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长引物快速PCR结合核酸试纸条法可视化检测四种病原体 被引量:5
1
作者 黄欢 李朔 +1 位作者 孙丽洲 周国华 《标记免疫分析与临床》 CAS 2013年第6期436-439,共4页
目的建立一种基于病原体核酸分子的血液安全性检定方法,可视化区分血液中乙肝病毒(HBV)、丙肝病毒(HCV)、艾滋病毒(HIV)和梅毒螺旋体(TP)。方法利用长引物PCR扩增四种病原体核酸,循环步骤由传统的三步简化为两步。将修饰有小分子抗原的... 目的建立一种基于病原体核酸分子的血液安全性检定方法,可视化区分血液中乙肝病毒(HBV)、丙肝病毒(HCV)、艾滋病毒(HIV)和梅毒螺旋体(TP)。方法利用长引物PCR扩增四种病原体核酸,循环步骤由传统的三步简化为两步。将修饰有小分子抗原的扩增产物点样于固定有相应抗体的纳米颗粒试纸条上,肉眼判读显色结果。优化了长引物PCR对于四种病原体扩增的退火和变性温度,并评价了该方法用于病原体阳参及血清样本的检测准确性。结果四种病原体核酸扩增的退火温度分别为76℃、78℃、76℃和78℃;变性温度为84℃、90℃、84℃和88℃;本方法能成功区分四种病原体的阴阳性样本,准确性高;扩增时间仅为40 min/40个循环,检测为10 min。结论该方法能够用于四种病原体核酸的可视化检测,与传统的检测方法相比,检测速度快,成本低,无需昂贵的仪器,易于广大基层医院普及。 展开更多
关键词 引物聚合酶链反应 核酸试纸条法 病原体核酸
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山东地区AS患者HLA-B27基因多态性分析 被引量:3
2
作者 李钦伟 毛永鑫 +1 位作者 李文超 陈立辉 《医学检验与临床》 2006年第1期36-37,共2页
目的凋查HLA-B27等位基因在山东地区的分布情况,研究亚犁水平的HLA-B27等位基因与AS的相关性.方法应用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)技术检测山东地区HLA-B27阳性AS患者中B2701~25的等位基因.结果在36例HLA-B27阳性的AS患者中,... 目的凋查HLA-B27等位基因在山东地区的分布情况,研究亚犁水平的HLA-B27等位基因与AS的相关性.方法应用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)技术检测山东地区HLA-B27阳性AS患者中B2701~25的等位基因.结果在36例HLA-B27阳性的AS患者中,只检测到B*2704和B*2705两种业型等位基因,其中B*2704阳性13例,B*2705阳性23例,构成比分别是36.11%(13/36),63.89%(23/36).结论山东地区AS患者HLA-B27,等位基因以B*2704和B*2705为主,且B*2705最多见;不同地区、不同人群的AS患者,HLA-B27各亚型分布频率存在差异性. 展开更多
关键词 山东 地区 患者 等位基因 引物聚合酶链反应 阳性 序列特异性 技术检测 分布情况 分布频率 不同人群 相关性 构成比 差异性 种业 应用 亚型 方法 凋查
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金黄色葡萄球菌对万古霉素耐药情况调查 被引量:14
3
作者 代洪 范学工 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期259-262,共4页
目的调查金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)对万古霉素的耐药情况,并对敏感性降低菌株进行基因分型。方法对132株临床分离的金黄色葡萄球菌分别进行2μg/ml、4μg/ml万古霉素脑心浸液琼脂生长试验,4μg/ml生长试验阳性菌株用随机引... 目的调查金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)对万古霉素的耐药情况,并对敏感性降低菌株进行基因分型。方法对132株临床分离的金黄色葡萄球菌分别进行2μg/ml、4μg/ml万古霉素脑心浸液琼脂生长试验,4μg/ml生长试验阳性菌株用随机引物聚合酶链反应进行基因分型。并用菌群分析法筛查对万古霉素异质性耐药金黄色葡萄球菌。结果62株(47.0%)金黄色葡萄球菌能在含2μg/ml万古霉素的脑心浸液琼脂上生长,9株(6.8%)金黄色葡萄球菌能在含4μg/ml万古霉素的脑心浸液琼脂上生长,但其MIC皆≤2μg/ml。9株菌株都能产生独特稳定的AP-PCR谱型。有1株金黄色葡萄球菌对万古霉素异质性耐药。结论未发现对万古霉素完全耐药或中介耐药的金黄色葡萄球菌,异质性耐药金黄色葡萄球菌分离率为0.75%;在本地区尚无对万古霉素敏感性降低的同源株的流行趋势。 展开更多
