生物素亲合素的免疫化学 被引量：6

1

作者 李成文 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1990年第1期27-29,共3页

生物素-亲合素系统的免疫化学及与之相关的技术,已逐渐完善,其应用日益广泛。它几乎同当代所有的标记物质相结合,形成了八十年代敏感特异的标记技术。同时,国外早已有齐全的试剂出售,国内也开始有几种试剂盒提供。当前,这一技术已成为... 生物素-亲合素系统的免疫化学及与之相关的技术,已逐渐完善,其应用日益广泛。它几乎同当代所有的标记物质相结合,形成了八十年代敏感特异的标记技术。同时,国外早已有齐全的试剂出售,国内也开始有几种试剂盒提供。当前,这一技术已成为医学和生物学等基础学科中,较有发展前景的技术之一。 展开更多

关键词 生物素 亲合素 链亲合素 免疫化学

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生物素－链亲合素系统在生物学中的应用 被引量：2

2

作者 彭小君 《标记免疫分析与临床》 CAS 1995年第3期174-176,共3页

生物素－链亲合素系统在生物学中的应用彭小君综述陈智周审校生物素－亲合素系统（Ｂｉｏｔｉｎ－ａｖｉｄｉｎｓｙｓｔｅｍ，ＢＡＳ）是七十年代后期发展起来的一种生物反应放大系统。链亲合素（Ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ，ＳＡ）是与... 生物素－链亲合素系统在生物学中的应用彭小君综述陈智周审校生物素－亲合素系统（Ｂｉｏｔｉｎ－ａｖｉｄｉｎｓｙｓｔｅｍ，ＢＡＳ）是七十年代后期发展起来的一种生物反应放大系统。链亲合素（Ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ，ＳＡ）是与亲合素（ＡＶ）有相似生物学特性的一... 展开更多

关键词 生物素 链亲合素 BAS 生物学

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链亲合素包被磁珠用于PCR-SSCP检测耐利福平结核分支杆菌rpoB基因突变的实验研究 被引量：1

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作者 安燕生 丁北川 《中国防痨杂志》 CAS 1998年第2期79-82,共4页

在ＰＣＲ－ＳＳＣＰ（聚合酶链反应－单链构象多态性分析）技术用于结核分支杆菌ｒｐｏＢ基因突变的检测中，为解决传统解链方法的复性和电泳需在低温条件下进行的问题，我们应用磁珠解链法，即在ＰＣＲ扩增时应用生物素标记正向引物（... 在ＰＣＲ－ＳＳＣＰ（聚合酶链反应－单链构象多态性分析）技术用于结核分支杆菌ｒｐｏＢ基因突变的检测中，为解决传统解链方法的复性和电泳需在低温条件下进行的问题，我们应用磁珠解链法，即在ＰＣＲ扩增时应用生物素标记正向引物（反向引物未标记），然后用链亲合素包被磁珠吸附扩增产物中被标记的ＤＮＡ。在碱性环境时，互补ＤＮＡ解链后磁珠沉于管底的同时将被标记的ｓｓＤＮＡ携带沉降；而管中未标记的互扑单链ＤＮＡ则游离于变性液中，随后被吸出，这样两条互补单链ＤＮＡ被完全分开，使ＤＮＡ复性问题得以解决。同时使电泳可在常温下进行。应用磁珠解链法较之传统解链方法所得泳带清晰易辨，显示出该方法用于ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术检测结核分支杆菌ｒｐｏＢ基因突变的实用价值。 展开更多

关键词 结核分支杆菌 基因突变 利福平 耐药性 链亲合素

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mIL21-SA双功能融合蛋白锚定治疗膀胱癌实验研究

4

作者 王菲 胡志明 +5 位作者 法萍萍 白莉 石小军 罗满生 李金龙 高基民 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期83-87,共5页

目的:制备链亲合素标记的鼠白细胞介素21融合蛋白(mIL21-SA),治疗小鼠表浅膀胱癌。方法:构建mIL21-SA-pET21质粒,BL21表达,Ni-NTA纯化,透析复性,Western blot鉴定,MTT法检测其对小鼠胸腺细胞的增殖作用,流式检测其对生物素化的MB49锚定... 目的:制备链亲合素标记的鼠白细胞介素21融合蛋白(mIL21-SA),治疗小鼠表浅膀胱癌。方法:构建mIL21-SA-pET21质粒,BL21表达,Ni-NTA纯化,透析复性,Western blot鉴定,MTT法检测其对小鼠胸腺细胞的增殖作用,流式检测其对生物素化的MB49锚定修饰率。建立小鼠MB49表浅膀胱癌模型,将mIL21-SA锚定在小鼠膀胱表面进行治疗并观察小鼠存活时间。60d后对mIL21-SA治疗后存活小鼠进行二次攻击。结果:mIL21-SA可以促进T细胞增殖,且具有SA介导的高效结合已生物素化的MB49表面的功能(修饰率98.74%)。膀胱灌注60d后,mIL21-SA组有10只(10/25)存活,二次攻击后,仍有6只(6/10)存活。与对照组比较均有统计学意义(P<0.05)。结论:该实验研制了具有双重活性的mIL21-SA,mIL21-SA锚定修饰治疗表浅膀胱癌是一种有效的免疫治疗方法。 展开更多

