,roscovitine对3种细胞形态没有影响,但药物作用4 d后的7120藻丝体较短。结果表明丝氨酸/苏氨酸抑制剂roscovitine影响丝状藻7120的生长和活性。 展开更多

关键词 ROSCOVITINE 鱼腥藻7120 集胞藻6803 聚球藻7002

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绿色荧光蛋白标记S2P在集胞藻6803中的表达

18

作者 陈谷 闻盼盼 +1 位作者 秦春燕 王玉玲 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第12期122-127,共6页

为研究集胞藻6803中两个S2P同源蛋白酶Slr0643和Sll0862的功能,分别在两个蛋白酶的羧基端添加增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标签,构建了两株转基因集胞藻psbA2::0643GFP-Cmr/△0643-Kmr和psbA2::0862GFP-Cmr/△0862-Kmr.通过逆转录聚合酶链... 为研究集胞藻6803中两个S2P同源蛋白酶Slr0643和Sll0862的功能,分别在两个蛋白酶的羧基端添加增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标签,构建了两株转基因集胞藻psbA2::0643GFP-Cmr/△0643-Kmr和psbA2::0862GFP-Cmr/△0862-Kmr.通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测到egfp基因的转录表达,通过激光共聚焦显微镜检测到转基因集胞藻细胞发出的绿色荧光蛋白荧光,表明带EGFP标签的S2P融合蛋白在psbA2启动子调控下正确表达. 展开更多

关键词 增强型绿色荧光蛋白 S2P同源蛋白酶 集胞藻6803 融合蛋白

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WST-8方法用于蓝藻细胞活力的检测

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作者 田钰琪 周晓潮 +3 位作者 赵妍 顾响响 赓迪 王春梅 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期3554-3558,共5页

作为重要的模式生物,蓝藻活细胞数量的测定方法应用非常广泛。本研究尝试将用于哺乳动物细胞的快速活力检测方法 WST-8方法用于蓝藻的检测。首先考察WST-8法与传统的蓝藻细胞计数法的相关性从而判断WST-8法应用的可行性,然后优化检测条... 作为重要的模式生物,蓝藻活细胞数量的测定方法应用非常广泛。本研究尝试将用于哺乳动物细胞的快速活力检测方法 WST-8方法用于蓝藻的检测。首先考察WST-8法与传统的蓝藻细胞计数法的相关性从而判断WST-8法应用的可行性,然后优化检测条件,考察检测波长、是否光照、孵育温度、孵育时间以及底物加入量对测定结果的影响。结果表明,细胞密度与WST-8方法测定的吸光度呈线性(r^2=0.996 7),此方法可用于集胞藻6803的细胞活力测定。最佳检测波长为457 nm,在25℃、30℃、37℃3个温度下,随温度升高,底物还原量增多,随孵育时间增加,产物逐渐增加,在0~120 min内呈现良好的线性关系,当底物加入量在2~10μL范围内,产物量随底物量增加而增加,当底物量大于10μL后产物量不再增加。因此,建议的检测条件为在30℃时,取100μL蓝藻培养液(浓度为1×10~7~6.4×10~7 cell/mL)于96孔板孔中,加入10μL WST-8试剂,光照恒温摇床孵育120 min,测定457 nm吸光度。 展开更多

关键词 蓝藻 细胞活力 wst-8 集胞藻6803

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集胞藻6803对Pb^(2+)胁迫的生理生化响应

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作者 邓祥元 樊玲波 +2 位作者 高坤 罗翔 丁婉婉 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期39-43,共5页

为探索藻类对Pb2+胁迫的生理生化响应,首次以集胞藻6803(Synechocystis sp.PCC 6803)为材料,以细胞密度、叶绿素a、可溶性糖、MDA含量及SOD活性为指标,研究Pb2+胁迫下集胞藻的生理生化响应。结果表明,高浓度Pb(NO3)2(>100 mg·L... 为探索藻类对Pb2+胁迫的生理生化响应,首次以集胞藻6803(Synechocystis sp.PCC 6803)为材料,以细胞密度、叶绿素a、可溶性糖、MDA含量及SOD活性为指标,研究Pb2+胁迫下集胞藻的生理生化响应。结果表明,高浓度Pb(NO3)2(>100 mg·L-1)严重抑制集胞藻的生长及叶绿素a的合成,但低浓度Pb(NO3)2(<50 mg·L-1)对其没有明显影响(P>0.05)。而Pb(NO3)2对集胞藻中糖类物质含量的影响不同,尽管50 mg·L-1的Pb(NO3)2对集胞藻生长的抑制作用不明显,但可显著抑制集胞藻中糖类物质的合成(P<0.05)。此外,随着Pb(NO3)2浓度的升高,细胞中MDA含量和SOD活力显著增加,表明细胞中活性氧自由基过量积累,将破坏集胞藻的细胞膜结构与功能,使细胞遭受严重损伤。 展开更多

关键词 集胞藻6803 Pb(NO3)2 叶绿素A 超氧化物歧化酶 丙二醛

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