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题名菜豆环氧水解酶归一性水解间硝基环氧苯乙烷的研究
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作者
李闯
文正
刘畅
邬敏辰
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机构
江南大学生物工程学院
江南大学无锡医学院
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出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第1期73-80,共8页
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基金
国家自然科学基金面上项目(21676117)
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文摘
旨在研究菜豆环氧水解酶PvEH2对映归一性水解外消旋(rac-)间硝基环氧苯乙烷(mNSO)的特性,为制备光学纯(R)-间硝基苯乙二醇(mNPED)提供优良的生物催化剂。构建表达有重组PvEH2的工程菌E.coli/pveh2。以rac-mNSO为底物,借助手性色谱法分析E.coli/pveh2全细胞的EH活性和区域选择性。基于有机助溶剂种类和剂量对酶活性的影响,筛选并优化缓冲液/助溶剂反应体系。结果显示,在菜豆植株中,PvEH2基因的转录水平可能受体外环境诱导因素的影响。E.coli/pveh2的EH活性为15.4 U/g,水解反应的区域选择性系数αS和βR分别为90.3%和96.4%。在经过筛选优化的含有5%(V/V)丙三醇的磷酸干细胞盐缓冲液中,最高底物浓度为40 mmol/L,是原缓冲液体系的4倍。当反应至12 h时,所得(R)-mNPED的光学纯度eep及产率分别为84.9%和90.2%。E.coli/pveh2或PvEH2在水解rac-mNSO中表现出优秀的区域选择性,在制备光学纯(R)-mNPED中具有较好的应用潜力。
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关键词
环氧水解酶
对映归一性水解
间硝基环氧苯乙烷
间硝基苯乙二醇
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Keywords
epoxide hydrolase
enantioconvergent hydrolysis
m-nitrostyrene oxide
m-nitrophenyl-1,2-ethanediol
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分类号
S64
[农业科学—蔬菜学]
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