关键词 链亲合素 白细胞介素21 锚定 表浅膀胱癌

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生物素链亲合素ELISA法检测人白细胞介素-6 被引量：2

5

作者 汪义军 全竹富 黎介寿 《肠外与肠内营养》 CAS 1998年第2期105-106,共2页

白细胞介素－６（ＩＬ－６）是由单核巨噬细胞所产生的一种多肽，参与创伤、感染、休克、多器官功能衰竭等多种病理生理过程，检测ＩＬ－６含量变化对细菌性脓毒血症的诊断、病程和预后判断极有价值〔１，２〕。目前检测ＩＬ－６方法有... 白细胞介素－６（ＩＬ－６）是由单核巨噬细胞所产生的一种多肽，参与创伤、感染、休克、多器官功能衰竭等多种病理生理过程，检测ＩＬ－６含量变化对细菌性脓毒血症的诊断、病程和预后判断极有价值〔１，２〕。目前检测ＩＬ－６方法有两种〔３〕：第一种是生物活性检测法... 展开更多

关键词 ELISA IL-6 酶标链亲合素

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生物素链亲合素ELISA检测人肿瘤坏死因子 被引量：1

6

作者 汪义军 黎介寿 全竹富 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期348-349,共2页

我们以国产重组肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）为原料，制备了高质量的抗血清，采用生物素链亲合素系统，建立了检测人血清ＴＮＦα的ＥＬＩＳＡ法，方法灵敏、准确。１材料和方法１．１试剂ＴＮＦα标准品购自北京邦定生物医学公司，重组... 我们以国产重组肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）为原料，制备了高质量的抗血清，采用生物素链亲合素系统，建立了检测人血清ＴＮＦα的ＥＬＩＳＡ法，方法灵敏、准确。１材料和方法１．１试剂ＴＮＦα标准品购自北京邦定生物医学公司，重组人ＴＮＦα为南京军区军事医学研究所... 展开更多

关键词 血清诊断 TNFΑ 生物素链亲合素 ELISA

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酶联反应板包被链霉亲合素的优化方法 被引量：2

7

作者 刘宾 汤汉文 +2 位作者 魏华琳 董红军 吴希阳 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期137-139,共3页

目的对链霉亲合素(streptavidin,SA)预包被酶联反应板的优化方法进行研究,比较干法、湿法包被的优越性。方法通过对包被缓冲液、SA浓度、17种市售反应板的比较试验,得出SA包被的较优条件。结果选择洁特高亲和力板,采用碳酸缓冲液干法包... 目的对链霉亲合素(streptavidin,SA)预包被酶联反应板的优化方法进行研究,比较干法、湿法包被的优越性。方法通过对包被缓冲液、SA浓度、17种市售反应板的比较试验,得出SA包被的较优条件。结果选择洁特高亲和力板,采用碳酸缓冲液干法包被,37℃温育16 h至全干,达最佳包被效果,此时SA浓度为2μg/ml。干法包被的孔间差2.95%,批间差7.37%,37℃保存7 d结合生物素的效果无显著改变。生物素结合量为每孔1 ng,是国产SA预包被反应板的5倍。结论用干法预包被SA优于传统的湿法包被,效果等同甚至超过现有进口SA预包被板。 展开更多

关键词 链霉亲合素 生物素 干法包被 湿法包被 酶联反应板

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SA—ELISA测定血清中M2胆碱能受体IgG抗体的研究 被引量：2

