抗钠-钙交换体α-1(106-145)抗体对大鼠离体心功能的影响及其机制 被引量：2

1

作者 杨啸燕 李明华 +4 位作者 赵雷 高亚男 封启龙 武冬梅 吴博威 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1074-1079,共6页

目的观察1～103nmol·L-1抗钠-钙交换体(NCX)α-1(106-145)肽段抗体对离体大鼠心功能的影响并分析其作用机制。方法用化学合成的NCXα-1(106-145)肽段主动免疫新西兰大耳白兔制备并纯化抗体,利用Langendorff离体灌流系统观察其对大... 目的观察1～103nmol·L-1抗钠-钙交换体(NCX)α-1(106-145)肽段抗体对离体大鼠心功能的影响并分析其作用机制。方法用化学合成的NCXα-1(106-145)肽段主动免疫新西兰大耳白兔制备并纯化抗体,利用Langendorff离体灌流系统观察其对大鼠离体心功能的影响;利用全细胞膜片钳技术观察其对心肌细胞钠-钙交换电流、L-型钙电流、瞬时外向钾电流和内向整流钾电流的影响。结果经主动免疫后兔体内抗α-1(106-145)抗血清滴度明显升高,Protein A纯化后抗体浓度为13.1 g.L-1。与对照组相比,1～10 nmol·L-1α-1抗体可使大鼠离体心脏左室发展压(LVDP)和左室压最大上升速率(+dp/dtmax)明显增加(P<0.01),并使左室压最大下降速率(-dp/dtmax)减小(P<0.01),且KB-R7943(2μmol·L-1)可使α-1抗体(1 nmol·L-1)的上述效应进一步增强。然而,102～103nmol·L-1α-1抗体则可使大鼠离体心脏LVDP、±dp/dtmax呈不同程度地下降(P<0.01)。全细胞膜片钳实验结果表明,在1～103nmol·L-1浓度范围内,抗α-1抗体对大鼠心肌细胞外向和内向Na+/Ca2+交换电流均表现出剂量依赖性的抑制效应,对瞬时外向钾电流和内向整流钾电流均无明显影响。此外,102～103nmol·L-1α-1抗体对L-型钙电流也具有抑制作用。结论低浓度α-1抗体(1～10 nmol·L-1)可明显增强心肌收缩,这一效应与其在低浓度时专一性抑制Na+/Ca2+交换电流有关;高浓度α-1抗体(102～103nmol·L-1)则可同时抑制心肌收缩和舒张,该作用与其同时抑制Na+/Ca2+交换电流和L-型钙电流有关。 展开更多

关键词 钠-钙交换体 抗体 心功能 全细胞膜片钳 钠-钙交换电流 L型钙电流 离体心脏

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AMP579与腺苷对大鼠心室肌细胞Na^+/Ca^(2+)交换电流作用的比较(英文) 被引量：1

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作者 王雄 吴博威 +1 位作者 武冬梅 郭剑晶 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期254-258,共5页

目的阐明AMP579与腺苷不同药理作用与临床效果的机制。方法采用全细胞膜片钳记录Na+/Ca2 +交换电流。结果AMP579对Na+/Ca2 +交换的外向和内向电流均呈浓度依赖性增强。灌流腺苷A1受体阻断剂PD116948 30μmol·L-1,A2受体阻断剂DMPX1... 目的阐明AMP579与腺苷不同药理作用与临床效果的机制。方法采用全细胞膜片钳记录Na+/Ca2 +交换电流。结果AMP579对Na+/Ca2 +交换的外向和内向电流均呈浓度依赖性增强。灌流腺苷A1受体阻断剂PD116948 30μmol·L-1,A2受体阻断剂DMPX10μmol·L-1,蛋白激酶A特异阻断剂KT5720 0 .2μmol·L-1或蛋白激酶C特异阻断剂GF109203X0 .4μmol·L-1对AMP579 Na+/Ca2 +交换电流的激动作用均无影响,提示AMP579对Na+/Ca2 +交换电流具有直接的激动作用。结论AMP579对Na+/Ca2 +交换电流可能具有直接的激动作用。 展开更多

关键词 AMP579 心肌 腺苷 钠/钙交换电流 膜片钳技术 全细胞

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卡托普利对缺氧复氧乳鼠心室肌细胞游离钙和钠钙交换电流的影响 被引量：2

