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长梗木霉纤维素酶的产生及提取 被引量：12
1
作者 谭宏 刘淑欢 +1 位作者 李剑英 郭楚盛 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第2期90-93,共4页
对长梗木霉(Trichoderma Longibrachiatum)ANU_3-958纤维素酶的产生及提取进行了研究。结果表明,固体曲培养144小时,固体曲与浸提液比例为1:7(W/V),采用硫酸铵分级沉淀法时所得纤维素酶活力最高。所得冻干纤维素酶粉经测定:羧甲基纤维素... 对长梗木霉(Trichoderma Longibrachiatum)ANU_3-958纤维素酶的产生及提取进行了研究。结果表明,固体曲培养144小时,固体曲与浸提液比例为1:7(W/V),采用硫酸铵分级沉淀法时所得纤维素酶活力最高。所得冻干纤维素酶粉经测定:羧甲基纤维素(CMC)酶活最高为2788.89IU/g,滤纸糖酶活(FPA)最高为79.44IU/g。相对固体曲得率平均为13.28%。 展开更多
关键词 长梗木霉 纤维素酶
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长梗木霉纤维素酶基因的克隆及序列分析 被引量：10
2
作者 石贤爱 刘月 +1 位作者 陈飞 杨锦 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期671-676,共6页
从富含纤维素环境筛选获得一株纤维素降解菌株FU05,通过形态学特征及ITS序列分析确定其为长梗木霉(Trichoderma longibrachiatum)。PCR扩增获得该菌株的bgl2、cbh2和eg1。序列分析表明,这3种纤维素酶基因与GenBank上其他木霉同种纤维素... 从富含纤维素环境筛选获得一株纤维素降解菌株FU05,通过形态学特征及ITS序列分析确定其为长梗木霉(Trichoderma longibrachiatum)。PCR扩增获得该菌株的bgl2、cbh2和eg1。序列分析表明,这3种纤维素酶基因与GenBank上其他木霉同种纤维素酶基因具有较高同源性:bgl2基因与里氏木霉bgl2基因(AB003110)同源性达91%;cbh2基因与康宁木霉cbh2基因(DQ504304)同源性达99%;eg1基因与长梗木霉eg1基因(X60652)同源性达95%。3种纤维素酶基因编码的相应氨基酸序列与其他木霉纤维素酶的氨基酸序列相似性也非常高。对上述纤维素酶基因编码的相应蛋白进行PROSITE motif search,对其N端糖基化位点、纤维素结合区、糖基水解酶家族特征结构区等进行了定位。 展开更多
关键词 长梗木霉 ITS序列 纤维素酶基因 同源性
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滇牡丹内生真菌PR35的鉴定及次生代谢产物的研究 被引量：8
3
作者 胡娟 王皎 +5 位作者 苗翠苹 玄其存 翟英哲 宋飞 陈有为 吴少华 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1602-1606,共5页
目的:对滇牡丹内生真菌PR35菌株进行菌种鉴定,并对其次生代谢产物的化学成分进行研究。方法:采用形态学观察结合ITS rDNA序列分析法进行菌种鉴定;应用多种柱色谱方法对其次生代谢产物进行分离纯化,并依据其理化性质及波谱数据鉴定化合... 目的:对滇牡丹内生真菌PR35菌株进行菌种鉴定,并对其次生代谢产物的化学成分进行研究。方法:采用形态学观察结合ITS rDNA序列分析法进行菌种鉴定;应用多种柱色谱方法对其次生代谢产物进行分离纯化,并依据其理化性质及波谱数据鉴定化合物结构。