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差速贴壁法分离培养早期人胚骨髓间充质干细胞 被引量：4
1
作者 袁军 单立冬 +1 位作者 杨天明 惠国桢 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2005年第4期218-221,共4页
目的:探讨差速贴壁法从早期人胚股骨分离、纯化骨髓间充质干细胞(MSCs)的可行性,并观察培养细胞是否向神经元样细胞诱导分化。方法:取2～3月龄新鲜健康流产人胚股骨,切碎,接种玻璃培养瓶内培养8～12h,待较多的成纤维细胞贴壁,立刻将未... 目的:探讨差速贴壁法从早期人胚股骨分离、纯化骨髓间充质干细胞(MSCs)的可行性,并观察培养细胞是否向神经元样细胞诱导分化。方法:取2～3月龄新鲜健康流产人胚股骨,切碎,接种玻璃培养瓶内培养8～12h,待较多的成纤维细胞贴壁,立刻将未贴壁细胞转种至塑料培养瓶培养,并多次传代;用甲氧酚(BHA)和二甲亚砜(DMSO)诱导培养的细胞,免疫细胞化学方法检测诱导后细胞神经元烯醇化酶(NSE)、神经巢蛋白(Nestin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达情况。结果:原代培养3d可见塑料培养瓶内有长梭形细胞生长,至第10天前后形成集落样克隆,传至第4代后呈单层漩涡状排列的长梭形的成纤维样细胞,已无明显细胞克隆形成,经多次传代,细胞保持良好的增殖能力和稳定的性状;免疫细胞化学方法显示未诱导细胞NSE、Nestin、GFAP阴性,诱导后细胞NSE、Nestin呈阳性,GFAP阴性,间接证实培养所得细胞是MSCs。结论:差速贴壁培养法从早期人胚股骨中分离纯化MSCs,去除可能的成纤维细胞污染,是简便有效的,可供有关研究参考选择。 展开更多
关键词 骨髓基质细胞/细胞学 间充质干细胞/细胞学 间充质干细胞/胚胎学 细胞培养/方法 细胞分化 人类
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端粒酶与骨髓间充质干细胞 被引量：3
2
作者 徐燕 慕晓玲 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期1353-1355,共3页
目的:探讨导入外源性端粒酶逆转录酶能否使骨髓间充质干细胞生命周期延长,维持干细胞的自我更新能力和多向分化潜能,从而为其临床应用提供种子细胞。资料来源:应用计算机检索PubMed1980-01/2006-06期间有关端粒酶和骨髓间充质干细胞的文... 目的:探讨导入外源性端粒酶逆转录酶能否使骨髓间充质干细胞生命周期延长,维持干细胞的自我更新能力和多向分化潜能,从而为其临床应用提供种子细胞。资料来源:应用计算机检索PubMed1980-01/2006-06期间有关端粒酶和骨髓间充质干细胞的文献,检索词“telomere,telomerase,bone marrow cell,mesenchymal stem cell”,并限定文章语言种类为English。同时计算机检索CNKI数据库1994-01/2005-12和万方数据库2003/2006期间的相关文献,限定文章语言种类为中文,检索词“端粒,末端转移酶,骨髓细胞,间充质干细胞。”资料选择:选取试验包括间充质干细胞自身端粒酶活性组和间充质干细胞中外源性端粒酶逆转录酶的活性组比较的文章,进行初审,删除明显不相关的试验研究,然后查找余下的文献全文,进一步判断是否为端粒酶对间充质干细胞的作用。纳入标准:①与端粒酶有关,无论是组成或是功能相关的。②与间充质干细胞有关,并涉及其分化潜能研究。排除标准:端粒酶与间充质干细胞之间没有建立关联的试验。质量评价主要考察资料的真实性和试验的严谨性。资料提炼:共检索到256篇相关文献,其中30篇文献根据相应标准采纳,其余文献均被删除。资料综合:端粒酶的表达对于维持骨髓间充质干细胞自我更新能力和复制潜能具有重要意义。利用端粒酶逆转录酶修饰骨髓间充质干细胞,可有效地体外长期扩增并维持干/祖细胞的多向分化潜能特性;通过异位表达端粒酶逆转录酶使骨髓间充质干细胞永生化,可为骨髓间充质干细胞基础研究及临床应用提供药物筛选模型或细胞模型。结论:随着组织细胞工程学的兴起,体外定向诱导干/祖细胞分化为各种所需组织细胞已经成为研究的焦点,因此诱导和增加端粒酶的活性,维持干细胞分化、自我更新和增殖能力,延长干细胞的寿命有重要意义。 展开更多
关键词 端粒 末端转移酶 骨髓细胞 间充质干细胞/细胞学 干细胞
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人脐带间充质干细胞移植对小鼠干燥综合征的治疗作用及其机制 被引量：2
3
作者 黄守强 付艳霞 +3 位作者 毛科杰 张旭 张诚 彭秀军 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期780-785,共6页
背景干眼的发病率有逐渐升高的趋势，炎症反应参与干眼的发生和进展过程，而目前的治疗方法通常仅能缓解症状，而不能达到彻底治愈的目的。已有研究将干细胞移植用于眼表损伤引起的角膜缘干细胞缺乏症，但干细胞是否可用于干眼及其作用... 背景干眼的发病率有逐渐升高的趋势，炎症反应参与干眼的发生和进展过程，而目前的治疗方法通常仅能缓解症状，而不能达到彻底治愈的目的。已有研究将干细胞移植用于眼表损伤引起的角膜缘干细胞缺乏症，但干细胞是否可用于干眼及其作用机制的研究鲜见报道。目的探讨人脐带间充质干细胞（HUCMSCs）移植治疗干燥综合征的可行性及治疗途径。方法采用完全随机方法将20只24周龄雄性NOD／Ltj小鼠分为尾静脉注射组、泪腺注射组、点眼组和模型组，分别采用HUCMSCs悬液尾静脉注射法、泪腺注射法和点眼法进行HUCMSCs移植，模型组小鼠不移植HUCMSCs，采用ICR雄性小鼠5只作为正常对照。分别于注射后1、2和3周采用酚红棉线法测量各组小鼠的泪液分泌量；采用角膜荧光素钠染色法对角膜上皮的缺损情况进行评分；采用ELISA法检测各组小鼠血清白细胞介素（IL）-6、IL-17a、肿瘤坏死因子-α（TNF—α）和γ干扰素（IFN-γ）质量浓度；采用Western blot法检测各组小鼠泪腺组织中p65、Stat3、Stat5和细胞外信号调节激酶-1（Erk-1）的相对表达量。对各组小鼠上述指标的测定结果进行比较。结果模型组、尾静脉注射组、泪腺注射组和点眼组NOD／Ltj小鼠干预后1、2和3周时组间泪液分泌量的总体比较差异均有统计学意义（第1周：F=3．700，P=0．040；第2周：F=5．150，P=0．008；第3周：F=10．130，P〈0．001），其中注射后第1、2和3周尾静脉注射组、泪腺注射组小鼠的泪液分泌量均明显多于模型组，差异均有统计学意义（均P〈0．05），但各时间点点眼组小鼠的泪液分泌量与模型组比较差异均无统计学意义（均P〉0．05）。注射后1周ICR小鼠对照组、模型组、尾静脉注射组、泪腺注射组和点眼组角膜荧光素钠染色评分分别为3．00±0．63、9．40±1．62、5．20±1．17、4．20±1．17和 展开更多
关键词 脐带/细胞 间充质干细胞/细胞学 干细胞移植/方法 干燥综合征/治疗 炎性反应/免疫细胞因子 近交系NOD小鼠 泪器/病理
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