关键词 万古霉素 耐药情况 耐药金黄色葡萄球菌 随机引物聚合酶链反应 敏感性降低 基因分型 试验 异质性耐药 临床分离 中介耐药 流行趋势 ml 菌株 琼脂 浸液 脑心 分析法 MIC PCR 全耐药 未发现 分离率
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用任意引物聚合酶链反应进行皮肤癣菌的子生物学研究 被引量:9
4
作者 孔祥明 杨国玲 +3 位作者 金礼吉 安利佳 李乔 林熙然 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期352-354,共3页
目的探讨任意引物聚合酶链反应(AP-PCR)方法对皮肤癣菌的分子生物学鉴定和分型的意义。方法用随机引物OPAA115'-ACCCGACCTG-3',OPD185'-GAGAGCCAAC-3'对皮肤癣菌的3个属9个种和孢子丝菌及白念珠菌共64个菌株进行AP-PCR... 目的探讨任意引物聚合酶链反应(AP-PCR)方法对皮肤癣菌的分子生物学鉴定和分型的意义。方法用随机引物OPAA115'-ACCCGACCTG-3',OPD185'-GAGAGCCAAC-3'对皮肤癣菌的3个属9个种和孢子丝菌及白念珠菌共64个菌株进行AP-PCR,并对扩增产物进行电泳分析。结果皮肤癣菌所试验的9个菌种之间均产生具有明显差异的电泳带型。来自不同地区的红色毛癣菌经多次实验均出现主带相同的电泳带型,同时存在株间差异。结论以OPAA11和OPD18为引物,用AP-PCR可对皮肤癣菌从基因分子水平上进行鉴别,并为分型提供依据。 展开更多
关键词 皮肤癣菌 任意引物聚合酶链反应 分子生物学
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ICU多药耐药鲍氏不动杆菌感染暴发分子流行病学与碳青酶烯耐药基因分析 被引量:13
5
作者 鲁怀伟 戴媛媛 马筱玲 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第18期2732-2734,共3页
目的了解医院ICU多药耐药鲍氏不动杆菌感染暴发的分子流行病学以及碳青酶烯类抗菌药物耐药的机制。方法收集2008年11月15日-12月9日ICU分离的非重复多药耐药鲍氏不动杆菌17株,使用微量稀释法测定抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC);采用肠杆... 目的了解医院ICU多药耐药鲍氏不动杆菌感染暴发的分子流行病学以及碳青酶烯类抗菌药物耐药的机制。方法收集2008年11月15日-12月9日ICU分离的非重复多药耐药鲍氏不动杆菌17株,使用微量稀释法测定抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC);采用肠杆菌科基因间重复一致序列引物聚合酶链反应(ERIC-PCR)分型法对其进行分子流行病学研究;对多种水解碳青酶烯类抗菌药物的β-内酰胺酶基因进行聚合酶链反应(PCR)。结果 17株多药耐药鲍氏不动杆菌16株对亚胺培南耐药,对除阿米卡星、头孢哌酮/舒巴坦外的常用抗菌药物多药耐药;ERIC-PCR分型显示14株为A2型、1株A1型、2株A3型;15株检出OXA-23型β-内酰胺酶基因、未检出OXA-24型β-内酰胺酶基因,9株检出VIM型β-内酰胺酶基因8、株检出IMP型β-内酰胺酶基因。结论 ICU存在由同一类型的多药耐药鲍氏不动杆菌感染暴发流行;对亚胺培南耐药主要是OXA-23型丝氨酸β-内酰胺酶基因、VIM和IMP型金属β-内酰胺酶基因。 展开更多
关键词 鲍氏不动杆菌 序列引物聚合酶链反应 Β-内酰胺
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皖北地区类风湿关节炎与HLA-DR4基因亚型的关联性研究 被引量:12
6
作者 段京明 李志军 +1 位作者 王瑞明 李季青 《实用全科医学》 2008年第5期469-470,共2页
