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大鼠胰星状细胞的分离与培养 被引量：8
1
作者 贾一韬 李兆申 《胰腺病学》 2003年第3期158-161,共4页
目的　建立大鼠胰星状细胞 (pancreatic stellate cells,PSCs)的分离培养方法。方法　大鼠胰腺组织经胶原酶和链霉蛋白酶 E消化后 ,用 Nycodenz不连续密度梯度离心法分离 PSC,在 32 8nm紫外光激发下观察细胞的自发荧光现象 ,并以免疫组... 目的　建立大鼠胰星状细胞 (pancreatic stellate cells,PSCs)的分离培养方法。方法　大鼠胰腺组织经胶原酶和链霉蛋白酶 E消化后 ,用 Nycodenz不连续密度梯度离心法分离 PSC,在 32 8nm紫外光激发下观察细胞的自发荧光现象 ,并以免疫组化技术检测结蛋白 (desmin)、神经胶质原纤维酸性蛋白 (glial fibrillary acidic protein,GFAP)和α-平滑肌动蛋白 (α- sm ooth m uscle actin,α- SMA )的表达 ,同时观察培养细胞的形态和生长特性。结果　新鲜分离的大鼠 PSCs产率、活力和纯度分别约为 2 .5 ×10 6 /g胰腺、95 %和 90 %。培养的 PSCs可自发活化 ,表达 α- SMA,细胞由静止型转化为肌成纤维样细胞表型。原代培养 10天后细胞纯度 >95 % ,传代培养后细胞纯度可达 99%以上。结论　利用 Nycodenz密度梯度离心方法可成功分离大鼠 PSCs,其细胞产率、活力和纯度均可满足体外研究需要。 展开更多
关键词 大鼠 胰星状细胞 分离 培养 胰腺组织经胶原酶 链霉蛋白酶e
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豚鼠支气管平滑肌细胞的分离 被引量：1
2
作者 刘志洋 姚平 佟文革 《第四军医大学吉林军医学院学报》 2001年第1期26-27,共2页
目的　探讨豚鼠支气管平滑肌细胞的分离方法。方法　通过链霉蛋白酶E消化气管和肺组织 ,并辅以离心、机械吹打等手段 ,获取细胞后观察其形态、数目。结果　获得带状或纺锤状细胞 ,其细胞膜光滑、胞质均匀、核呈圆形或椭圆形 ;用乙酰胆... 目的　探讨豚鼠支气管平滑肌细胞的分离方法。方法　通过链霉蛋白酶E消化气管和肺组织 ,并辅以离心、机械吹打等手段 ,获取细胞后观察其形态、数目。结果　获得带状或纺锤状细胞 ,其细胞膜光滑、胞质均匀、核呈圆形或椭圆形 ;用乙酰胆碱刺激细胞能产生收缩。结论　用酶消化 30min ,以 12 0 0r/min离心 60min ,可获得形态较好、数目多。 展开更多
关键词 链霉蛋白酶e 平滑肌 支气管 分离
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乳化剂和破乳剂
3
作者 龚小芬 孙占宁 《精细石油化工文摘》 CAS 1995年第12期22-28,共7页
关键词 乳化剂 复配物 甲基丙烯酸 表面活性剂 聚合动力学 苯乙烯 乳液聚合 链霉蛋白酶e 乳化活性 IPC
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测定海产品中5种砷形态国家标准方法的改进
4
作者 翁城武 高功敏 +2 位作者 朱鸿达 黄伙水 徐敦明 《理化检验（化学分册）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期319-323,共5页
国家标准GB5009.11-2014测定食品中砷形态含量时,前处理方法需经放置过夜、热提取、离心、萃取及过滤等较多步骤,耗时较长,且测定方法高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法(HPLC-ICP-MS)中流动相需配制4种不同含量的无机盐,还须调节流... 国家标准GB5009.11-2014测定食品中砷形态含量时,前处理方法需经放置过夜、热提取、离心、萃取及过滤等较多步骤,耗时较长,且测定方法高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法(HPLC-ICP-MS)中流动相需配制4种不同含量的无机盐,还须调节流动相酸度,较为复杂.针对上述问题,改进了国家标准前处理方法,优化了国家标准第二法的色谱条件,提出了基于微波辅助酶提取-HPLC-ICP-MS快速测定食品中5种砷形态含量的方法.将样品1.0 g、链霉蛋白酶E酶0.004 g和水20 mL置于微波提取仪中,于35℃提取45 min,提取液离心10 min,再经0.45μm水性滤膜过滤即得样品溶液.以Hamilton PRP-X100色谱柱为固定相,体积比99∶1的2.0 mmol􀅰L^(-1)的磷酸二氢铵溶液(pH 8.0)-乙醇的混合液为流动相等度洗脱,按仪器工作条件进行测定.结果表明:5种砷形态的标准曲线的线性范围均为2.5~30.0μg·L^(-1),检出限(3s/k)为0.50~0.60μg·L^(-1).按标准加入法进行回收试验,回收率为90.0%~103%,测定值的相对标准偏差(n=5)为0.80%~5.0%.方法用于实际样品的分析,并与GB 5009.11-2014中第二法的测定结果进行比对,结果表明改进后的方法与GB 5009.11-2014不存在显著性差异(P>0.05). 展开更多
关键词 高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法 微波提取 链霉蛋白酶e酶 砷形态 海产品
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