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铅暴露对神经胶质瘤细胞铜代谢的影响及其机制 被引量:6
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作者 张洁琼 于海波 +3 位作者 宋晗 陈景元 骆文静 郑刚 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期182-187,共6页
目的:研究铜转运蛋白1(CTR1)、铜转运 ATP 酶α多肽(ATP7A)在铅暴露诱导大鼠 C6胶质瘤细胞铜离子代谢紊乱及氧化应激反应中的作用。方法采用噻唑蓝法(MTT),通过 C6细胞暴露于醋酸铅0~100μmol·L -124和48 h 筛选适合剂量... 目的:研究铜转运蛋白1(CTR1)、铜转运 ATP 酶α多肽(ATP7A)在铅暴露诱导大鼠 C6胶质瘤细胞铜离子代谢紊乱及氧化应激反应中的作用。方法采用噻唑蓝法(MTT),通过 C6细胞暴露于醋酸铅0~100μmol·L -124和48 h 筛选适合剂量。C6细胞用醋酸铅10μmol·L -1分别处理24和48 h 后,分别采用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸比色法(TBA)检测铅对细胞 SOD 活性和 MDA 含量;原子吸收分光光度法观察铅对细胞内铜水平;荧光实时定量 PCR 和 Western blot 分别检测铅暴露后细胞 CTR1和ATP7A 的 mRNA 和蛋白表达水平的变化。结果醋酸铅浓度高于10μmol·L -1时,细胞活力受到显著抑制,故选择铅10μmol·L -1为铅暴露浓度。与正常对照组相比,单独铅或铜处理组 SOD 活性下降,MDA 含量增高,而铅与铜联合处理组 SOD 活性下降及 MDA 含量增高的程度更加显著(P <0.01)。与正常对照组比较,醋酸铅10μmol·L -1处理 C6细胞24和48 h 后,细胞对铜的吸收量分别增加1.2倍和2.5倍(P <0.01),CTR1 mRNA 水平分别增高23.2%和58.7%(P <0.01),而 ATP7A mRNA 水平分别下调58.1%和50.0%(P <0.01)。与正常对照组比较,醋酸铅10μmol·L -1暴露组 CTR1蛋白水平显著增高,而ATP7A 蛋白表达降低(P<0.01)。结论铅暴露可以导致细胞中铜的蓄积和氧化应激反应的增强,其分子机制可能与影响 C6细胞 CTR1和 ATP7A 的表达水平有关。 展开更多
关键词 代谢 转运蛋白1 转运ATP酶α肽
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顺铂降低铜离子转运蛋白1表达诱导人食管鳞癌细胞耐药 被引量:6
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作者 余乐 陈明辉 +3 位作者 古春萍 李亦蕾 曹之宪 刘叔文 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期911-915,共5页
目的诱导对顺铂耐药的人食管鳞癌细胞株,并进一步研究细胞耐药性产生的机制。方法逐渐增加顺铂浓度处理人食管鳞癌细胞HKESC-1,诱导顺铂耐药细胞株HKESC-1/cis。MTT法观察顺铂的细胞毒作用以及细胞的生长曲线。电感耦合等离子体质谱检... 目的诱导对顺铂耐药的人食管鳞癌细胞株,并进一步研究细胞耐药性产生的机制。方法逐渐增加顺铂浓度处理人食管鳞癌细胞HKESC-1,诱导顺铂耐药细胞株HKESC-1/cis。MTT法观察顺铂的细胞毒作用以及细胞的生长曲线。电感耦合等离子体质谱检测细胞内顺铂的蓄积和Pt-DNA加合物的形成。Western blot检测铜离子转运蛋白(copper transporter 1,CTR1)的表达。结果顺铂耐药细胞株HKESC-1/cis较其亲代细胞HKESC-1对顺铂引起的细胞毒作用敏感性下降,耐药指数为2.9。顺铂耐药细胞株HKESC-1/cis与其亲代细胞HKESC-1的生长速度相似。然而,HKESC-1/cis细胞内顺铂蓄积和Pt-DNA加合物的形成较HKESC-1细胞减少,并且CTR1蛋白表达水平降低。结论顺铂通过降低细胞膜CTR1蛋白的表达,抑制顺铂进入细胞,导致细胞耐药性的产生。 展开更多
关键词 食管鳞癌 顺铂 耐药性 转运蛋白1 Pt-DNA加合物 细胞毒作用
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铜转运蛋白1与结直肠癌化疗耐药的关系研究进展
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作者 王曾阳 段树全 《医学综述》 CAS 2024年第1期75-80,共6页