目的研究人类白细胞抗原基因中的HLA-DR4基因亚型与皖北地区汉族人群类风湿关节炎(rheum atoid ar-thritis,RA)的发病及临床表现的关联性。方法采用特异性引物聚合酶链反应技术,检测皖北地区汉族人群102例RA患者及40例健康人HLA-DR4基... 目的研究人类白细胞抗原基因中的HLA-DR4基因亚型与皖北地区汉族人群类风湿关节炎(rheum atoid ar-thritis,RA)的发病及临床表现的关联性。方法采用特异性引物聚合酶链反应技术,检测皖北地区汉族人群102例RA患者及40例健康人HLA-DR4基因亚型,分析其与RA发病及临床表现的关联性。结果①对HLA-DRβ1基因亚型研究结果发现仅仅HLA-DRβ1*0405基因与RA有显著关联,2组比较差异有统计学意义(P<0.05),表明HLA-DRβ1*0405基因是皖北地区汉族人群RA易感基因的主要亚型。②HLA-DRβ1*0405阳性组晨僵时间明显比阴性组长(P<0.05),RF滴度阳性组明显比阴性组高,肺部病变阳性组比阴性组增多,差异有统计学意义(P<0.05)。结论皖北地区RA易感性与HLA-DRβ1*0405基因相关。HLA-DRβ1*0405基因与晨僵时间、RF有关,HLA-DRβ1*0405阳性患者更容易发生肺间质纤维化。 展开更多
关键词 关节炎 类风湿 人类白细胞抗原 特异性引物聚合酶链反应
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Methodological Studies on Genomic DNA Extraction and Purification from Plant Drug Materials 被引量:12
7
作者 曹晖 毕培曦 邵鹏柱 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS 1998年第3期18-25,共8页
This paper reports the rationale and methods of DNA extraction and purification from nine species of Compositae and four commercial drugs of corresponding plant Elephantopus scaber. The comparison of three methods: Cs... This paper reports the rationale and methods of DNA extraction and purification from nine species of Compositae and four commercial drugs of corresponding plant Elephantopus scaber. The comparison of three methods: CsCl gradient, CTAB/CsCl gradient and CTAB miniprep extraction by yield, purity and factors affecting PCR was carried out. In conclusion, CTAB miniprep method provides a rapid, effective, economic approach for isolating genomic DNA for Chinese drug identification by genomic fingerprints. 展开更多
关键词 DNA extraction DNA purification CTAB miniprep Genomic fingerprinting AP PCR
全文增补中
HLA-DQA1、-DRB1等位基因与子宫内膜异位症和子宫腺肌病的比较性研究 被引量:7
8
作者 宗利丽 潘德京 +4 位作者 陈为明 何援利 刘泽寰 林江海 徐安龙 《中华医学遗传学杂志》 EI CAS CSCD 2002年第1期49-51,共3页
目的 从免疫遗传学角度比较子宫内膜异位症和子宫腺肌病的异同。方法 采用顺序特异引物聚合酶链反应技术检测 5 1例子宫内膜异位症和 45例子宫腺肌病患者的 HL A- DQA1和 HL A- DRB1等位基因频率 ,并与 44名正常人比较。结果 两患者... 目的 从免疫遗传学角度比较子宫内膜异位症和子宫腺肌病的异同。方法 采用顺序特异引物聚合酶链反应技术检测 5 1例子宫内膜异位症和 45例子宫腺肌病患者的 HL A- DQA1和 HL A- DRB1等位基因频率 ,并与 44名正常人比较。