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凡纳滨对虾红体病病原菌间接ELISA快速检测方法的研究
被引量：
26
1
作者
樊景凤
梁玉波
+3 位作者
宋立超
王斌
臧红梅
李文哲
《水产学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第1期113-117,共5页
以凡纳滨对虾红体病病原菌副溶血弧菌为抗原,免疫兔获得高免血清,建立一种快速检测凡纳滨对虾红体病病原菌副溶血弧菌的ELISA技术。采用棋盘滴定法确定抗原和抗血清的最适工作浓度分别为106CFU·mL-1和1∶2000;病原菌检测灵敏度为每...
以凡纳滨对虾红体病病原菌副溶血弧菌为抗原,免疫兔获得高免血清,建立一种快速检测凡纳滨对虾红体病病原菌副溶血弧菌的ELISA技术。采用棋盘滴定法确定抗原和抗血清的最适工作浓度分别为106CFU·mL-1和1∶2000;病原菌检测灵敏度为每孔104CFU;抗血清与其它细菌标准菌株的交叉反应结果均呈阴性;阻断实验中的阻断率达75.88%;交叉反应和阻断实验结果表明该方法具有较高的特异性。将该方法标准化后检测了30份人工感染后的凡纳滨对虾和健康凡纳滨对虾,阳性检测率分别为93.3%和13.3%,表明该技术不仅能够检测已发病的凡纳滨对虾,而且能够检测带菌的凡纳滨对虾,这对于水产养殖业中疾病的早期诊断有着重要意义。
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关键词
凡纳滨对虾
红体病
副溶血弧菌
间接
elisa
技术
下载PDF
职称材料
用两种ELISA方法快速检测大菱鲆细菌性出血性败血症的病原菌
被引量：
8
2
作者
王斌
范薇
+3 位作者
李艳
丁鉴锋
孙岑
刘永波
《大连水产学院学报》
CSCD
北大核心
2008年第4期252-257,共6页
以大菱鲆Scophthalmus maxinzoa出血性败血症病原菌迟钝爱德华氏菌Edwardsiella tarda为抗原，从免疫家兔体内获得高免疫血清，建立快速检测大菱鲆出血性败血症病原迟钝爱德华氏菌的间接ELISA技术。采用棋盘滴定法确定间接ELISA抗原和...
以大菱鲆Scophthalmus maxinzoa出血性败血症病原菌迟钝爱德华氏菌Edwardsiella tarda为抗原，从免疫家兔体内获得高免疫血清，建立快速检测大菱鲆出血性败血症病原迟钝爱德华氏菌的间接ELISA技术。采用棋盘滴定法确定间接ELISA抗原和抗血清的最适工作浓度分别为10^7个／mL和1：20000；最低检测菌浓度为10^4个／mL；抗血清与其他细菌标准菌株的交叉反应结果均为阴性，表明该方法具有较高的特异性。将该方法优化后检测了19尾人工感染出血性败血症并发病的大菱鲆和19尾健康的大菱鲆，阳性检测率分别为89．5％和的10．5％。同时在间接ELISA方法的基础上建立竞争ELISA检测技术，结果表明：理想的包被抗原浓度为10^7个／mL，兔抗血清的工作浓度为1：20000，酶标抗体工作浓度为1：1000，可测最适范围为2×10^5～2×10^8个／mL，最低检测菌浓度为2×10^5个／mL，得到回归方程y=-0．3811x＋2．2335，R^2=0．992。
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关键词
大菱鲆出血性败血症
迟钝爱德华氏菌
间接
elisa
技术
竞争
elisa
技术
下载PDF
职称材料
鱼肠道弧菌间接ELISA快速检测法的建立
被引量：
7
3
作者
吴晓春
邓灯
+2 位作者
程顺峰
刘慧
姜令绪
《水产科学》
CAS
北大核心
2013年第5期284-288,共5页
为准确、快速诊断鱼肠道弧菌感染所致的海水鱼类全身性败血症,以鱼肠道弧菌为抗原,制备抗鱼肠道弧菌多克隆抗体,建立了鱼肠道弧菌间接酶联免疫吸附检测方法。该方法最佳反应条件为:抗原包被密度为107 cfu/mL,免疫血清稀释度为1∶211。...