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作者 郑杨 佟倩 +1 位作者 张文杰 迟宝荣 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期275-278,共4页

目的观察卡托普利预处理对缺氧复氧乳鼠心室肌细胞游离钙和钠钙交换电流(Na+/Ca2+exchange current,INa-Ca)的影响。方法建立培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型。Flou-3/AM负载染色,应用流式细胞分析技术,测定细胞内钙离子浓度([Ca2+]... 目的观察卡托普利预处理对缺氧复氧乳鼠心室肌细胞游离钙和钠钙交换电流(Na+/Ca2+exchange current,INa-Ca)的影响。方法建立培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型。Flou-3/AM负载染色,应用流式细胞分析技术,测定细胞内钙离子浓度([Ca2+]i);利用全细胞膜片钳技术,观察INa-Ca的变化。结果与正常对照组比较,缺氧复氧可显著增加[Ca2+]i和INa-Ca。与缺氧复氧组比较,卡托普利呈浓度依赖性抑制缺氧复氧时[Ca2+]i增加,减少INa-Ca的增加。但[Ca2+]i和INa-Ca仍高于正常对照组。结论心肌细胞缺氧复氧可引起[Ca2+]i的异常升高,与INa-Ca的异常增加有关;卡托普利预处理可能通过轻度增加INa-Ca及其[Ca2+]i而触发心脏延迟保护作用,抑制后续缺氧复氧引起的INa-Ca及其[Ca2+]i的异常增加。 展开更多

关键词 卡托普利 缺氧复氧 心室肌细胞 游离钙 钠钙交换电流

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心肌梗死后β_2肾上腺素受体对心室肌细胞钠钙交换电流的调控作用 被引量：4

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作者 杨蕙 伍卫 +1 位作者 邓春玉 邓义军 《中国心脏起搏与心电生理杂志》 2006年第5期427-430,共4页

目的研究β2受体对心肌梗死（MI）后2～8周心肌细胞钠钙交换电流（INCX）的调控作用。方法雄性健康Wistar大鼠28只，随机分为：正常对照组；MI后2周、4周、8周组。以结扎心脏左前降支方法制作MI模型。正常对照组进行假手术。采用经典的... 目的研究β2受体对心肌梗死（MI）后2～8周心肌细胞钠钙交换电流（INCX）的调控作用。方法雄性健康Wistar大鼠28只，随机分为：正常对照组；MI后2周、4周、8周组。以结扎心脏左前降支方法制作MI模型。正常对照组进行假手术。采用经典的酶分离心肌细胞方法，应用全细胞膜片钳技术记录INCX，观察MI后INCX的变化，予以β2受体激动剂salbutamol、β受体激动剂异丙肾上腺素及不同选择性β受体阻滞剂后INCX的变化。结果MI后8周心肌细胞IM显著增高（1．07±0．21pA／pF vs 0．51±0．12pA／pF，P〈0．05）。MI后B2受体激动显著增加心肌细胞INCX（P〈0．05），对INCX的调节作用较正常心肌细胞强。MI后选择性β2受体阻滞剂ICI118，551对B受体激动引发的心肌细胞INCX升高的抑制程度增高；选择性β2受体阻滞剂阿替洛尔对上述作用的抑制程度下降；非选择性β受体阻滞剂普萘洛尔对β受体激动引发的正常和MI后心肌细胞上述离子通道电流升高均能明显抑制。结论MI后β2受体对心肌细胞INCX的调节作用增强，提示MI后β2受体在恶性心律失常发生机制中的地位可能提高。 展开更多

关键词 心血管病学 心肌梗死 Β2肾上腺素受体 全细胞膜片钳技术 心肌细胞 钠钙交换电流 心律失常

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H_(2)O_(2)对人胚肾293细胞钠钙交换体内向电流的作用及机制

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作者 项国剑 柯永鑫 +4 位作者 陈茜 王庆峰 曾琳雯 李泱 张建成 《中华高血压杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1079-1085,共7页

