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Pythium sp．GY1938菌株类枯草菌素蛋白酶Pr1基因的克隆与序列分析 被引量：4
1
作者 杨平 李敏惠 苏晓庆 《成都医学院学报》 CAS 2006年第1期5-8,共4页
目的克隆Pythium sp.CY1938菌株类枯草菌素蛋白酶Pr1基因。方法在已经克隆得到的Pythi- um sp.GY1938菌株类枯草菌素蛋白酶cDNA片段的基础上,首先通过PCR扩增得到与其相对应的基因组DNA片段,然后分别通过Mini基因组DNA文库法和Panhandle... 目的克隆Pythium sp.CY1938菌株类枯草菌素蛋白酶Pr1基因。方法在已经克隆得到的Pythi- um sp.GY1938菌株类枯草菌素蛋白酶cDNA片段的基础上,首先通过PCR扩增得到与其相对应的基因组DNA片段,然后分别通过Mini基因组DNA文库法和Panhandle PCR法扩增其上游和下游未知片段,最后通过PCR法扩增得到类枯草菌素蛋白酶基因片段。结果克隆得到1 519bp Pr1蛋白酶基因序列YP1977.DNAassist软件分析其中含有一个969bp的完整的开放阅读框,编码323个氨基酸,NCBI BlastX比对结果显示,该阅读框可能编码的氨基酸序列与多个物种的Pr1蛋白酶都具有较高的同源性。结论YP1977很可能是Pythium sp.CY1938菌株类枯草菌素蛋白酶Pr1基因的部分片段,但仍需要进一步通过构建表达系统加以验证。 展开更多
关键词 类枯草菌素蛋白酶 克隆 基因组文库 锅柄聚合酶链式反应
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