为准确、快速诊断鱼肠道弧菌感染所致的海水鱼类全身性败血症,以鱼肠道弧菌为抗原,制备抗鱼肠道弧菌多克隆抗体,建立了鱼肠道弧菌间接酶联免疫吸附检测方法。该方法最佳反应条件为:抗原包被密度为107 cfu/mL,免疫血清稀释度为1∶211。病原菌检测灵敏度为每孔105 cfu/mL。抗血清与迟缓爱德华氏菌、杀鲑气单胞菌、恶臭假单胞菌、鱼肠道弧菌、副溶血弧菌、鳗弧菌、溶藻胶弧菌、秦皇岛弧菌8种水产致病菌的交叉反应结果呈阴性。用该法检测人工感染后的牙鲆和健康牙鲆,在发病鱼的肝脏、肾脏、脾脏、腹水等处检测出病原菌而健康鱼则为阴性。该技术能够准确、快速检测出鱼肠道弧菌。
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关键词
鱼肠道弧菌
间接
elisa
技术
检测方法
下载PDF
职称材料
题名
凡纳滨对虾红体病病原菌间接ELISA快速检测方法的研究
被引量：
26
1
作者
樊景凤
梁玉波
宋立超
王斌
臧红梅
李文哲
机构
东北农业大学
国家海洋环境监测中心
大连水产学院
出处
《水产学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第1期113-117,共5页
基金
国家863高技术研究发展计划项目(2002AA639470)
国家海洋局重点青年基金项目资助(2001303)
文摘
以凡纳滨对虾红体病病原菌副溶血弧菌为抗原,免疫兔获得高免血清,建立一种快速检测凡纳滨对虾红体病病原菌副溶血弧菌的ELISA技术。采用棋盘滴定法确定抗原和抗血清的最适工作浓度分别为106CFU·mL-1和1∶2000;病原菌检测灵敏度为每孔104CFU;抗血清与其它细菌标准菌株的交叉反应结果均呈阴性;阻断实验中的阻断率达75.88%;交叉反应和阻断实验结果表明该方法具有较高的特异性。将该方法标准化后检测了30份人工感染后的凡纳滨对虾和健康凡纳滨对虾,阳性检测率分别为93.3%和13.3%,表明该技术不仅能够检测已发病的凡纳滨对虾,而且能够检测带菌的凡纳滨对虾,这对于水产养殖业中疾病的早期诊断有着重要意义。
关键词
凡纳滨对虾
红体病
副溶血弧菌
间接
elisa
技术
Keywords
Litopenaeus vatmamei
red body disease
Vibrio parahaemolyticus
indirect enzyme-linked immunosorbent assay （
elisa
）
分类号
S945.1 [农业科学—水产养殖]
下载PDF
职称材料
题名
用两种ELISA方法快速检测大菱鲆细菌性出血性败血症的病原菌
被引量：
8
2
作者
王斌
范薇
李艳
丁鉴锋
孙岑
刘永波
机构
大连水产学院农业部海洋水产增养殖学与生物技术重点开放实验室
出处
《大连水产学院学报》
CSCD
北大核心
2008年第4期252-257,共6页
基金
辽宁省教育厅高等学校科研计划项目(2004D239)
文摘
以大菱鲆Scophthalmus maxinzoa出血性败血症病原菌迟钝爱德华氏菌Edwardsiella tarda为抗原，从免疫家兔体内获得高免疫血清，建立快速检测大菱鲆出血性败血症病原迟钝爱德华氏菌的间接ELISA技术。采用棋盘滴定法确定间接ELISA抗原和抗血清的最适工作浓度分别为10^7个／mL和1：20000；最低检测菌浓度为10^4个／mL；抗血清与其他细菌标准菌株的交叉反应结果均为阴性，表明该方法具有较高的特异性。将该方法优化后检测了19尾人工感染出血性败血症并发病的大菱鲆和19尾健康的大菱鲆，阳性检测率分别为89．5％和的10．5％。同时在间接ELISA方法的基础上建立竞争ELISA检测技术，结果表明：理想的包被抗原浓度为10^7个／mL，兔抗血清的工作浓度为1：20000，酶标抗体工作浓度为1：1000，可测最适范围为2×10^5～2×10^8个／mL，最低检测菌浓度为2×10^5个／mL，得到回归方程y=-0．3811x＋2．2335，R^2=0．992。
关键词
大菱鲆出血性败血症
迟钝爱德华氏菌
间接
elisa
技术
竞争
elisa
技术
Keywords
hemorrhagic septicemia
Edwardsiella tarda
indirect
elisa
competitive
elisa
分类号
S943 [农业科学—水产养殖]
下载PDF
职称材料
题名
鱼肠道弧菌间接ELISA快速检测法的建立
被引量：
7
3
作者
吴晓春
邓灯
程顺峰
刘慧
姜令绪
机构
青岛农业大学海洋科学与工程学院
出处
《水产科学》
CAS
北大核心
2013年第5期284-288,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30901106)
山东省自然科学基金资助项目(ZR2009DM036)
青岛农业大学高层次人才科研基金资助项目(630701)
文摘
为准确、快速诊断鱼肠道弧菌感染所致的海水鱼类全身性败血症,以鱼肠道弧菌为抗原,制备抗鱼肠道弧菌多克隆抗体,建立了鱼肠道弧菌间接酶联免疫吸附检测方法。该方法最佳反应条件为:抗原包被密度为107 cfu/mL,免疫血清稀释度为1∶211。病原菌检测灵敏度为每孔105 cfu/mL。抗血清与迟缓爱德华氏菌、杀鲑气单胞菌、恶臭假单胞菌、鱼肠道弧菌、副溶血弧菌、鳗弧菌、溶藻胶弧菌、秦皇岛弧菌8种水产致病菌的交叉反应结果呈阴性。用该法检测人工感染后的牙鲆和健康牙鲆,在发病鱼的肝脏、肾脏、脾脏、腹水等处检测出病原菌而健康鱼则为阴性。该技术能够准确、快速检测出鱼肠道弧菌。
关键词
鱼肠道弧菌
间接
elisa
技术
检测方法
Keywords
Vibrio ichthyoenteri indirect
elisa
detection method
分类号
S917 [农业科学—水产科学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
凡纳滨对虾红体病病原菌间接ELISA快速检测方法的研究
樊景凤
梁玉波
宋立超
王斌
臧红梅
李文哲
《水产学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
26
下载PDF
职称材料
2
用两种ELISA方法快速检测大菱鲆细菌性出血性败血症的病原菌
王斌
范薇
李艳
丁鉴锋
孙岑
刘永波
《大连水产学院学报》
CSCD
北大核心
2008
8
下载PDF
职称材料
3
鱼肠道弧菌间接ELISA快速检测法的建立
吴晓春
邓灯
程顺峰
刘慧
姜令绪
《水产科学》
CAS
北大核心
2013
7
下载PDF
职称材料
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