结果:菌株PR35鉴定为长梗木霉Trichoderma longibrachiatum;从菌株PR35的发酵产物中分离获得5个化合物,分别鉴定为1-(2,6-dihydroxyphenyl)-3-hydroxybutan-1-one(1),1-(2,6-dihydroxyphenyl)propan-1-one(2),1-(2,4,6-trihydroxyphenyl)butan-1-one(3),4-methoxy-1-naphthol(4)和啤酒甾醇(5),其中化合物1～3对灰葡萄孢、燕麦镰孢和紧密单孢枝霉显示明显的抗真菌活性。结论:内生真菌长梗木霉首次从滇牡丹植物中分离获得,5个化合物均为首次从滇牡丹内生真菌中分离得到,其中化合物4为首次从微生物发酵产物中获得。 展开更多
关键词 滇牡丹 内生真菌 长梗木霉 鉴定 次生代谢产物
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长梗木霉外切纤维素酶CBH Ⅱ基因的克隆及表达 被引量：6
4
作者 王娟 刘海英 +3 位作者 朱亚然 舒正玉 吴松刚 黄建忠 《药物生物技术》 CAS CSCD 2009年第2期95-98,共4页
分别以长梗木霉(Trichoderma longibrachiatum)XST1的基因组DNA和cDNA为模板PCR扩增其外切纤维素酶Ⅱ(cellobiohydrolaseⅡ,CBHⅡ)的全长基因cbhⅡ。序列分析表明:cbhⅡ基因全长1583bp,含3个内含子,分别为94～144bp,529～584bp和832～89... 分别以长梗木霉(Trichoderma longibrachiatum)XST1的基因组DNA和cDNA为模板PCR扩增其外切纤维素酶Ⅱ(cellobiohydrolaseⅡ,CBHⅡ)的全长基因cbhⅡ。序列分析表明:cbhⅡ基因全长1583bp,含3个内含子,分别为94～144bp,529～584bp和832～894bp。该基因编码的外切纤维素酶Ⅱ蛋白全长470个氨基酸(其中前24个氨基酸为信号肽)。将全长的cbhⅡ基因连接到pPIC3.5K上,转化毕赤酵母GS115(Pichia pastoris GS115)。重组转化子96h诱导培养,发酵上清液水解pNPC的酶活为18.1U/L。SDS-PAGE检测结果表明:浓缩的重组转化子发酵液较对照菌株的发酵液中,有一明显加强的蛋白质条带,Mr约为67k。 展开更多
关键词 长梗木霉 外切纤维素酶 毕赤酵母 表达
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寄生于南方根结线虫卵的长梗木霉几丁质酶基因TlChi46的克隆 被引量：6
5
作者 朱先婷 赵洋 +4 位作者 王凯 王凤龙 陈德鑫 梁文星 武侠 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期72-83,共12页
为进一步筛选高效寄生线虫真菌和阐明其寄生线虫卵的机理,本研究从湖北省烟草南方根结线虫雌虫分离到1株具高效生防潜力的菌株HBF1。形态学、rDNA-ITS和翻译延长因子tef1-α序列分析鉴定该菌为长梗木霉菌Trichoderma longibrachiatum,... 为进一步筛选高效寄生线虫真菌和阐明其寄生线虫卵的机理,本研究从湖北省烟草南方根结线虫雌虫分离到1株具高效生防潜力的菌株HBF1。形态学、rDNA-ITS和翻译延长因子tef1-α序列分析鉴定该菌为长梗木霉菌Trichoderma longibrachiatum,其对南方根结线虫卵第10 d寄生率为80.45%。通过简并引物设计和RACE技术克隆其几丁质酶基因,分析该基因序列及与其他几丁质酶的同源性。该菌是1株可以产生几丁质酶的南方根结线虫卵寄生真菌,第10 d几丁质酶的活性达到高峰,为24.88μmol/h/mL。本研究首次从长梗木霉HBF1菌株中克隆到1个几丁质酶基因TlChi46,该基因DNA全长1 793 bp,含3个内含子和1个1 272 bp的开放阅读框,编码423个氨基酸,理论分子量45.9 kDa,等电点5.23。同源性比对表明和昆虫寄生菌几丁质酶的亲缘关系较远。从长梗木霉HBF1中克隆得到的几丁质酶基因编码的几丁质酶的功能域可供进一步研究,高效产几丁质酶并有效寄生南方根结线虫卵的长梗木霉对南方根结线虫具有良好的生防潜力。 展开更多