结直肠癌是消化道常见的恶性肿瘤。虽然化疗、分子靶向治疗和免疫治疗显著提高了患者的生存期,但化疗耐药仍然是影响肿瘤治疗效果的关键因素,寻找肿瘤细胞对化疗的耐药靶点,进而提高化疗效果,成为亟待解决的关键性问题。铜转运蛋白1(CT... 结直肠癌是消化道常见的恶性肿瘤。虽然化疗、分子靶向治疗和免疫治疗显著提高了患者的生存期,但化疗耐药仍然是影响肿瘤治疗效果的关键因素,寻找肿瘤细胞对化疗的耐药靶点,进而提高化疗效果,成为亟待解决的关键性问题。铜转运蛋白1(CTR1)是细胞内稳态调节的关键之一,负责将铜离子泵入细胞,与肿瘤微环境以及多种信号通路密切相关,并对药物耐药性的产生有一定影响。深入研究CTR1在肿瘤发生发展以及耐药机制中的作用可能为提高肿瘤化疗效果、克服耐药性提供新的靶点。 展开更多
关键词 结直肠癌 转运蛋白1 化疗耐药 肿瘤微环境 信号通路
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顺铂下调铜离子转运蛋白1诱导人食管鳞癌细胞EC109耐药 被引量:2
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作者 余乐 陈明辉 +5 位作者 古春萍 李亦蕾 文静 傅剑华 曹之宪 刘叔文 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期801-804,共4页
目的研究人食管鳞癌细胞顺铂耐药性产生的机制。方法 MTT法检测顺铂对耐药细胞EC109/CDDP及其亲代细胞EC109的细胞毒作用。电感耦合等离子体质谱检测细胞内顺铂的蓄积和Pt-DNA加合物的形成。Western blotting检测人多聚腺苷二磷酸核糖... 目的研究人食管鳞癌细胞顺铂耐药性产生的机制。方法 MTT法检测顺铂对耐药细胞EC109/CDDP及其亲代细胞EC109的细胞毒作用。电感耦合等离子体质谱检测细胞内顺铂的蓄积和Pt-DNA加合物的形成。Western blotting检测人多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly-ADP-ribose polymerase,PARP)的剪切和铜离子转运蛋白1(copper transporter1,CTR1)的蛋白表达。结果顺铂耐药细胞株EC109/CDDP较其亲代细胞EC109对顺铂引起的细胞毒作用和凋亡敏感性下降,细胞内顺铂蓄积和Pt-DNA加合物的形成减少,并且CTR1蛋白表达水平降低。结论顺铂通过降低细胞CTR1蛋白表达抑制顺铂进入细胞,导致细胞耐药性的产生。 展开更多
关键词 食管鳞癌 EC109 顺铂 耐药性 转运蛋白1
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温热刺激增强卵巢癌细胞对奥沙利铂(oxaliplatin) 化疗的敏感性
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作者 张红宇 焦旸 +2 位作者 沈芳荣 徐月娟 陈友国 《中国血液流变学杂志》 CAS 2019年第4期400-403,411,共5页
目的探讨温热刺激对卵巢癌细胞化疗效果的影响与潜在作用机制.方法首先采用Cell Counting Kit-8(CCK8)细胞毒性实验检测温热刺激下,奥沙利铂对卵巢癌细胞A2780作用半数致死浓度(IC50)的变化;然后采用流式细胞术检测温热刺激对卵巢癌细... 目的探讨温热刺激对卵巢癌细胞化疗效果的影响与潜在作用机制.方法首先采用Cell Counting Kit-8(CCK8)细胞毒性实验检测温热刺激下,奥沙利铂对卵巢癌细胞A2780作用半数致死浓度(IC50)的变化;然后采用流式细胞术检测温热刺激对卵巢癌细胞凋亡的影响.最后采用电感耦合等离子体-质谱法(inductively coupled plasma-mass spectrometry,ICP-MS)检测细胞内铂浓度,并经qPCR检测细胞膜铜转运蛋白1(CTR1)与有机阳离子转运蛋白(OCT1-3)mRNA表达情况.结果与单纯药物处理组相比,温热刺激能显著降低奥沙利铂对卵巢癌细胞的IC50(t=3.47,P=0.0084),还能显著增加奥沙利铂诱导卵巢癌细胞凋亡现象的发生(t=10.42,P=0.0091).与单纯药物处理组相比,细胞摄入的铂含量在热刺激后增加(t=3.198,P=0.0494),CTR1(t=19.79,P<0.0001)与OCT1-3(OCT1:t=16.02,P=0.005;OCT3:t=7.95,P=0.0169)转录水平表达量也显著增加.结论温热刺激能增强卵巢癌细胞A2780的化疗效果,作用机制可能与其CTR1与OCT1-3的表达、促进细胞对铂类药物的摄入有关. 展开更多
