-
题名人体内耳冰冻切片免疫组织化学染色技术探讨
- 1
-
-
作者
李颖
陈彪
王乃利
郝欣平
-
机构
首都医科大学附属北京同仁医院耳鼻咽喉头颈外科
北京市耳鼻咽喉科研究所
中国医学科学院基础医学研究所教学中心形态实验室
-
出处
《首都医科大学学报》
CAS
北大核心
2022年第6期905-910,共6页
-
基金
北京市科技计划课题(Z171100000417050)。
-
文摘
目的通过对人内耳冰冻切片免疫组织化学染色制作过程中防脱片和抗原修复方法的探讨,寻找获得满意染色效果的最佳技术方法。方法取无已知耳科疾病的尸检颞骨标本,经取材、固定、脱钙、脱水、包埋后,行冰冻切片,-20℃冷冻保存。染色前的防脱片处理分为Ⅰ组(后固定组)、Ⅱ组(烤片组)和Ⅲ组(后固定联合烤片组)。处理后,每组再行抗原修复,分别分为A组(热修复组)、B组(酶消化组)和C组(Triton组)。应用间接荧光免疫组织化学技术检测WARP、NF200、CD68及IBA1这4种抗体在各组中的表达,激光共聚焦显微镜下观察,并对其脱片情况进行结果分析。结果在防脱片处理的3组中,Ⅲ组(后固定联合烤片组)的防脱片效果最佳,基本无脱片现象。抗原修复的3组中,A组和C组的抗原修复作用较为满意,B组修复作用不佳,且对组织的细胞结构产生了破坏作用。结论应用后固定联合烤片法防止脱片和应用热修复或Triton进行抗原修复在本研究中取得了良好的效果,适当的防脱片处理和抗原修复方法对提高内耳冰冻切片免疫组织化学染色的敏感性和制片质量起着至关重要的作用。
-
关键词
人内耳
冰冻切片
防脱片
抗原修复
间接荧光免疫组织化学技术
-
Keywords
human inner ear
frozen section
anti-slice escaping treatment
antigen retrieval
indirect immunofluorescence technique
-
分类号
R764.3
[医药卫生—耳鼻咽喉科]
-