关键词 克隆 长梗木霉 南方根结线虫卵 寄生 几丁质酶基因
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长梗木霉感染引起的腹膜炎1例报道 被引量：5
6
作者 郭建 何丽华 +3 位作者 倪丽君 吕莉 邓淑文 吴文娟 《检验医学》 CAS 2017年第12期1176-1178,共3页
木霉属真菌是-类常见的植物腐生菌和木腐菌,一直被认为是污染菌.木霉引起侵袭性感染的报道越来越多,免疫功能低下患者的侵袭性感染的报告尤为多见[1-3].长梗木霉是引起侵袭性真菌感染较为常见的菌种[3-4].本研究将分析1例长梗木霉感染... 木霉属真菌是-类常见的植物腐生菌和木腐菌,一直被认为是污染菌.木霉引起侵袭性感染的报道越来越多,免疫功能低下患者的侵袭性感染的报告尤为多见[1-3].长梗木霉是引起侵袭性真菌感染较为常见的菌种[3-4].本研究将分析1例长梗木霉感染引起的侵袭性腹膜炎病例. 展开更多
关键词 长梗木霉 腹膜炎 腹膜透析 药物敏感性试验
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长梗木霉ANU_3-958菌株原生质体诱变选育 被引量：2
7
作者 朱知难 吴军 《广州食品工业科技》 1997年第1期15-17,共3页
本研究是以在食品工业生产中有较广泛应用前景的纤维素酶的产生菌──长梗木霉ANU_3－958为出发菌株，探讨用溶壁酶对菌丝体进行破壁，提取原生质体再用秋水仙碱进行诱变处理，再生后经多次筛选，从中选育出三株酶活较高的菌株，提高最... 本研究是以在食品工业生产中有较广泛应用前景的纤维素酶的产生菌──长梗木霉ANU_3－958为出发菌株，探讨用溶壁酶对菌丝体进行破壁，提取原生质体再用秋水仙碱进行诱变处理，再生后经多次筛选，从中选育出三株酶活较高的菌株，提高最多的与出发菌株相比，FP酶活提高77．2％，酶活达237．6mg／g.h；CMC酶活提高17．5％，酶活达2457mg／g.h。并有高峰期提前，产孢子较少的优点。 展开更多
关键词 长梗木霉 菌株 诱变 选育 食品微生物学
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纸质文物表面木霉的反射式光纤光谱法无损检测
8
作者 陈焜 郭萌萌 +8 位作者 石胜辉 覃丹 罗彬彬 蒋上海 赵明富 唐欢 谭博文 宋涛 钟年丙 《光学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第20期53-64,共12页
为实现对纸质文物表面木霉生长过程的在线无损检测,设计了一种反射式内凹阶梯形斜面透镜光纤传感器。该传感器由中心1根入射光纤和内外层分别为6和12根接收光纤组成。建立了光纤传感器的检测原理,探究了传感器结构参数(入射光纤半径、... 为实现对纸质文物表面木霉生长过程的在线无损检测,设计了一种反射式内凹阶梯形斜面透镜光纤传感器。该传感器由中心1根入射光纤和内外层分别为6和12根接收光纤组成。建立了光纤传感器的检测原理,探究了传感器结构参数(入射光纤半径、接收光纤半径、光纤轴间距、光纤错位量和接收光纤倾斜角等)对传感器的检测灵敏度的影响,并进行了数值仿真。根据仿真结果制作最优性能的光纤传感器,并利用传感器对纸质文物样品表面的长梗木霉生长过程进行了在线检测。实验结果表明,该传感器对棉纸和毛边纸表面长梗木霉的特征吸收峰均为270 nm,吸收峰对应的吸光度与霉菌生长高度呈线性关系,对应的检测灵敏度分别为9.3×10^(-4)AU/μm和10.4×10^(-4)AU/μm。所设计的光纤传感器能对染墨前后棉纸和毛边纸表面的长梗木霉生长情况进行在线检测和准确识别,在纸质文物的霉菌防治领域具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 光纤传感器 纸质文物 长梗木霉 无损检测