关键词 卵巢癌 温热刺激 转运蛋白1 有机阳离子转运蛋白1-3
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叶酸-壳聚糖-碳纳米管-顺铂复合物对卵巢癌细胞的体外抑瘤效应 被引量:3
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作者 田佳 刘思思 +3 位作者 黎雁英 叶元 金美华 周英琼 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期669-673,共5页
目的探讨叶酸-壳聚糖-碳纳米管-顺铂(cisplatin-carbon nanotube-chitosan-folic acid,DDP-SWCNT-CHI-FA)复合物对人卵巢癌细胞的影响。方法制备DDP-SWCNT-CHI-FA复合物,测定复合物中顺铂的药载浓度;采用MTT法检测药物对卵巢癌细胞的作... 目的探讨叶酸-壳聚糖-碳纳米管-顺铂(cisplatin-carbon nanotube-chitosan-folic acid,DDP-SWCNT-CHI-FA)复合物对人卵巢癌细胞的影响。方法制备DDP-SWCNT-CHI-FA复合物,测定复合物中顺铂的药载浓度;采用MTT法检测药物对卵巢癌细胞的作用;应用Western blot法检测SKOV3/DDP细胞中铜转运蛋白-1(human copper transporter-1,h CTR-1)的表达。结果 SWCNT-CHI-FA和FA-CHI携载顺铂的载药率分别为125.7%和46.08%;顺铂和DDP-SWCNT-CHI-FA对卵巢癌细胞株SKOV3的IC50分别为(8.27±0.39)μg/μl和(5.18±0.83)μg/μl,对其耐药株SKOV3/DDP的IC50分别为(37.43±1.24)μg/μl和(28.23±1.17)μg/μl;SKOV3/DDP细胞中DDP-SWCNT-CHI-FA组的h CTR-1蛋白表达水平较顺铂组低。结论制备的DDP-SWCNT-CHI-FA复合物具有高载药率;可以增强顺铂对卵巢癌顺铂耐药细胞的抑制作用。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 叶酸-壳聚糖-碳纳米管-顺铂复合物 转运蛋白-1 耐药
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CTR1和ATP7B在人肺腺癌细胞A549的表达及其与顺铂耐药的关系 被引量:1
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作者 罗霞 陈明伟 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第23期27-31,共5页
目的探讨人肺腺癌细胞株A549和肺腺癌顺铂耐药细胞株A549/DDP对顺铂的耐药机制。方法利用噻唑蓝法检测顺铂对A549/DDP及其亲代细胞株的细胞毒作用和生长曲线的影响,探讨A549/DDP细胞株凋亡敏感性的变化规律。采用Western blot检测该细... 目的探讨人肺腺癌细胞株A549和肺腺癌顺铂耐药细胞株A549/DDP对顺铂的耐药机制。方法利用噻唑蓝法检测顺铂对A549/DDP及其亲代细胞株的细胞毒作用和生长曲线的影响,探讨A549/DDP细胞株凋亡敏感性的变化规律。采用Western blot检测该细胞株铜离子转运蛋白1(CTR1)、铜离子转运磷酸化ATP酶(ATP7B)及聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(PARP)剪切蛋白表达,分析A549细胞对顺铂耐药与CTR1、ATP7B及PARP剪切蛋白表达量的相关性。结果 A549/DDP较其亲代细胞株对顺铂引起的细胞毒性和凋亡敏感性下降;较其亲代细胞株A549/DDP中ATP7B表达增加,CTR1表达降低。结论人肺腺癌细胞株A549对顺铂耐药的产生与细胞凋亡敏感性降低有关,且细胞内ATP7B表达增加,CTR1表达降低,或可作为细胞对顺铂的增敏靶点。 展开更多
关键词 顺铂耐药 肺癌A549细胞株 转运蛋白 离子转运磷酸化ATP酶 离子转运蛋白1
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硫酸铜及顺铂鼓室内给药对大鼠内耳铜离子转运蛋白表达的影响 被引量:2
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作者 李俐华 刘伟 +5 位作者 任基浩 黄芸 王曼 杨春平 朱新华 刘月辉 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期617-621,共5页