结果 两患者组 HL A- DQA1* 0 30 1等位基因频率 (8.8% ,5 .6 % )均明显低于正常对照组 ,差异有显著性 (Pc=0 .0 0 ,Pc=0 .0 0 ) ,而两患者组的 HL A- DQA1* 0 40 1等位基因频率 (7.8% ,10 .0 % )均明显高于对照组 ,差异有显著性 (Pc=0 .0 3,Pc=0 .0 1) ;两患者组之间 HL A-DQA1、- DRB1各等位基因频率比较 ,差异无显著性。结论 子宫内膜异位症及子宫腺肌病均与 HL A-DQA1* 0 30 1、* 0 40 1相关联 ,从 HL A- DQA1、- DRB1角度分析 ,子宫内膜异位症与子宫腺肌病的发病机理可能有共同之处。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 子宫腺肌症 遗传易感性 人类白细胞抗原-DQA1基因分型 人类白细胞抗原-DRB1基因分型 顺序特异引物聚合酶链反应
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西南地区玉米纹枯病病菌融合群鉴定和UP-PCR分析 被引量:11
9
作者 崔丽娜 张小飞 +3 位作者 邹成佳 李晓 杨晓蓉 向运佳 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期914-920,共7页
为明确西南地区玉米纹枯病病菌组成结构,从西南地区(四川、贵州、云南和重庆)玉米纹枯病样上分离获得285个疑似丝核菌菌株,根据培养性状、菌丝形态和细胞核染色对其进行鉴定,通过载玻片配对培养法对鉴定出的菌株进行菌丝融合群鉴定,并采... 为明确西南地区玉米纹枯病病菌组成结构,从西南地区(四川、贵州、云南和重庆)玉米纹枯病样上分离获得285个疑似丝核菌菌株,根据培养性状、菌丝形态和细胞核染色对其进行鉴定,通过载玻片配对培养法对鉴定出的菌株进行菌丝融合群鉴定,并采用UP-PCR方法从各融合群中选取代表性菌株进行遗传变异分析。结果显示,供试疑似菌株中共鉴定出253个丝核菌,分别为224株立枯丝核菌Rhizoctonia solani和29株玉蜀黍丝核菌R.zeae。立枯丝核菌包括5个融合群,其中AG1-ⅠA共201株,出现频率为79.4%;AG1-ⅠB共2株,出现频率为0.8%;AG2-2ⅢB共3株,出现频率为1.2%;AG4-HGⅠ共10株,出现频率为3.9%;AG-5共8株,出现频率为3.2%。29株玉蜀黍丝核菌融合群均为WAG-Z,出现频率为11.5%。遗传变异分析中,当相似系数为0.78时,按照出现频率从立枯丝核菌和玉蜀黍丝核菌选取的不同融合群的20株菌株被划分为6个类群,与菌丝融合分析结果完全吻合,其中AG2-2ⅢB融合群首次从西南地区玉米上分离到。 展开更多
关键词 玉米纹枯病 融合群 通用引物聚合酶链反应技术
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Ax新基因的序列分析及其家系的研究 被引量:11
10
作者 喻琼 吴国光 +3 位作者 梁延连 邓志辉 苏宇清 王大明 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期75-78,共4页
目的探讨Ax亚型中国汉族家系的ABO基因的分子生物学特点。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应扩增法对血清学定为Ax血型的家系总共5份样本做基因分型,对其中4份样本进行直接测序,发现2份有异常杂合序列,进一步采用单倍体特异性引物进... 目的探讨Ax亚型中国汉族家系的ABO基因的分子生物学特点。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应扩增法对血清学定为Ax血型的家系总共5份样本做基因分型,对其中4份样本进行直接测序,发现2份有异常杂合序列,进一步采用单倍体特异性引物进行序列测定。结果这个家系中2份ABO基因序列与ABOA101相比有3个位点发生了突变(467C>T、829G>A,1009A>G),定为Ax新基因,Genbank注册号为DQ092380。结论829位突变导致编码ABO糖基转移酶的277位氨基酸由缬氨酸(Val)转变为甲硫氨酸(Met),很大程度上降低了A2糖基转移酶的活性。推测277位氨基酸处于ABO血型基因编码的转移酶的活性区域。 展开更多
关键词 ABO血型系统 序列分析 DNA 糖基转移 序列特异性引物聚合酶链反应 新基因 家系 ABO基因 分子生物学特点 ABO血型
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人乳头瘤病毒宫内感染的分子生物学研究 被引量:9