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长梗木霉β-葡萄糖苷酶基因的克隆及表达 被引量：3
9
作者 钟斐 叶秀云 +4 位作者 李仁宽 严芬 林娟 华宝玉 杨捷 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1102-1111,共10页
【目的】以实验室筛选获得的一株长梗木霉GM2(Trichoderma longibrachiatum)为材料,克隆出其β-葡萄糖苷酶(β-Glucosidase)基因bgl并在大肠杆菌和酵母中进行表达。【方法】利用同源克隆扩增出其β-葡萄糖苷酶基因bgl全长序列,分别亚克... 【目的】以实验室筛选获得的一株长梗木霉GM2(Trichoderma longibrachiatum)为材料,克隆出其β-葡萄糖苷酶(β-Glucosidase)基因bgl并在大肠杆菌和酵母中进行表达。【方法】利用同源克隆扩增出其β-葡萄糖苷酶基因bgl全长序列,分别亚克隆到质粒pET-32a(+)和pPICZα-B中,构建其原核表达载体pET32a(+)-bglI和真核表达载体pPICZα-B-bgl。【结果】bgl基因序列全长2 369 bp,含两个内含子,编码744个氨基酸。在大肠杆菌BL21(DE3)中表达bgl,重组蛋白以包涵体形式存在,上清液中没有β-葡萄糖苷酶的酶活。将载体pPICZα-B-bgl电转化入毕赤酵母GS115,得到78 kD左右重组蛋白,与预测大小相符。按9%接种量接入50 mL YP培养基(初始pH 5.5),30°C振荡培养96 h,添加终浓度1%的甲醇诱导后β-葡萄糖苷酶酶活达60 U/mL。重组酶bgl催化水杨苷水解反应的最适pH为5.0,最适温度为70°C;另外,此bgl在pH 3.0 10.0和40°C 60°C范围内具有比较好的稳定性。【结论】长梗木霉GM2的β-葡萄糖苷酶在P.pastoris中获得可溶性表达,并证明有一定的活性。 展开更多
关键词 Β-葡萄糖苷酶 长梗木霉 克隆 表达 毕赤酵母
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真菌细胞溶壁酶的分离纯化及其酶学性质研究 被引量：1
10
作者 尹海滨 王婷 郑萍 《广州化工》 CAS 2010年第7期87-88,96,共3页
采用长梗木霉(Trichoderma Longibrachiatum Rifai)958-11菌株,经过发酵,分离提纯出一种真菌细胞溶壁酶,并对其进行酶学性质研究。长梗木霉培养,利用:(NH4)2SO4沉淀,sartobind S离子交换层析和Sephacryl S-200柱层析对该发酵液进行分离... 采用长梗木霉(Trichoderma Longibrachiatum Rifai)958-11菌株,经过发酵,分离提纯出一种真菌细胞溶壁酶,并对其进行酶学性质研究。长梗木霉培养,利用:(NH4)2SO4沉淀,sartobind S离子交换层析和Sephacryl S-200柱层析对该发酵液进行分离纯化,用担子菌做为酶反应的底物研究该酶的酶学性质。经发酵获得的酶液,可在最佳反应条件下,1～2h内产出原生质体105～106个/毫升酶液。酶反应最适温度为30℃,最适pH为5.4,可以在0.6mol/L的氯化钾或0.6mol/L的硫酸镁为等渗液的条件下,溶解部分担子菌的细胞壁,得到高活力的原生质体。 展开更多
关键词 溶壁酶 长梗木霉 原生质体
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