目的 了解铜离子转运蛋白1(copper transport protein 1,CTR1)在大鼠内耳的表达情况及硫酸铜和顺铂鼓室给药对CTR1表达的影响。方法 Wistar雄性大鼠24只,随机分为4组,每组6只,Ⅰ组为正常对照组(非处理组);Ⅱ组为双耳圆窗龛放置顺铂... 目的 了解铜离子转运蛋白1(copper transport protein 1,CTR1)在大鼠内耳的表达情况及硫酸铜和顺铂鼓室给药对CTR1表达的影响。方法 Wistar雄性大鼠24只,随机分为4组,每组6只,Ⅰ组为正常对照组(非处理组);Ⅱ组为双耳圆窗龛放置顺铂溶液(0.5mg/ml)的明胶海绵;Ⅲ组为双耳圆窗龛放置顺铂溶液(1mg/ml)的明胶海绵;Ⅳ组双耳圆窗龛放置硫酸铜溶液(0.02mg/kg)的明胶海绵。采用免疫组织化学技术,对各组耳蜗冰冻切片行CTR1蛋白的免疫组织化学染色,光学显微镜下观察耳蜗组织中CTR1的表达情况;提取各组耳蜗组织总蛋白,应用Western-blot技术检测各组CTR1蛋白表达水平;提取耳蜗组织的总RNA,应用RT-PCR技术检测各组CTR1mRNA的表达水平。结果 Ⅰ-Ⅳ组大鼠的耳蜗各回Corti器、螺旋神经节、血管纹的细胞质和细胞膜上均有CTR1表达,CTR1的平均光密度值呈降低趋势;各组耳蜗组织均有明显的CTR1表达,Ⅰ-Ⅳ组CTR1蛋白的光密度值分别为0.532±0.031、0.394±0.024、0.234±0.030和0.191±0.015,呈下降趋势,各组间比较差异有统计学意义(P〈0.05);各组耳蜗组织均有明显的CTR1mRNA表达,Ⅰ-Ⅳ组光密度值分别为0.508±0.035、0.391±0.022、0.240±0.023和0.186±0.021,呈下降趋势,各组间比较差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论 CTR1在大鼠内耳有丰富的表达,其表达量可随鼓室内顺铂浓度增高而下降,且鼓室内给予硫酸酮其表达量下降。 展开更多
关键词 离子转运蛋白1 顺铂 硫酸酮 耳蜗
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四硫代钼酸铵抑制铜转运蛋白-1用于胰腺癌治疗的体内外研究 被引量:1
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作者 赵亚楠 陈利弘 +6 位作者 杨晓龙 董婧颖 吴文兵 陈丹 耿瑞蔓 柯能文 刘戟 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期643-649,共7页
目的检测胰腺癌细胞、原位异种移植的原位胰腺癌小鼠模型和临床胰腺癌组织标本中铜转运蛋白1(copper transporter 1, CTR1)的表达,并验证铜螯合剂四硫代钼酸铵(ammonium tetrathiomolybdate, TM)通过调控胰腺癌细胞中CTR1的表达对胰腺... 目的检测胰腺癌细胞、原位异种移植的原位胰腺癌小鼠模型和临床胰腺癌组织标本中铜转运蛋白1(copper transporter 1, CTR1)的表达,并验证铜螯合剂四硫代钼酸铵(ammonium tetrathiomolybdate, TM)通过调控胰腺癌细胞中CTR1的表达对胰腺癌的抑制效果。方法采用免疫组化法检测22例临床胰腺导管癌及距肿瘤0.5~1 cm的癌旁组织标本中CTR1和抗氧化蛋白1(ATOX1)的表达情况。采用PANC-1细胞构建5只原位胰腺癌裸鼠模型,收集胰腺癌组织中及对应的正常胰腺组织,免疫组化法检测CTR1和ATOX1的表达情况,与临床标本进行比较。采用10、30、50、100μmol/L TM处理人胰腺癌细胞株PANC-1 24 h、48 h、72 h后,使用CCK-8法检测细胞增殖情况;50μmol/L TM处理PANC-1 24 h、48 h后,划痕实验检测PANC-1细胞侵袭能力变化;10、30、50、100μmol/L TM处理PANC-1 48 h后,Western blot检测CTR1、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)和细胞周期蛋白CyclinD1的表达。采用PANC-1细胞建立裸鼠皮下荷瘤模型,分别给予不同剂量TM(0.3 mg/d,1.0 mg/d)灌胃24 d后,观察肿瘤生长情况。结果免疫组化结果提示,22例临床胰腺导管癌患者组织标本中,19例(86.36%)出现CTR1高表达,且在PANC-1裸鼠原位移植瘤组织中CTR1同样高表达。使用TM处理PANC-1细胞后,细胞增殖抑制程度随着TM剂量的升高、处理时间的延长而逐渐增强;细胞迁移能力下降;胞内CTR1、VEGF和CyclinD1的表达均随着TM剂量的升高而降低。PANC-1荷瘤裸鼠在给予不同剂量TM后,肿瘤生长出现抑制,TM高剂量组的肿瘤体积和肿瘤质量减小更为明显(P<0.05)。结论胰腺癌中CTR1表达异常增高,针对这一靶点使用铜螯合剂治疗可能有助于抑制胰腺癌生长迁移。 展开更多
