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铅结合蛋白研究进展
被引量：
1
1
作者
周桂凤
刘栋
蒋云生
《国外医学（卫生学分册）》
2006年第2期100-105,共6页
铅结合蛋白(PbBPs)是与铅有高亲和力,与细胞对铅的适应性、反应性相关的细胞内铅受体和靶点蛋白质。本文主要从铅调高或诱导蛋白质表达、铅与锌依赖蛋白结合、与钙结合蛋白结合3个方面综述了目前发现的主要铅结合蛋白的结构与功能、分...
铅结合蛋白(PbBPs)是与铅有高亲和力,与细胞对铅的适应性、反应性相关的细胞内铅受体和靶点蛋白质。本文主要从铅调高或诱导蛋白质表达、铅与锌依赖蛋白结合、与钙结合蛋白结合3个方面综述了目前发现的主要铅结合蛋白的结构与功能、分离鉴定、铅结合位点、铅结合能力以及结合铅以后对其功能的影响的研究进展。
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关键词
铅
铅
结合
蛋白
分子机制
下载PDF
职称材料
铅结合蛋白PbrR的大肠埃希菌外膜展示株构建及体内定植初步研究
被引量：
1
2
作者
惠长野
郭妍
+6 位作者
高朝贤
杨学琴
刘征宇
李丽梅
陈钰婷
张文
黄先青
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第12期935-941,共7页
目的 构建铅特异性结合蛋白PbrR的大肠埃希菌外膜展示株，并考察其在小鼠体内的定植及外膜展示的重组蛋白在消化道内环境耐受能力。方法 全基因合成嵌合蛋白Lpp-OmpA编码序列，将其插入表达载体pET-21a，构建外膜蛋白展示载体pLOA。全...
目的 构建铅特异性结合蛋白PbrR的大肠埃希菌外膜展示株，并考察其在小鼠体内的定植及外膜展示的重组蛋白在消化道内环境耐受能力。方法 全基因合成嵌合蛋白Lpp-OmpA编码序列，将其插入表达载体pET-21a，构建外膜蛋白展示载体pLOA。全基因合成PbrR编码序列，将其插入pLOA，构建PbrR外膜展示质粒pLOA-pbrr。转化表达宿主大肠埃希菌BL21（DE3）pLysS，IPTG诱导表达，15% SDS-PAGE及Western blot分析表达情况。考察PbrR外膜展示株在人工肠液中的铅吸附能力及在人工胃液中的存活能力。KM小鼠经口连续7 d给予诱导后的展示株，终止染菌后，继续饲喂至30 d，稀释涂平板法检测第7、15、30天小鼠粪便中重组菌含量，免疫印迹法检测第7和第15天小鼠粪便中的重组蛋白残留。结果 基于Lpp-OmpA展示载体，成功构建了PbrR的外膜展示质粒。融合蛋白Lpp-OmpA-PbrR-His tag得到了高水平表达，展示株在人工肠液中表现出了显著升高的铅离子吸附能力。展示株表现出了一定的胃酸耐受性，经口染菌后可定植于小鼠肠道，外膜展示的重组融合蛋白对消化道内环境表现出较好的抵抗能力。结论 大肠埃希菌PbrR外膜展示株在体外模拟肠道环境中表现出了较强的铅富集能力，体内可定植小鼠消化道，外膜展示蛋白也有较好的消化液耐受能力。本文为进一步基于动物模型的生物吸附选择性驱铅的研究提供基础资料。
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关键词
铅
结合
蛋白
PbrR
细菌表面展示
体内定植
原文传递
PbrR大肠埃希菌外膜展示株体内外生长特性
3
作者
吴晓燕
郭妍
+3 位作者
惠长野
陈剑辉
高朝贤
曾新军
《中国热带医学》
CAS
2017年第7期650-654,共5页
目的考察Pbr R大肠埃希菌外膜展示株在不同条件下的体内外生长特性,为其体内定植驱铅能力的研究奠定基础。方法 15%SDS-PAGE分析不同浓度诱导剂L-阿拉伯糖诱导展示菌p BAD-loa-pbrr/DH10B的重组蛋白表达情况;铅平板敏感实验对比重组菌...