目的 探讨H_(2)O_(2)对钠钙交换体(NCX)内向电流的调控及可能的机制。方法 利用绿色荧光蛋白标记表达系统将NCX1.1质粒转染人胚肾293细胞(HEK293),全细胞膜片钳技术记录NCX内向电流,观察H_(2)O_(2)对NCX1.1内向电流和I-V曲线的作用及浓... 目的 探讨H_(2)O_(2)对钠钙交换体(NCX)内向电流的调控及可能的机制。方法 利用绿色荧光蛋白标记表达系统将NCX1.1质粒转染人胚肾293细胞(HEK293),全细胞膜片钳技术记录NCX内向电流,观察H_(2)O_(2)对NCX1.1内向电流和I-V曲线的作用及浓度依赖性作用。选取120个转染阳性的HEK293细胞,随机均分成对照组、H_(2)O_(2)处理组、Gi蛋白抑制剂百日咳毒素(PTX)及H_(2)O_(2)处理组,蛋白激酶A(PKA)抑制剂H89及H_(2)O_(2)处理组,记录对比处理前后NCX内向电流的变化。Western-blot法检测HEK293组、H_(2)O_(2)组、PTX+H_(2)O_(2)组、H89+H_(2)O_(2)组处理24 h后细胞NCX1.1蛋白水平的变化。结果 H_(2)O_(2)可使NCX1.1内向电流增加,使其电流密度从(-6.22±0.53)pA/pF增加至(-12.92±1.12)pA/pF(n=60,t=2.54,P<0.01),在细胞外灌流不同浓度的H_(2)O_(2),NCX1.1内向电流增加呈浓度依赖性特征。在倒斜坡刺激模式中,H_(2)O_(2)对内向电流的作用存在电压依赖性。Gi蛋白选择性抑制剂PTX可以逆转H_(2)O_(2)的增加效应[H_(2)O_(2):(-12.92±1.12)比H_(2)O_(2)+PTX:(-6.76±0.60)pA/pF,t=3.61,n=60,P<0.001]。PKA抑制剂H89同样可以逆转H_(2)O_(2)的增加效应[H_(2)O_(2):(-12.92±1.12)比H_(2)O_(2)+H89:(-7.22±1.60)pA/pF,n=60,t=4.17,P<0.005]。应用H_(2)O_(2)与HEK293细胞培养24 h后,观察到细胞NCX1.1蛋白表达增加,而PTX及H89可以逆转H_(2)O_(2)对NCX1.1蛋白的增加效应。结论 H_(2)O_(2)刺激可增加NCX1.1内向电流,Gi-环磷酸腺苷(cAMP)-PKA信号通路参与该过程的调节。 展开更多

关键词 钠钙交换体 钠钙交换电流 H_(2)O_(2) 全细胞膜片钳技术

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β_2受体对心肌梗死大鼠心肌细胞钠钙交换电流调控的信号转导途径 被引量：1

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作者 杨蕙 伍卫 邓春玉 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期454-457,526,共5页

【目的】研究β2肾上腺素受体(β2受体)对心肌梗死大鼠心肌细胞钠钙交换电流(INCX)调控作用的信号转导途径。【方法】雄性健康Wistar大鼠30只,随机分为正常对照和心肌梗死(MI)组,制作MI模型。采用经典的酶分离心肌细胞方法,应用全细胞... 【目的】研究β2肾上腺素受体(β2受体)对心肌梗死大鼠心肌细胞钠钙交换电流(INCX)调控作用的信号转导途径。【方法】雄性健康Wistar大鼠30只,随机分为正常对照和心肌梗死(MI)组,制作MI模型。采用经典的酶分离心肌细胞方法,应用全细胞膜片钳技术记录INCX,予以β2受体激动剂salbutamol、cAMP激动剂forskolin、抑制性cAMP类似物Rp-cAMPS、PKA抑制剂H89及Gi蛋白抑制剂后记录INCX的变化。【结果】在正常和梗死后4周心肌细胞,forskolin可使INCX电流密度升高108.9%和70.3%(P<0.05),抑制性cAMP类似物Rp-cAMPS可抑制salbutamol升高INCX电流密度的作用(P<0.05),PTX能增大salbutamol的作用,INCX电流密度较单独予以salbutamol升高36.8%和50.6%(P<0.05),H89可抑制salbutamol升高INCX电流密度的作用(P<0.05)。【结论】β2受体激动可能通过Gi-cAMP-PKA途径参与调节INCX。 展开更多