11
作者 丁锋 高锦声 +1 位作者 马旭 牛向兰 《中国优生与遗传杂志》 2002年第2期20-22,共3页
目的:通过对正常孕妇及胎儿HPV感染状况的研究,分析HPV宫内感染可能存在的途径。方法:以GP5+/6+为引物的通用引物PCR(GP-PCR),被证明是一种敏感性较高的人乳头瘤病毒检测方法〖16、18、19〗。本研究在此方法的基础上,利用生物素标记的引... 目的:通过对正常孕妇及胎儿HPV感染状况的研究,分析HPV宫内感染可能存在的途径。方法:以GP5+/6+为引物的通用引物PCR(GP-PCR),被证明是一种敏感性较高的人乳头瘤病毒检测方法〖16、18、19〗。本研究在此方法的基础上,利用生物素标记的引物(bio-GPbt),进行GP-PCR,并用因此而产生的生物素标记的PCR产物与特异性内寡核苷酸探针(SIOP)进行反向点杂交(RDBH),从而达到检测HPV感染并对其分型的目的。结果:1.在总计119份样品中,母血、胎儿脐带血、羊水、宫颈分泌物、胎盘组织母体面的HPV感染率分别为37.0%(10/27)、37.0%(10/27)、61.11%(11/18)、50.0%(10/20)、40.7%(11/27),说明妊娠末期孕妇有较高的感染率;2.对取自同一标本的5种样品(母血、胎儿脐带血、羊水、宫颈分泌物、胎盘组织母体面)进行检测,由于5种样品之间的感染率无显著性差别(P>0.1),结合观察到的实际结果,推测HPV有通过宫内感染途径感染胎儿的可能性;3.本研究还发现,在52份HPV阳性的样品中,有12份(23.1%)为多重HPV感染。另外,52份HPV阳性的样品(100%)均发现HPV11型,推测妊娠末期的孕妇主要以HPV11型感染为主。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 宫内感染 通用引物聚合酶链反应 反向点杂交
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PCR-SSP技术在红细胞ABO血型快速基因分型中的应用研究 被引量:10
12
作者 梁伟 周建霖 +6 位作者 杨亮 许德义 黄丹丹 邓刚 梅传亮 韩新乐 张哲 《中华全科医学》 2015年第8期1323-1327,F0003,共6页
目的探讨PCR-SSP技术用于临床标本红细胞ABO血型快速定型的可行性。方法利用PRIMER 5软件针对A101等位基因c DNA第261、703 SNP位点不同的碱基设计4对序列特异性引物;通过温度梯度PCR反应确定各个引物对的最佳退火温度;利用基因测序技... 目的探讨PCR-SSP技术用于临床标本红细胞ABO血型快速定型的可行性。方法利用PRIMER 5软件针对A101等位基因c DNA第261、703 SNP位点不同的碱基设计4对序列特异性引物;通过温度梯度PCR反应确定各个引物对的最佳退火温度;利用基因测序技术来评价PCR-SSP的性能;用100例临床盲样的SSP结果与其相应的血清学结果的比对来观测该方法临床应用的有效性;选择26例血清学定型结果有疑问的临床疑难标本进一步考察该法的性能。结果确定261G、261A、703A以及703G的最佳退火温度分别为70℃、64℃、60℃、64℃;通过随机抽取5例不同反应格局的标本进行第6、7外显子基因测序,测序结果表明该4对引物可以对261位点G缺失情况以及703位点G/A的分布情况进行有效鉴别;100例的临床盲样检测与血清学完全一致;26例血清学定型有疑问的标本通过该法可以为血清学实验提供有效的参考依据。结论 PCR-SSP基因分析技术在红细胞ABO血型快速鉴定方面具有可行性,在临床常规标本血型方面性能可靠并可作为ABO定型临床疑难标本进行进一步的DNA测序的依据。 展开更多
关键词 序列特异性引物聚合酶链反应 单核苷酸多态性 ABO血型 基因分型
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新疆维吾尔族儿童乳牙龋与变形链球菌基因型相关性的初步研究 被引量:7
13
作者 林静 赵今 +1 位作者 努尔比亚木·麦麦提依明 李新尚 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期267-271,共5页