目的考察Pbr R大肠埃希菌外膜展示株在不同条件下的体内外生长特性,为其体内定植驱铅能力的研究奠定基础。方法 15%SDS-PAGE分析不同浓度诱导剂L-阿拉伯糖诱导展示菌p BAD-loa-pbrr/DH10B的重组蛋白表达情况;铅平板敏感实验对比重组菌诱导及非诱导条件下在含铅平板上的菌落形成能力;体外培养实验考察诱导剂的加入对重组菌生长能力及耐铅能力的影响;通过混合共培养实验对比诱导条件下重组菌与空宿主菌的竞争生长能力;考察重组菌6 h内的胃酸耐受性;考察诱导剂及染菌方式对重组菌小鼠体内定植的影响。结果低至0.002%的L-阿拉伯糖即可诱导重组蛋白的高效表达;Pbr R展示菌对铅表现出了一定的耐受力;诱导剂引入后重组菌生长能力降低;重组菌对胃酸有较好的抗性,经口染菌方式重组菌可定植于小鼠肠道,但摄入L-阿拉伯糖水后,粪便中重组菌快速丢失,通过连续染菌方式可维持其定植水平。结论重组菌体内外培养实验结果表明,基于商品化的诱导型表达载体构建的展示菌难以表达重组蛋白的同时实现小鼠体内的稳定定植。
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关键词
铅
结合
蛋白
细菌外膜展示
体外生长特性
体内定植
原文传递
题名
铅结合蛋白研究进展
被引量：
1
1
作者
周桂凤
刘栋
蒋云生
机构
中南大学湘雅二医院肾内科
出处
《国外医学（卫生学分册）》
2006年第2期100-105,共6页
基金
湖南省自然科学基金项目(05JJ40115)
文摘
铅结合蛋白(PbBPs)是与铅有高亲和力,与细胞对铅的适应性、反应性相关的细胞内铅受体和靶点蛋白质。本文主要从铅调高或诱导蛋白质表达、铅与锌依赖蛋白结合、与钙结合蛋白结合3个方面综述了目前发现的主要铅结合蛋白的结构与功能、分离鉴定、铅结合位点、铅结合能力以及结合铅以后对其功能的影响的研究进展。
关键词
铅
铅
结合
蛋白
分子机制
分类号
Q51 [生物学—生物化学]
下载PDF
职称材料
题名
铅结合蛋白PbrR的大肠埃希菌外膜展示株构建及体内定植初步研究
被引量：
1
2
作者
惠长野
郭妍
高朝贤
杨学琴
刘征宇
李丽梅
陈钰婷
张文
黄先青
机构
深圳市职业病防治院中毒检测中心
出处
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第12期935-941,共7页
基金
广东省自然科学基金（2015A030313838）
广东省医学科研基金（A2015307）
+1 种基金
深圳市科创委学科布局项目（JCYJ20160429090813380）
深圳市科创委科技研发资金项目（JCYJ20150403091305481）
文摘
目的 构建铅特异性结合蛋白PbrR的大肠埃希菌外膜展示株，并考察其在小鼠体内的定植及外膜展示的重组蛋白在消化道内环境耐受能力。方法 全基因合成嵌合蛋白Lpp-OmpA编码序列，将其插入表达载体pET-21a，构建外膜蛋白展示载体pLOA。全基因合成PbrR编码序列，将其插入pLOA，构建PbrR外膜展示质粒pLOA-pbrr。转化表达宿主大肠埃希菌BL21（DE3）pLysS，IPTG诱导表达，15% SDS-PAGE及Western blot分析表达情况。考察PbrR外膜展示株在人工肠液中的铅吸附能力及在人工胃液中的存活能力。KM小鼠经口连续7 d给予诱导后的展示株，终止染菌后，继续饲喂至30 d，稀释涂平板法检测第7、15、30天小鼠粪便中重组菌含量，免疫印迹法检测第7和第15天小鼠粪便中的重组蛋白残留。