超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD,EC1.15.1.1)是广泛存在于生物体的重要抗氧化酶之一,在抵御过多活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)对机体毒害的过程中起重要作用。本研究采用RT-PCR及RACE方法,从草鱼(Ctenopharyngodon i...超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD,EC1.15.1.1)是广泛存在于生物体的重要抗氧化酶之一,在抵御过多活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)对机体毒害的过程中起重要作用。本研究采用RT-PCR及RACE方法,从草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肝胰脏中克隆了Cu/Zn-SOD全长c DNA。该Cu/Zn-SOD c DNA(Gen Bank登录号:GU901214)全长725 bp,包括完全开放阅读框(ORF)465 bp,5’端非编码区(5’-UTR)为18 bp,3’-UTR为242 bp。其ORF编码154个氨基酸,分子量约为15.93 k D,理论等电点为5.57。序列比较表明,草鱼Cu/Zn-SOD c DNA的推测氨基酸序列与其它多种动物的一致性较高,其一致性为57.8%~96.8%;同时,具有Cu/Zn-SOD家族保守的4个Cu2+结合位点即组氨酸H-47、-49、-64、-121和4个锌离子结合位点即H-64、-72、-81及天冬氨酸D-84,一对二硫键即两个半胱氨酸残基C-58、-147及蛋白家族标签序列45'GFHVHAFGDNT'55与139'GNAGGRLACGVI'150。应用实时荧光定量PCR检测了草鱼Cu/Zn-SOD m RNA组织表达特征。结果显示,Cu/Zn-SOD m RNA在草鱼在11种组织器官内均有表达,但不同组织之间差异很大;其中在肝胰脏Cu/Zn-SOD m RNA的表达水平最高,显著高于其它组织(p<0.05),而在脂肪中表达丰度最低(p<0.05)。该研究结果将有助于进一步探讨鱼类Cu/Zn-SOD基因的结构与功能,并为研究其抗氧化分子机理奠定基础。展开更多
文摘超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD,EC1.15.1.1)是广泛存在于生物体的重要抗氧化酶之一,在抵御过多活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)对机体毒害的过程中起重要作用。本研究采用RT-PCR及RACE方法,从草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肝胰脏中克隆了Cu/Zn-SOD全长c DNA。该Cu/Zn-SOD c DNA(Gen Bank登录号:GU901214)全长725 bp,包括完全开放阅读框(ORF)465 bp,5’端非编码区(5’-UTR)为18 bp,3’-UTR为242 bp。其ORF编码154个氨基酸,分子量约为15.93 k D,理论等电点为5.57。序列比较表明,草鱼Cu/Zn-SOD c DNA的推测氨基酸序列与其它多种动物的一致性较高,其一致性为57.8%~96.8%;同时,具有Cu/Zn-SOD家族保守的4个Cu2+结合位点即组氨酸H-47、-49、-64、-121和4个锌离子结合位点即H-64、-72、-81及天冬氨酸D-84,一对二硫键即两个半胱氨酸残基C-58、-147及蛋白家族标签序列45'GFHVHAFGDNT'55与139'GNAGGRLACGVI'150。应用实时荧光定量PCR检测了草鱼Cu/Zn-SOD m RNA组织表达特征。结果显示,Cu/Zn-SOD m RNA在草鱼在11种组织器官内均有表达,但不同组织之间差异很大;其中在肝胰脏Cu/Zn-SOD m RNA的表达水平最高,显著高于其它组织(p<0.05),而在脂肪中表达丰度最低(p<0.05)。该研究结果将有助于进一步探讨鱼类Cu/Zn-SOD基因的结构与功能,并为研究其抗氧化分子机理奠定基础。