目的探讨新疆维吾尔族不同龋敏感儿童口腔中变形链球菌基因多态性与乳牙龋发生的关系,以期为新疆维吾尔族儿童乳牙龋危险性预测和防治提供依据。方法选取新疆乌鲁木齐市3-5岁维吾尔族高龋(龋失补牙数≥5)和无龋(龋失补牙数=0)儿童... 目的探讨新疆维吾尔族不同龋敏感儿童口腔中变形链球菌基因多态性与乳牙龋发生的关系,以期为新疆维吾尔族儿童乳牙龋危险性预测和防治提供依据。方法选取新疆乌鲁木齐市3-5岁维吾尔族高龋(龋失补牙数≥5)和无龋(龋失补牙数=0)儿童各17名为研究对象,收集唾液样本,轻唾-杆菌肽琼脂培养基分离培养变形链球菌,典型菌落行革兰染色、生化鉴定并细菌保种,提取基因组DNA,采用OPA02、OPA05和OPAl3三个随机引物对变形链球菌临床分离株行随机引物聚合酶链反应基因分型及聚类分析。结果分别从高龋和无龋儿童口腔中分离鉴定变形链球菌81和62株,共得N40种不同的基因型。17例高龋儿童中9例携带1种基因型,5例携带2种基因型,3例携带3种基因型;17名无龋儿童中14名携带1种基因型,3名携带2种以上基因型。Spearman相关结果显示基因多态性与龋敏感相关(r=0.342,P〈0.05)。结论维吾尔族儿童口腔中变形链球菌菌株间存在明显的基因多态性,高龋儿童口腔中定植的变形链球菌有多种基因型,个体携带基因型的种类数与其致龋能力相关。 展开更多
关键词 维吾尔族 球菌 变异 基因型 随机引物聚合酶链反应
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河南汉族人群血小板抗原HPA1-16bw基因多态性研究 被引量:7
14
作者 滑世轩 王书勤 +1 位作者 岑东 燕备战 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期545-547,共3页
目的研究河南地区汉族人群血小板抗原基因分布频率,建立地区性血小板抗原基因库,为血小板配合输注提供实验依据。方法用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)对160例无血缘关系的河南汉族体检健康者进行HPA1-16bw系统基因分型。结果 HPA... 目的研究河南地区汉族人群血小板抗原基因分布频率,建立地区性血小板抗原基因库,为血小板配合输注提供实验依据。方法用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)对160例无血缘关系的河南汉族体检健康者进行HPA1-16bw系统基因分型。结果 HPA1-6和HPA-15基因频率分别为1a 0.987 5,1b 0.012 5;2a 0.946 9,2b 0.053 1;3a 0.590 6,3b0.409 4;4a 0.996 9,4b 0.003 1;5a 0.990 6,5b 0.009 4;6a 0.981 2,6b 0.018 8;15a 0.540 6,15b 0.459 4。HPA7-14bw,16bw仅检测到a/a等位基因,基因频率均为1.000 0。经χ2检验各系统HPA符合Hardy-Weinberg平衡法则。HPA基因分布存在种族和地区差异。结论河南汉族人HPA-15和HPA-3基因型杂合率最高。HPA基因分型有助于输注血小板时降低免疫性血小板减少症的发生概率。 展开更多
关键词 人类血小板抗原 序列特异性引物聚合酶链反应 基因分型 基因频率
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HLA-DRB1、DQB1基因多态性与流行性出血热的相关性 被引量:7
15
作者 冯继红 孙万邦 +3 位作者 罗军敏 李维宏 黄学贵 张忆雄 《山东医药》 CAS 北大核心 2009年第48期23-25,共3页
目的从基因水平探讨HLA-DRB1、DQB1等位基因多态性与流行性出血热的相关性,以阐述其免疫遗传学特征。方法应用序列特异性引物聚合酶链反应技术检测流行性出血热患者和正常对照组各50例的HLA-DRB1、DQB1等位基因。结果流行性出血热患者... 目的从基因水平探讨HLA-DRB1、DQB1等位基因多态性与流行性出血热的相关性,以阐述其免疫遗传学特征。方法应用序列特异性引物聚合酶链反应技术检测流行性出血热患者和正常对照组各50例的HLA-DRB1、DQB1等位基因。结果流行性出血热患者与正常对照组比较,HLA-DRB1*16等位基因分布频率明显增高(Pc=0.010 6),两组间其余HLA-DRB1-、DQB1等位基因分布频率差异无统计学意义(Pc>0.05)。结论HLA-DRB1*16等位基因与流行性出血热呈正相关,可能为流行性出血热易感基因之一。 展开更多
关键词 流行性出血热 序列特异性引物聚合酶链反应 人类白细胞抗原 相关性
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支气管哮喘HLA-DRB1等位基因分析 被引量:5
16
作者 李凤荣 刘云霞 李凤玲 《中国民政医学杂志》 2001年第5期269-270,288,共3页