8

作者 刘慧荣 李飒 《中国实验临床免疫学杂志》 1999年第3期46-49,共4页

研究一种特异的心脏Ｍ２受体自身抗体的检测方法。方法；以合成的人心脏Ｍ２受体细胞外第二环功能表位肽段的氨基酸序列作为特异性抗原，建立了一种甸霉亲和素－酶联免疫吸附实验技术，检测了５３例扩张性心肌病患者和１０例健康血清中... 研究一种特异的心脏Ｍ２受体自身抗体的检测方法。方法；以合成的人心脏Ｍ２受体细胞外第二环功能表位肽段的氨基酸序列作为特异性抗原，建立了一种甸霉亲和素－酶联免疫吸附实验技术，检测了５３例扩张性心肌病患者和１０例健康血清中抗Ｍ２受体的自身抗体，并将结果与ＡＥＬＩＳＡ比较。结果；阴性质控血清的批内变异系数和批间ＣＶ分别为３．８％和８．１％；阳性质控血清分别为６．４％和１３．２％。 展开更多

关键词 链霉亲合素 ELISA 自身抗体 心肌病

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间接包被ELISA法检测血清游离β-HCG 被引量：1

9

作者 陈淑莲 李向东 +3 位作者 李灵俊 曾昭伟 李会强 王学谦 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期267-268,共2页

目的研制生物素-亲合素间接包被ELISA法定量检测血清游离β-HCG试剂盒。方法用生物素化牛血清清蛋白和链霉亲合素包被微孔反应板,生物素化抗游离β-HCG抗体和酶标记抗游离β-HCG抗体检测游离β-HCG,评价试剂盒相关技术参数。结果本试剂... 目的研制生物素-亲合素间接包被ELISA法定量检测血清游离β-HCG试剂盒。方法用生物素化牛血清清蛋白和链霉亲合素包被微孔反应板,生物素化抗游离β-HCG抗体和酶标记抗游离β-HCG抗体检测游离β-HCG,评价试剂盒相关技术参数。结果本试剂盒具有较好的稳定性,灵敏度0.1 ng/ml,回收率95.9%～102.5%,批内CV7.5%～11.1%,批间CV12.5%～18.1%,与FSH、TSH、LH和α-HCG的交叉反应率均<0.1%,检测范围0.1～500 ng/ml,与美国DRG公司试剂盒的相关系数r2=0.789 2,P<0.05。结论本方法研制的试剂盒灵敏度高,特异性好,操作方法简便,适于临床常规应用。 展开更多

关键词 游离Β-HCG 生物素化牛血清清蛋白 链霉亲合素 酶联免疫吸附试验

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HLA—G在寻常性银屑病中的表达

10

作者 沈军 赵玉铭 +1 位作者 王雅坤 高连基 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期199-200,共2页

以往的研究显示，人类白细胞抗原G（HLA—G）是一种免疫耐受分子，它与许多临床疾病有密切联系。我们应用免疫组化标记亲合素生物素-链霉亲合素法（LAB—SA）Xq寻常性银屑病皮损中HLA—G进行检测，以探讨HLA—G在寻常性银屑病中的表达。

关键词 寻常性银屑病 HLA 人类白细胞抗原 链霉亲合素 免疫组化标记 银屑病皮损 免疫耐受 临床疾病

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链霉亲合素-DTPA-Gd经腹腔和静脉注射后对荷瘤裸鼠磁共振肿瘤靶向成像的强化效应(英文)

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作者 叶靖 许乙凯 +1 位作者 刘岘 吕国士 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期139-143,共5页

目的研究比较链霉亲合素(SA)-DTPA-Gd经腹腔和静脉注射后对荷瘤裸鼠体内肿瘤的强化效应,以提高磁共振(MR)靶向成像的敏感性。方法 12只荷人结肠癌裸鼠经尾静脉注射生物素化单抗600μg,24 h后腹腔注射80μg亲和素,30 min后分别经静脉和... 目的研究比较链霉亲合素(SA)-DTPA-Gd经腹腔和静脉注射后对荷瘤裸鼠体内肿瘤的强化效应,以提高磁共振(MR)靶向成像的敏感性。方法 12只荷人结肠癌裸鼠经尾静脉注射生物素化单抗600μg,24 h后腹腔注射80μg亲和素,30 min后分别经静脉和腹腔给予SA-DTPA-Gd。分别在给药前和给药后20、60 min和3、6、9、12、24 h进行MR 扫描并记录比较肿瘤和肝脏的信号强度。结果静脉组和腹腔组中肿瘤的最大强化率分别为70．2％和46．4％,两者具有显著性差异;静脉组和腹腔组中肝脏的最大强化率分别为20．4％和23．7％,两者间差异不显著。结论生物素化单克隆抗体和SA-DTPA-Gd对肿瘤具有特异性靶向增强作用;血药浓度较高是静脉注射SA-DTPA-Gd比腹腔注射更有利于皮下肿瘤强化的原因。 展开更多

关键词 链霉亲合素 磁共振成像 单克隆抗体

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应用生物素-链霉亲合素放大ELISA系统检测抗环瓜氨酸肽抗体 被引量：13

