DNA印迹试验 被引量：4

1

作者 汪渊 左艳 +6 位作者 左莉 刘虎 张素梅 熊江霞 卜丽佳 周青 桂淑玉 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2005年第2期194-196,共3页

关键词 印迹试验 Southem杂交 DNA片段 琼脂糖凝胶电泳 固相支持物 基因组DNA 硝酸纤维素膜 DNA印迹 限制内切酶 靶DNA 电泳分离 扩增片段 分子大小 PCR 尼龙膜 转移

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两株枯草芽孢杆菌的噬菌体 被引量：2

2

作者 那淑敏 贾盘兴 余茂効 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第2期117-121,共5页

从三门峡酶制剂厂分离到与过去形态不同的两种噬菌体 BS31和 BS32。BS31有收缩尾鞘,头部为六边形;BS32有复杂的短尾,形态与φ29相似,寄主范围窄且有差异,用限制酶分析,噬菌体 DNA 的分子量分别为62kb 和17kb。根据解链温度计算噬菌体 D... 从三门峡酶制剂厂分离到与过去形态不同的两种噬菌体 BS31和 BS32。BS31有收缩尾鞘,头部为六边形;BS32有复杂的短尾,形态与φ29相似,寄主范围窄且有差异,用限制酶分析,噬菌体 DNA 的分子量分别为62kb 和17kb。根据解链温度计算噬菌体 DNA 的 G+C含量分别为 45.7mol%和40.7mol%。两株噬菌体的结构蛋白经 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳测定,BS31有2条主带,10条次带;BS32有3条主带和6条次带。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌 噬菌体 限制内切酶

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家禽基因育种工程研究新进展

3

作者 李东 赵桂萍 +2 位作者 魏凤英 李道劲 尤春梅 《中国畜禽种业》 2006年第8期33-34,共2页

关键词 工程研究 基因育种 DNA指纹图 家禽 RFLP技术 限制内切酶 基因研究 遗传信息 遗传标记 细胞内

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一种简便有效的枯草杆菌质粒克隆方法 被引量：1

4

作者 匡裕玖 周建华 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期199-200,203,共3页

目的　在用枯草杆菌质粒克隆并表达白喉毒素突变型DT del14 8时 ,出现A70 0T突变 ,导致Ile2 0 9Leu氨基酸取代 ,为纠正这一突变 ,设计一种简便有效的枯草杆菌质粒克隆方法。方法　首先对含I2 0 9L突变的载体PSM6 0 4 DT del14 8 I2 0 9... 目的　在用枯草杆菌质粒克隆并表达白喉毒素突变型DT del14 8时 ,出现A70 0T突变 ,导致Ile2 0 9Leu氨基酸取代 ,为纠正这一突变 ,设计一种简便有效的枯草杆菌质粒克隆方法。方法　首先对含I2 0 9L突变的载体PSM6 0 4 DT del14 8 I2 0 9LDNA进行计算机限制内切酶谱分析 ,以位于PflMⅠ及HindⅢ间的唯一切点的限制内切酶KpnⅠ消化 ,然后去磷酸化 ,热灭活相应酶 ,加入不含I2 0 9L突变的大肠杆菌质粒PET15b DT del14 8,再以PflMI、HindⅢ消化 ,浓缩后进行连接、转化、筛选克隆 ,最后DNA序列分析。结果　经限制内切酶消化及序列分析 ,所有转化子均含目的基因片段。载体DNA仅需 30 0ng ,转化效率达 4 5× 10 2 转化子 / μg ;结论　方法简便、有效、快捷 ,成本低、成功率高 。 展开更多

关键词 枯草杆菌 质粒 克隆 限制内切酶 DNA序列分析

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介绍一种简易、快速提取和纯化质粒的方法

5

作者 李小林 陈孝英 +1 位作者 刘剑剀 赵晓冬 《白求恩医科大学学报》 CSCD 1992年第2期198-199,共2页

我们报告一种简单、快速提取和纯化质粒的方法。经过细菌培养、质粒扩增制备出清亮裂解液,经酚处理后,用Sephacryl S—1000凝胶过滤层析除去了菌体RNA。制备出的高纯度质粒DNA可用于限制内切酶等分析与应用。

关键词 质粒 层析 DNA 限制内切酶

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斜纹夜蛾NPV-DNA限制性内切酶分析及多角体蛋白的某些理化性质

6

作者 彭建新 黎路林 +2 位作者 赵细康 张鸿雁 陈曲侯 《华中师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1991年第4期474-478,共5页