结果 基于Lpp-OmpA展示载体，成功构建了PbrR的外膜展示质粒。融合蛋白Lpp-OmpA-PbrR-His tag得到了高水平表达，展示株在人工肠液中表现出了显著升高的铅离子吸附能力。展示株表现出了一定的胃酸耐受性，经口染菌后可定植于小鼠肠道，外膜展示的重组融合蛋白对消化道内环境表现出较好的抵抗能力。结论 大肠埃希菌PbrR外膜展示株在体外模拟肠道环境中表现出了较强的铅富集能力，体内可定植小鼠消化道，外膜展示蛋白也有较好的消化液耐受能力。本文为进一步基于动物模型的生物吸附选择性驱铅的研究提供基础资料。
关键词
铅
结合
蛋白
PbrR
细菌表面展示
体内定植
Keywords
Lead-binding protein
PbrR
Bacterial surface display
Colonization in vivo
分类号
R378 [医药卫生—病原生物学]
原文传递
题名
PbrR大肠埃希菌外膜展示株体内外生长特性
3
作者
吴晓燕
郭妍
惠长野
陈剑辉
高朝贤
曾新军
机构
深圳市职业病防治院
出处
《中国热带医学》
CAS
2017年第7期650-654,共5页
基金
广东省自然科学基金(No.2015A030313838)
广东省医学科研基金(No.A2015307)
深圳市科技研发资金(No.JCYJ20150403091305481)
文摘
目的考察Pbr R大肠埃希菌外膜展示株在不同条件下的体内外生长特性,为其体内定植驱铅能力的研究奠定基础。方法 15%SDS-PAGE分析不同浓度诱导剂L-阿拉伯糖诱导展示菌p BAD-loa-pbrr/DH10B的重组蛋白表达情况;铅平板敏感实验对比重组菌诱导及非诱导条件下在含铅平板上的菌落形成能力;体外培养实验考察诱导剂的加入对重组菌生长能力及耐铅能力的影响;通过混合共培养实验对比诱导条件下重组菌与空宿主菌的竞争生长能力;考察重组菌6 h内的胃酸耐受性;考察诱导剂及染菌方式对重组菌小鼠体内定植的影响。结果低至0.002%的L-阿拉伯糖即可诱导重组蛋白的高效表达;Pbr R展示菌对铅表现出了一定的耐受力;诱导剂引入后重组菌生长能力降低;重组菌对胃酸有较好的抗性,经口染菌方式重组菌可定植于小鼠肠道,但摄入L-阿拉伯糖水后,粪便中重组菌快速丢失,通过连续染菌方式可维持其定植水平。结论重组菌体内外培养实验结果表明,基于商品化的诱导型表达载体构建的展示菌难以表达重组蛋白的同时实现小鼠体内的稳定定植。
关键词
铅
结合
蛋白
细菌外膜展示
体外生长特性
体内定植
Keywords
PbrR
bacterial surface display
growth characteristics in vitro
colonization in vivo
分类号
R135.11 [医药卫生—劳动卫生]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
铅结合蛋白研究进展
周桂凤
刘栋
蒋云生
《国外医学（卫生学分册）》
2006
1
下载PDF
职称材料
2
铅结合蛋白PbrR的大肠埃希菌外膜展示株构建及体内定植初步研究
惠长野
郭妍
高朝贤
杨学琴
刘征宇
李丽梅
陈钰婷
张文
黄先青
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
原文传递
3
PbrR大肠埃希菌外膜展示株体内外生长特性
吴晓燕
郭妍
惠长野
陈剑辉
高朝贤
曾新军
《中国热带医学》
CAS
2017
0
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