关键词 Β2肾上腺素受体 心肌梗死 钠钙交换电流 信号转导 全细胞膜片钳技术

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增强型绿色荧光蛋白转染小鼠心脏后瞬时外向钾电流及钠钙交换电流的变化 被引量：1

7

作者 徐林 李绪勇 《中国心脏起搏与心电生理杂志》 2012年第4期333-335,共3页

目的探讨绿色荧光蛋白(GFP)转染对心脏瞬时外向钾电流(Ito)及钠钙交换电流(INCX)的影响。方法20只雄性小鼠等量随机分为对照组和增强型GFP(EGFP)组。EGFP组小鼠采用8点注射法均匀注射100μl腺病毒于左室游离壁上,对照组注射等量无菌生... 目的探讨绿色荧光蛋白(GFP)转染对心脏瞬时外向钾电流(Ito)及钠钙交换电流(INCX)的影响。方法20只雄性小鼠等量随机分为对照组和增强型GFP(EGFP)组。EGFP组小鼠采用8点注射法均匀注射100μl腺病毒于左室游离壁上,对照组注射等量无菌生理盐水。一周后分离单个心室肌细胞,用膜片钳记录Ito及INCX。结果与对照组相比,EGFP组几乎所有测定电压下,Ito电流密度显著减小[如+60 mV时为8.40±1.55 pA/pF(n=9)vs 36.77±8.12 pA/pF(n=11),P<0.05]。INCX的前向模式不因转染EGFP变化[如-80 mV时为-0.35±0.05 pA/pF(n=8)vs-0.42±0.08 pA/pF(n=10),P>0.05],但反向模式电流显著增大[如+80 mV时为1.47±0.10 pA/pF(n=8)vs 0.72±0.05 pA/pF(n=10),P<0.05]。结论 EGFP转染可使心脏Ito显著减小,而INCX仅反向模式电流增大,其综合效应可能导致细胞内钙增加。 展开更多

关键词 心血管病学 绿色荧光蛋白 瞬时外向钾电流 钠钙交换电流

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Visfatin对离体大鼠心肌的负性肌力作用及机制研究

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作者 单世富 张慧 +2 位作者 陶虹 王锐 袁文俊 《宁夏医科大学学报》 2017年第8期865-868,855,876,共6页

目的观察内脏脂肪素(visfatin)对离体灌流大鼠心肌的作用,探讨其离子通道机制。方法应用Langendorff心脏灌流装置观察25、50、100、200 nmol·L^(-1) visfatin灌流15 min对离体大鼠心脏心率(HR)、冠脉流量(CF)和心功能指标的影响,... 目的观察内脏脂肪素(visfatin)对离体灌流大鼠心肌的作用,探讨其离子通道机制。方法应用Langendorff心脏灌流装置观察25、50、100、200 nmol·L^(-1) visfatin灌流15 min对离体大鼠心脏心率(HR)、冠脉流量(CF)和心功能指标的影响,应用全细胞膜片钳技术观察50、100、200 nmol·L^(-1) visfatin灌流5 min对单个大鼠心室肌细胞钠钙交换电流(INa/Ca)和L型钙通道电流(ICa,L)的影响。结果 50、100和200 nmol·L^(-1) visfatin灌流15min后,离体灌流大鼠心脏左心室收缩压(LVSP)、左室内压最大上升和下降速率(±dp/dp)显著低于对照组(P<0.01)。50、100和200 nmol·L^(-1) visfatin灌流5 min后,单个大鼠心室肌细胞内向INa/Ca显著增大;50、100和200 nmol·L^(-1)visfatin灌流5 min后单个大鼠心室肌细胞ICa,L明显降低。结论 visfatin对离体大鼠心脏发挥负性肌力作用,其机制可能是由于visfatin浓度依赖性的增大单个大鼠心室肌细胞内向INa/Ca,降低ICa,L。 展开更多

关键词 内脏脂肪素 心室肌细胞 钠钙交换电流 L型钙电流 膜片钳

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缺氧预处理对缺氧复氧乳鼠心室肌细胞游离钙的影响

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作者 郑杨 佟倩 +2 位作者 张文杰 迟宝荣 李京沙 《中国心脏起搏与心电生理杂志》 2005年第4期291-294,共4页