斜纹夜蛾NPV-DNA经限翩性内切酶EooRI和BamHI完全消化,分别产生22条和15条片断,测得DNA平均分子量为75.26×10~5道尔顿。多角体蛋白经超离心,Sepharose 6B柱层析纯化,PAGE为一条均匀带;高碘酸-schiff反应阳性,多角体蛋白含有多糖;... 斜纹夜蛾NPV-DNA经限翩性内切酶EooRI和BamHI完全消化,分别产生22条和15条片断,测得DNA平均分子量为75.26×10~5道尔顿。多角体蛋白经超离心,Sepharose 6B柱层析纯化,PAGE为一条均匀带;高碘酸-schiff反应阳性,多角体蛋白含有多糖;多角体蛋经显示酸性类脂的Niles兰染色呈阴性。 展开更多

关键词 斜纹夜蛾 NPV DNA 限制内切酶

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分枝杆菌分子生物学的近况

7

作者 张天民 梅国华 《冶金防痨》 1991年第1期60-69,共10页

关键词 分枝杆菌 分子生物学 DNA 核酸杂交 限制内切酶

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人Vigilin基因5＇端EcoRI片段的克隆及限制性酶切图谱分析 被引量：1

8

作者 曾星 Pl.,G 《同济医科大学学报》 CSCD 北大核心 1996年第1期1-4,共4页

为了解人基因组Ｖｉｇｉｌｉｎ基因结构和探讨Ｖｉｇｉｌｉｎ蛋白的功能，在人基因组Ｖｉｇｉｌｉｎ基因全长克隆的基础上，在５＇端ＥｃｏＲＩ片段亚克隆（Ｖｉｇ－ＣＧ５－７Ｅ），并从１３个限制性核酸内切酶中选出６种对亚克隆ＤＮ... 为了解人基因组Ｖｉｇｉｌｉｎ基因结构和探讨Ｖｉｇｉｌｉｎ蛋白的功能，在人基因组Ｖｉｇｉｌｉｎ基因全长克隆的基础上，在５＇端ＥｃｏＲＩ片段亚克隆（Ｖｉｇ－ＣＧ５－７Ｅ），并从１３个限制性核酸内切酶中选出６种对亚克隆ＤＮＡ进行部分酶切和分子杂交，组建了克隆Ｖｉｇ－ＣＧ５－７ＥＤＮＡ的详细限制性酶切图谱，从而为克隆Ｖｉｇｉｌｉｎ基因的转录调控序列提供合适的酶切位点。 展开更多

关键词 Vigilin基因 基因结构 核酸限制内切酶 克隆

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婴幼儿腹泻粪便中肠腺病毒限制性内切酶图谱分析 被引量：1

9

作者 吴妙灵 宋小冬 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第2期105-108,共4页

关键词 婴儿腹泻 肠腺病毒 限制内切酶谱

原文传递

利用Golden Gate “One-POT”技术组装运动发酵单胞菌转录单元 被引量：1

10

作者 杨依伟 赵彩芳 +2 位作者 吴波 秦晗 何明雄 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期170-175,共6页

为研究运动发酵单胞菌合成生物学及代谢工程,评估运动发酵单胞菌内源启动子及终止子,需要建立一种方便有效的多基因代谢途径组装方法.通过Golden Gate方法构建了一个含有运动发酵单胞菌乙醇脱氢酶2编码基因启动子区(P_(adh2))、丙酮酸... 为研究运动发酵单胞菌合成生物学及代谢工程,评估运动发酵单胞菌内源启动子及终止子,需要建立一种方便有效的多基因代谢途径组装方法.通过Golden Gate方法构建了一个含有运动发酵单胞菌乙醇脱氢酶2编码基因启动子区(P_(adh2))、丙酮酸脱羧酶编码基因终止子区(T_(pdc))和绿色荧光蛋白开放阅读框(gfp)的人工转录单元.将含有IIS型限制内切酶Bbs I识别和酶切序列的特异性接头添加到P_(adh2)、T_(pdc)和gfp序列两侧,从而保证在一个反应体系中完成上述3个生物元件的酶切和连接,因此该技术被称作"One-POT".插入上述人工转录单元的穿梭质粒导入大肠杆菌和运动发酵单胞菌后可检测到发出绿色荧光的细胞.结果显示通过Golden Gate方法可有效组装转录单元所需DNA生物元件.本研究不仅可为运动发酵单胞菌合成生物学和代谢工程研究,尤其是设计多基因代谢途径组装方面提供技术工具,也可为评估运动发酵单胞菌内源启动子和终止子提供一种有效方法. 展开更多