关键词 胰腺癌 转运蛋白-1 四硫代钼酸铵
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槐耳清膏和TOR逆转人肺腺癌细胞顺铂耐药性实验研究 被引量:4
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作者 程万宏 王艳俊 +1 位作者 应朝辉 隗玉川 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2017年第2期23-25,共3页
目的:研究槐耳清膏体外逆转人肺腺癌细胞株A2/c DDP耐药性的作用,并与TOR比较,探讨其可能机制。方法:MTT法确定槐耳清膏最适逆转浓度和处理前后A2/c DDP细胞对顺铂的敏感性,并与托瑞米芬(TOR)比较;RT-PCR测定CTR1和GSTπ基因表达变化。... 目的:研究槐耳清膏体外逆转人肺腺癌细胞株A2/c DDP耐药性的作用,并与TOR比较,探讨其可能机制。方法:MTT法确定槐耳清膏最适逆转浓度和处理前后A2/c DDP细胞对顺铂的敏感性,并与托瑞米芬(TOR)比较;RT-PCR测定CTR1和GSTπ基因表达变化。结果:槐耳清膏最适逆转浓度为0.6 mg/m L,此时A2和A2/c DDP细胞抑制率均<5%;槐耳清膏和TOR的半数抑制率(IC50)分别为(4.21±0.005)mg/m L和(39.06±0.0115)μmol/m L,逆转倍数(RI)分别为2.95±0.023和3.15±0.014,均能明显逆转A2/c DDP耐药性,P<0.05;而两者间比较无明显差异,P>0.05;槐耳清膏能明显增高A2/c DDP细胞CTR1表达并抑制GSTπ的表达。结论:槐耳清膏能体外逆转A2/c DDP对顺铂的耐药性,其逆转能力与TOR相近;上调CTR1和下调GSTπ表达可能是其相关机制。 展开更多
关键词 顺铂耐药肺腺癌细胞株A2 槐耳清膏 托瑞米芬 特异性转运蛋白1 谷胱甘肽S-转移酶
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hCTR1在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义
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作者 阳甜 李洋 +2 位作者 陈天君 高雷 陈明伟 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期651-654,共4页
目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中hCTR1的表达与患者临床病理特征的关系以及减轻铂类药副反应的临床方法。方法采用免疫组织化学法,检测54例手术后接受含顺铂方案一线化疗的NSCLC患者组织中hCTR1的表达情况,其中35例患者于化疗前后采... 目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中hCTR1的表达与患者临床病理特征的关系以及减轻铂类药副反应的临床方法。方法采用免疫组织化学法,检测54例手术后接受含顺铂方案一线化疗的NSCLC患者组织中hCTR1的表达情况,其中35例患者于化疗前后采取水化、还原型谷胱甘肽、维生素B2及姜黄素等措施,分析hCTR1表达与NSCLC患者临床特征、病理类型、分化程度、临床分期、化疗疗效及化疗副反应的关系。结果 hCTR1的免疫阳性反应主要定位于NSCLC细胞的细胞质;hCTR1表达与含顺铂方案的化疗疗效及淋巴结转移呈正相关(P=0.02,P=0.01),而与年龄(P=0.29)、性别(P=0.32)、病理类型(P=0.19)、临床分期(P=0.52)、分化程度(P=0.62)及是否吸烟(P=0.89)无关;化疗副反应大小与性别(P=0.87)及年龄(P=0.47)无关,与在化疗前后是否采取水化、还原型谷胱甘肽、维生素B2及姜黄素等措施有关(P<0.05)。结论 hCTR1的表达可能是NSCLC患者以铂类为基础治疗的化疗疗效及淋巴结转移的重要预测因子。对于有高表达hCTR1的NSCLC患者化疗时,在化疗前后采取水化、还原型谷胱甘肽、维生素B2及姜黄素等措施,可以减轻化疗副反应。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 离子转运蛋白1(hCTR1) 顺铂 化疗副反应
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