目的 :用分子生物学的方法探讨HLA DRB1 等位基因与免疫遗传的关系。方法 :应用序列特异性引物聚合酶链反应 (PCR SSP)基因分型方法鉴定HLA DRB1 与天津地区支气管哮喘 (asthmaAS)的相关性。结果 :表明支气管哮喘患者的DR3 较健康对照... 目的 :用分子生物学的方法探讨HLA DRB1 等位基因与免疫遗传的关系。方法 :应用序列特异性引物聚合酶链反应 (PCR SSP)基因分型方法鉴定HLA DRB1 与天津地区支气管哮喘 (asthmaAS)的相关性。结果 :表明支气管哮喘患者的DR3 较健康对照明显升高 (11 76 %vs3 33% ,χ2 =4 2 5 ,P<0 0 5 ) ;而DR6(1 3 ) 在支气管哮喘患者中虽有升高 ,但无统计学意义 (8 82 %vs 4 44 % ,χ2 =1 2 5 ,P >0 0 5 ) ;支气管患者DR2 (1 5) 频率明显降低 (5 88%vs 16 6 7% ,χ2 =4 2 6 ,P <0 0 5 )。结论 :表明DR3 与支气管哮喘易感性呈正相关 ,而DR2 (1 5) 展开更多
关键词 支气管哮喘 人类白细胞抗原 序列特异性引物聚合酶链反应 HLA-DRB等位基因 免疫遗传 遗传易感性
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二球悬铃木花粉变应原特应性体质与HLA-DRB1等位基因相关性分析 被引量:6
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作者 齐名 魏花 +2 位作者 朱琴 王艾丽 熊华 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期401-403,共3页
目的建立对二球悬铃木花粉过敏的特应性体质者的HLA-DRB1等位基因的PCR-SSP检测方法,探讨江苏汉族人二球悬铃木花粉变应原特应性体质者与HLA-DRB1等位基因的相关性。方法用酚-氯仿法提取全血DNA,合成8对等位基因特异性引物,用PCR-SSP方... 目的建立对二球悬铃木花粉过敏的特应性体质者的HLA-DRB1等位基因的PCR-SSP检测方法,探讨江苏汉族人二球悬铃木花粉变应原特应性体质者与HLA-DRB1等位基因的相关性。方法用酚-氯仿法提取全血DNA,合成8对等位基因特异性引物,用PCR-SSP方法检测20例江苏汉族二球悬铃木花粉过敏体质者和36例健康人HLA-DRB1*0401,*0402,*0403,*0404,*0405,*0406,*0407,*0408等位基因。结果经优化实验条件,建立了HLA-DRB1的8个等位基因的PCR-SSP检测方法,获得了患者组和健康人组上述HLA-DRB1等位基因的分布资料。二球悬铃木花粉变应原特应性体质者DRB1*0405和*0406基因频率高于健康人对照组而DRB1*0402基因频率低于健康人对照组。其他5个等位基因频率二组间无显著性差异。结论HLA-DRB1*0406和*0405可能是对二球悬铃木花粉变应原过敏的I型变态反应特应性体质者的可疑候选易患等位基因,而DRB1*0402基因可能是与之相关的具有抵抗作用的等位基因。 展开更多
关键词 人类白细胞抗原 等位基因 二球悬铃木花粉 变应原 序列特异性引物聚合酶链反应
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我国嗜人按蚊不同地理株基因鉴别的初步研究 被引量:5
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作者 高琪 周华云 +5 位作者 潘波 杨文 郭传昆 黄光全 李菊林 沈宝祥 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2002年第6期325-327,共3页
目的 分析不同地区嗜人按蚊的基因特征。 方法 选择 13种随机引物对嗜人按蚊江苏、广西和四川实验株以及从湖北和广东现场捕获的嗜人按蚊进行随机引物 PCR扩增 ,并以中华按蚊江苏实验株为对照。 结果  13种随机引物中有 7种随机引... 目的 分析不同地区嗜人按蚊的基因特征。 方法 选择 13种随机引物对嗜人按蚊江苏、广西和四川实验株以及从湖北和广东现场捕获的嗜人按蚊进行随机引物 PCR扩增 ,并以中华按蚊江苏实验株为对照。 结果  13种随机引物中有 7种随机引物对中华按蚊和 5个地区的嗜人按蚊 PCR扩增的结果存在差别。S-随机引物对中华按蚊和不同地区嗜人按蚊的扩增结果出现明显差异。中华按蚊和不同地区的嗜人按蚊均出现 4 5 0 bp较强扩增条带。但 2 4 0 bp的强扩增条带为中华按蚊所特有。嗜人按蚊江苏和四川实验株分别在 2 30 bp和 32 0 bp处有 1条强扩增条带 ,而从湖北和广东现场采集的嗜人按蚊分别在 4 0 0 bp和 2 6 0 bp处出现较强的扩增条带。 结论 采用随机引物 PCR技术对不同地区嗜人按蚊的基因分析已显示明显差异。已发现的一些特有的 DNA扩增条带可被用作进一步的基因特征分析和鉴别。 展开更多