关键词 分子组装 GOLDEN GATE 运动发酵单胞菌 转录单元 IIS型限制内切酶

原文传递

天蚕和柞蚕核多角体病毒DNA限制性内切酶酶解图谱的比较试验

11

作者 张秀珍 张显博 +3 位作者 孙芳义 邹碧珍 齐云翔 李鹤 《蚕业科学》 CAS CSCD 1996年第2期130-131,共2页

天蚕和柞蚕核多角体病毒ＤＮＡ限制性内切酶酶解图谱的比较试验张秀珍，张显博，孙芳义，邹碧珍，齐云翔，李鹤（黑龙江省蚕业研究所）（黑龙江省应用微生物研究所）用酚法提取天蚕和柞蚕ＮＰＶ－ＤＮＡ，并用限性内切酶ＥｃｏＲⅠ水解... 天蚕和柞蚕核多角体病毒ＤＮＡ限制性内切酶酶解图谱的比较试验张秀珍，张显博，孙芳义，邹碧珍，齐云翔，李鹤（黑龙江省蚕业研究所）（黑龙江省应用微生物研究所）用酚法提取天蚕和柞蚕ＮＰＶ－ＤＮＡ，并用限性内切酶ＥｃｏＲⅠ水解两种蚕的ＮＰＶ－ＤＮＡ，其酶切图谱... 展开更多

关键词 天蚕 柞蚕 核多角体病毒 核酸限制内切酶 酶谱

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脆壁克鲁维酵母基因置换技术的建立

12

作者 李杰 曹宇婷 +4 位作者 徐欣 张旭 李璐 吕洋 卢松冲 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期53-58,共6页

以中性乳糖酶生产菌脆壁克鲁维酵母为材料,构建以kan基因为筛选标记、以脆壁克鲁维酵母乳糖酶基因上游调控区为同源臂的质粒pPkan。将质粒pPkan电击转化脆壁克鲁维酵母,对受体菌生长时期、电场强度、电击后培养时间等条件进行优化。结... 以中性乳糖酶生产菌脆壁克鲁维酵母为材料,构建以kan基因为筛选标记、以脆壁克鲁维酵母乳糖酶基因上游调控区为同源臂的质粒pPkan。将质粒pPkan电击转化脆壁克鲁维酵母,对受体菌生长时期、电场强度、电击后培养时间等条件进行优化。结果表明,以OD600为0.8的脆壁克鲁维酵母为受体、电压1.5 kV、电场强度为7.5 kV.cm-1、电击后培养时间为90 min,可获得较高的转化率,最高转化效率为2.37×102转化子.μgDNA。在电击转化的同时加入限制性内切酶10μL,对电击转化的转化率无显著影响。经PCR筛选证实87.5%的转化子为同源重组,从而建立一套有效的脆壁克鲁维酵母基因置换技术。 展开更多

关键词 脆壁克鲁维酵母 电击转化 限制内切酶介导 同源重组 基因置换

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H19基因上游差异性甲基化区SNPs多态性研究

13

作者 王鑫 韦文滔 +6 位作者 王冬梅 丁梅 王保捷 庞灏 邢佳鑫 宣金锋 李春梅 《中国法医学杂志》 CSCD 2013年第1期14-17,I0003,共5页

目的获得H19基因上游差异性甲基化区中SNPs的群体遗传学信息。方法采用PCR和测序技术,对105例中国北方汉族健康无关个体H19上游启动子区检测;使用Haploview 4.1和PowerStats V12软件进行统计学分析。选用甲基化敏感的限制内切酶(msRE)Hp... 目的获得H19基因上游差异性甲基化区中SNPs的群体遗传学信息。方法采用PCR和测序技术,对105例中国北方汉族健康无关个体H19上游启动子区检测;使用Haploview 4.1和PowerStats V12软件进行统计学分析。选用甲基化敏感的限制内切酶(msRE)HpaⅡ,检测5个家系样本H19等位基因的亲代来源。结果测序结果显示,H19启动子区含有13个SNPs,组成5种单倍型,13种单倍型组合,其个体识别能力为0.856、多态性信息含量为0.67、非父排除率为0.498。经msRE HpaⅡ消化母源等位基因后,进行PCR及测序分析,检测出父源等位基因,排除1例和肯定4例家系的亲缘关系。结论 DNA甲基化标记和SNPs多态性检测,可同时进行多态性分型并确定等位基因的亲代来源,具有较高的法医学应用价值。 展开更多

关键词 法医物证学 DNA测序 单核苷酸多态性 甲基化敏感的限制内切酶

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