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题名利用pHsh载体克隆与表达双活性阿拉伯/木糖苷酶
被引量：1
- 1
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作者
彭静静
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机构
泰山学院生物与酿酒工程学院
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出处
《湖北农业科学》
北大核心
2014年第15期3662-3664,共3页
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基金
泰安市科技发展计划项目(20132094)
泰山学院博士科研启动金项目(Y-01-2013001)
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文摘
将来源于嗜热厌氧乙醇菌(Thermoanaerobacter ethanolicus JW200)的双活性阿拉伯/木糖苷酶(XarB)构建到新型热激质粒pHsh上,得到重组质粒。将重组质粒pHsh-xarB转入大肠杆菌(Escherichia coli JM109)。SDS-PAGE结果表明,该重组酶的分子量为86 kDa,与理论值相符。基于热激载体pHsh的重组表达系统具有诱导表达简便、诱导方式廉价的优点,且重组酶热稳定性好。
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关键词
阿拉伯/木糖苷酶
pHsh
克隆
表达
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Keywords
Arabinosidase-xylosidase
pHsh
cloning
expression
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分类号
Q814
[生物学—生物工程]
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题名多功能半纤维素酶的构建及其酶解应用分析
被引量：1
- 2
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作者
彭静静
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机构
泰山学院生物与酿酒工程学院
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出处
《湖北农业科学》
北大核心
2014年第16期3933-3935,3951,共4页
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基金
泰安市科技发展计划项目(20132094)
泰山学院博士科研启动金项目(Y-01-2013001)
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文摘
以前期构建的来源于嗜热厌氧乙醇菌(Thermoanaerobacter ethanolicus JW200)的双活性阿拉伯/木糖苷酶(XarB)和来源于疏棉状嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus DSM 5826)木聚糖酶A(XynA)融合酶为基础,在融合酶的两个催化结构域间插入多肽Linker,并通过优化Linker组成和长度避免催化结构域互相之间的干扰,以增强融合酶的催化效率。通过酶解燕麦木聚糖和麦麸试验发现,带有多肽Linker的融合酶催化效率得到了提高。
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关键词
半纤维素
阿拉伯/木糖苷酶
木聚糖酶
热激表达载体pHsh
酶解
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Keywords
hemicelluloses
arabinosidase-xylosidase
xylanase
heat shock expression vector pHsh
enzymolysis
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
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题名利用pET-20b克隆与表达多功能半纤维素酶
- 3
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作者
彭静静
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机构
泰山学院生物与酿酒工程学院
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出处
《湖北农业科学》
北大核心
2014年第17期4205-4207,共3页
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基金
泰安市科技发展计划项目(20132094)
泰山学院博士科研启动金项目(Y-01-2013001)
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文摘
将来源于嗜热厌氧乙醇菌(Thermoanaerobacter ethanolicus,JW200)的双活性阿拉伯/木糖苷酶(XarB)构建到pET-20b(+)上,得到质粒pET-20b-xarB。将来源于疏棉状嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus DSM 5826)木聚糖酶A(XynA)构建到pET-20b-xarB上,得到表达质粒pET-20b-xarB-xynA。将重组质粒pET-20b-xarB-xynA转入大肠杆菌Escherichia coli JM109(DE3)进行表达。SDS-PAGE结果显示,该重组酶的分子量为108 kDa,与理论值相符。
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关键词
阿拉伯/木糖苷酶
木聚糖酶
pET-20b(+)
多功能半纤维素酶
克隆
表达
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Keywords
arabinosidase-xylosidase
xylanase
pET-20b （＋）
XarB-XynA
cloning
expression
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分类号
Q785
[生物学—分子生物学]
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题名热稳定性α-阿拉伯糖苷酶/木糖苷酶的纯化
被引量：4
- 4
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作者
薛业敏
毛忠贵
邵蔚蓝
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机构
江南大学工业生物技术教育部重点实验室
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出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第9期22-26,共5页
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基金
国家轻工总局 2 1 1专项基金项目
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文摘
α 阿拉伯糖苷酶 /木糖苷酶对来源于被子植物的木聚糖类半纤维素的生物降解和转化是必不可少的。文中首次报道了国内对该酶的研究。α 阿拉伯糖苷酶 /木糖苷酶的基因工程菌在发酵罐中以LB为基质进行生长 ,以乳糖为诱导剂 ,所产生的α 阿拉伯糖苷酶 /木糖苷酶在 70℃热处理 3 0min后、经DEAE Sephacel阴离子柱层析、金属Ni2 + 的亲和层析等提纯步骤 ,达到了电泳纯 ,提纯倍数为 49 3倍 ,收率为 2 0 4%。SDS PAGE法测定α 阿拉伯糖苷酶/木糖苷酶的分子质量为 85ku 。
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关键词
α-阿拉伯糖苷酶/木糖苷酶
基因工程菌
发酵
纯化
重组酶
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Keywords
arabinofuranosidase-xylosidase, gene engneering strain, recombinase putification
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分类号
TQ914
[化学工程]
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