关键词 嗜人按蚊 随机引物聚合酶链反应 基因鉴定 疟疾 预防
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Rh缺失型D--个体及其家系成员基因分型及遗传背景分析 被引量:6
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作者 伍伟健 郭如华 余晋林 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2010年第8期881-884,共4页
目的分析Rh缺失型D--个体及其家系成员的基因分型及遗传背景。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP),对Rh缺失型D--个体及其家系成员的RHD和RHCE基因的特异性序列进行扩增,并对扩增产物进行分析。结果先证者家系成员PCR结果与... 目的分析Rh缺失型D--个体及其家系成员的基因分型及遗传背景。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP),对Rh缺失型D--个体及其家系成员的RHD和RHCE基因的特异性序列进行扩增,并对扩增产物进行分析。结果先证者家系成员PCR结果与血清学表型基本相符,先证者RHD基因未见异常,未检出RHCE基因的特异性序列,其他家系成员均有正常表型及RHCE基因PCR产物。结论先证者RHCE基因大部分或全部缺失是造成其Rh缺失型D--的重要分子基础。先证者RHCE基因缺失,很可能其父母双方分别携带一条D--单倍型,在遗传时均将其遗传给先证者,从而形成Rh缺失型D--。 展开更多
关键词 Rh缺失型D-- 序列特异性引物聚合酶链反应 基因分型 遗传
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HLA-DRB1基因多态性与汉族人溃疡性结肠炎的相关性研究 被引量:6
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作者 吕敏 夏冰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期752-755,759,共5页
目的:研究HLA-DRB1基因多态性与汉族人溃疡性结肠炎(UC)的相关性,以期发现UC的易感基因.方法:采用序列特异性引物聚合酶链反应的方法对汉族72例UC患者和314例正常对照者HLA-DRB1基因分型.结果:UC患者携带DRB1*07等位基因的频率较正常对... 目的:研究HLA-DRB1基因多态性与汉族人溃疡性结肠炎(UC)的相关性,以期发现UC的易感基因.方法:采用序列特异性引物聚合酶链反应的方法对汉族72例UC患者和314例正常对照者HLA-DRB1基因分型.结果:UC患者携带DRB1*07等位基因的频率较正常对照组高(19.4%vs 9.2%,P=0.022 9,OR=2.372,95% CI:1.181~4.766),但经Bonferroni校正后PC>0.05,差异无显著性.在临床亚型分析中,全结肠炎组和无肠外表现组的DRB1*07的频率明显增高.在中重度组中DRB1*07和DRB1*14的频率显著增高,轻度组的DRB1*16的频率明显增高,而携带DRB1*03的5例患者在临床上均表现为轻度,这些差异与正常对照组相比均有统计学意义.且在轻度组中的DRB1*16的频率同样明显高于在中重度组的频率.结论:在汉族人群中,HLA-DRB1*07与全结肠炎、无肠外表现以及中重度UC呈正相关,HLA-DRB1*14和HLA-DRB1*16分别与中重度和轻度UC呈正相关,而HLA-DRB1*03与中重度UC呈负相关,提示HLA-DRB1等位基因与中国汉族人群的UC临床表型有关. 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 HLA—DRB1 序列特异性引物聚合酶链反应
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