12

作者 房国祥 吴云娟 +2 位作者 王书侠 虞伟 李晓军 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期20-23,共4页

目的用生物素-链霉亲合素放大ELISA系统建立一种敏感、特异、经济简便的抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体的测定法。方法用链霉亲合素(SA)预包被,使生物素化的CCP(bio-CCP)固相化,摸索检测抗CCP抗体的最优实验条件,并进行方法学考核和临床应用评... 目的用生物素-链霉亲合素放大ELISA系统建立一种敏感、特异、经济简便的抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体的测定法。方法用链霉亲合素(SA)预包被,使生物素化的CCP(bio-CCP)固相化,摸索检测抗CCP抗体的最优实验条件,并进行方法学考核和临床应用评价。结果本法对类风湿关节炎(RA)的诊断敏感性为69.4%,特异性为96.8%,阳性预测值为89.1%,阴性预测值为94.1%,阳性似然比为19.28,阴性似然比为0.317,Youden指数为0.658。与欧蒙试剂比对,两法所测抗CCP抗体吸光度/cutoff比值显著相关(n=61,r=0.9253,P<0.001)。在所统计的168例血清样本中,两法同时阳性者60例,同时阴性者105例,一致性百分率达98.2%,结果具有高度一致性(Kappa=0.961,P<0.001)。ROC曲线分析结果显示本法所测抗CCP抗体对RA诊断准确性达到了一个较高水平(AUCROC值=0.901)。在13例诊断为早期RA者中,有10例抗CCP抗体阳性(阳性率76.9%),未发现抗CCP抗体与RA患者临床症状、疾病活动指标(ESR)及RF水平有关。结论成功将生物素-链霉亲合素ELISA系统应用于抗CCP抗体检测,方法敏感、特异、可靠,可用于RA的常规实验室诊断。 展开更多

关键词 环瓜氨酸肽 类风湿关节炎 酶联免疫吸附试验 生物素一链霉亲合素

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心肌营养素-1 ELISA测定法的建立及初步应用 被引量：6

13

作者 林楚佳 林少达 +2 位作者 吴丛梅 黄天华 陈伟莹 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期183-185,共3页

目的应用生物素链霉亲和素酶联免疫吸附法(BSA ELISA)建立血浆心肌营养素1(CT1)测定法,并初步应用于冠心病患者血浆CT1水平的检测。方法用鼠抗重组人CT1单抗包被酶标板,加入待测抗原,并依次加入生物素化羊抗重组人CT1多克隆抗体、辣根... 目的应用生物素链霉亲和素酶联免疫吸附法(BSA ELISA)建立血浆心肌营养素1(CT1)测定法,并初步应用于冠心病患者血浆CT1水平的检测。方法用鼠抗重组人CT1单抗包被酶标板,加入待测抗原,并依次加入生物素化羊抗重组人CT1多克隆抗体、辣根过氧化物酶标记链霉亲合素,用H2O2邻苯二胺显色。检测35名冠心病患者及对照组血浆CT1含量的变化。结果方法的线性范围为10～2000pg/ml,检测下限为10pg/ml,批内变异系数为1.76%～7.64%,批间变异系数为5.96%～9.04%。结论该方法简便、快速,特异性、敏感性、重复性均在临床检测可接受范围内,标准曲线线性良好,适用于基础研究与临床检验。 展开更多

关键词 心肌营养素-1 生物素-链霉亲合素 酶联免疫吸附法 冠心病 实验室检查

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生物素对生物素-链霉亲合素免疫分析系统干扰的研究进展 被引量：5

14

作者 冯珍如 《临床检验杂志》 CAS 2019年第1期1-4,共4页

外源性生物素对生物素-链霉亲合素免疫分析系统的干扰现象,近几年广受关注。使用该系统方法进行检测的常规项目,如激素、心肌标志物和肿瘤标志物,可受到生物素不同程度的干扰,导致结果异常,甚至造成疾病的误诊或误治。该文对生物素的应... 外源性生物素对生物素-链霉亲合素免疫分析系统的干扰现象,近几年广受关注。使用该系统方法进行检测的常规项目,如激素、心肌标志物和肿瘤标志物,可受到生物素不同程度的干扰,导致结果异常,甚至造成疾病的误诊或误治。该文对生物素的应用及其干扰生物素-链霉亲合素免疫分析系统的情况进行概述,并分析消除干扰的对策。 展开更多

关键词 生物素 生物素-链霉亲合素系统 干扰

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量子点标记链酶亲合素-生物素系统用于抗核抗体检测的对比研究与评价 被引量：1

15

作者 张晶 虞伟 +3 位作者 夏海萍 李晓军 张宇 顾宁 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2015年第12期895-897,共3页

目的对比研究不同颜色量子点(QDs)标记链霉亲合素(SA)-生物素系统在抗核抗体(ANA)间接免疫荧光实验(IIFA)检测中的效果,评价其在临床样本检测中的应用价值。方法 Hep-2细胞为抗原片,分别以QD655-SA、QD605-SA、QD565-SA结合生物素化羊抗... 目的对比研究不同颜色量子点(QDs)标记链霉亲合素(SA)-生物素系统在抗核抗体(ANA)间接免疫荧光实验(IIFA)检测中的效果,评价其在临床样本检测中的应用价值。方法 Hep-2细胞为抗原片,分别以QD655-SA、QD605-SA、QD565-SA结合生物素化羊抗人Ig G(生物素化二抗),用IIFA检测临床样本血清ANA,以异硫氰酸荧光素(FITC)标记二抗(FITC-二抗)为对照。比较和评价3种QDs-SA的应用效果。结果对114例患者血清研究发现,QD655-SA、QD605-SA、QD565-SA结合生物素二抗检测可见与FITC-二抗检测ANA结果相同或类似的荧光模式,阳性结果符合率均为100%,平均抗体滴度均高于FITC-二抗标记检测结果(P<0.01)。尤其对核仁型、核均质型与核点型ANA荧光模式检测效果优于FITC-二抗结果。相关分析结果显示:QD655-SA、QD605-SA、QD565-SA与FITC-二抗标记ANA定性结果高度一致(Kappa=0.979),滴度均呈高度正相关(P均<0.01)。结论 QDs-SA用于IIFA法检测ANA总体结果稳定、灵敏、可行,可获得较FITC-二抗检测更加敏感和稳定的实验结果。 展开更多

关键词 量子点标记链霉亲合素 抗核抗体 间接免疫荧光分析 异硫氰酸荧光素

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谷氨酸脱羧酶抗体检测的生物素．链霉亲合素放大ELISA系统构建及其临床应用

16

作者 汪海东 楼旭丹 +2 位作者 夏世金 张晓丽 孙皎 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期320-322,共3页

目的建立检测谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)的新方法,即生物素-链霉亲合素放大ELISA系统(ELISA,BAS ELISA),并进行验证及初步临床应用。方法人脑组织经过破碎、抽提、二次凝胶过滤层析与阴、阳离子交换层析分离蛋白,收集纯化的谷氨酸脱羧酶(GA... 目的建立检测谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)的新方法,即生物素-链霉亲合素放大ELISA系统(ELISA,BAS ELISA),并进行验证及初步临床应用。方法人脑组织经过破碎、抽提、二次凝胶过滤层析与阴、阳离子交换层析分离蛋白,收集纯化的谷氨酸脱羧酶(GAD);以链霉亲和素(SA)预包被,使GAD生物素化(bio-GAD),探讨检测GADA的最优实验条件,并对BAS ELISA的灵敏度、特异性、准确性及精密性进行验证。然后选择新诊断的成年1型糖尿病患者106例(T1DM组),以健康体检者98例为对照组,抽取空腹外周静脉血3 ml,分离血清冷冻标本,用构建的BASELISA和德国宝灵曼公司Anti-GAD65 ELISA检测血清中的GADA,对比研究并进行统计学分析。结果成功构建了检测GADA的BAS ELISA新方法;在T1DM组中,BAS ELISA方法测得T1DM的GADA阳性率显著高于anti-GAD65 ELISA方法(82.08%vs 52.83%,P<0.01);在对照组中BASELISA方法测得T1DM的GADA阳性率也明显高于anti-GAD65 ELISA方法(10.20%vs 6.12%,P<0.05)。结论利用生物素-链霉亲合素放大系统可以构建检测GADA的ELISA新方法;生物素-链霉亲合素放大ELISA系统在检测GADA方面具有较高的特异性、灵敏度、准确性和精密性,提高了GADA检测的阳性率,降低T1DM的漏检率,为早期检测T1DM提供新方法。 展开更多

关键词 糖尿病 谷氨酸脱羧酶 谷氨酸脱羧酶抗体 酶联免疫检测法 生物素-链霉亲合素

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酶标链霉亲合素——生物素法检测外周血T细胞亚群技术的改进

17

作者 宋秀云 陈念永 王素君 《职业卫生与病伤》 2001年第2期127-127,共1页

关键词 酶标链霉亲合素 生物素法 外周血T细胞亚群

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