观察缺氧预处理对缺氧复氧乳鼠心室肌细胞游离钙的影响。建立培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型。设正常对照组(A组)、缺氧复氧组(B组)、缺氧预适应组(C组)。经Flou-3/AM负载染色后,采用流式细胞分析技术,测定细胞内钙离子浓度;利用膜... 观察缺氧预处理对缺氧复氧乳鼠心室肌细胞游离钙的影响。建立培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型。设正常对照组(A组)、缺氧复氧组(B组)、缺氧预适应组(C组)。经Flou-3/AM负载染色后,采用流式细胞分析技术,测定细胞内钙离子浓度;利用膜片钳技术,观察L型钙通道和钠钙交换电流的变化。结果:①与A组比较,B组可显著增加细胞内的游离钙离子浓度(P<0.01);L型钙电流密度明显下降,I-V曲线上移,半数失活电压(V1/2)减小,ICa,L失活曲线明显左移,而Na+/Ca2+交换电流显著增加。②与B组比较,C组可减轻缺氧再灌注时[Ca2+]i增加(P<0.01);可减轻再灌注对L型钙电流的抑制,使I-V曲线下移程度减轻,V1/2增加及稳态失活曲线的右移;减少Na+/Ca2+交换电流的增加;③与A组比较,C组钙内流和Na+/Ca2+交换电流有轻度增加(P<0.05)。结论:缺氧预处理使缺氧/复氧造成的[Ca2+]i增高的程度减轻,是通过抑制Na+/Ca2+交换电流的增加实现的。 展开更多

关键词 心血管病学 晚期预适应 游离钙 L型钙通道 钠钙交换电流 缺氧复氧

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β_2肾上腺素受体对心肌细胞钠钙交换电流调控的信号转导途径

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作者 杨蕙 伍卫 邓春玉 《中国心脏起搏与心电生理杂志》 北大核心 2011年第4期343-345,共3页

目的研究β2肾上腺素受体(β2受体)对大鼠心肌细胞钠钙交换电流(INCX)调控作用的信号转导途径。方法雄性健康Wistar大鼠12只,采用经典的酶分离心肌细胞方法,应用全细胞膜片钳技术记录给药前后INCX。药物组合方案包括:予以环磷酸腺苷(cA... 目的研究β2肾上腺素受体(β2受体)对大鼠心肌细胞钠钙交换电流(INCX)调控作用的信号转导途径。方法雄性健康Wistar大鼠12只,采用经典的酶分离心肌细胞方法,应用全细胞膜片钳技术记录给药前后INCX。药物组合方案包括:予以环磷酸腺苷(cAMP)激动剂forskolin灌流;灌流β2受体激动剂salbutamol后再以PKA(蛋白激酶A)抑制剂H89或抑制型G蛋白(Gi)抑制剂百日咳毒素(PTX)灌流。结果 forskolin可使INCX密度升高102.1%,H89可抑制salbutamol升高INCX密度的作用达34.7%,PTX能增大salbutamol的作用,INCX密度较单独予以salbutamol升高36.8%(P均<0.05)。结论β2受体激动可能通过刺激型G蛋白/Gi蛋白(Gi)-cAMP-PKA途径参与调节INCX。 展开更多

关键词 心血管病学 Β2肾上腺素受体 钠钙交换电流 信号转导 全细胞膜片钳技术

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兔右室流出道心肌细胞动作电位及钠钙交换尾电流特性

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作者 王焱 林晨晖 +6 位作者 李源 刘泰槰 肖国胜 常贺 黄卫斌 叶涛 巩燕 《中国心脏起搏与心电生理杂志》 北大核心 2011年第6期527-531,共5页

目的研究兔右室流出道(RVOT)心肌细胞动作电位及钠钙交换尾电流(INCX,tail)相关特性,探讨源于RVOT室性心律失常的发生机制。方法采用全细胞膜片钳技术记录兔右室(RV)游离壁和RVOT心肌细胞的动作电位,在不更换细胞及电极内液情况下连续记... 目的研究兔右室流出道(RVOT)心肌细胞动作电位及钠钙交换尾电流(INCX,tail)相关特性,探讨源于RVOT室性心律失常的发生机制。方法采用全细胞膜片钳技术记录兔右室(RV)游离壁和RVOT心肌细胞的动作电位,在不更换细胞及电极内液情况下连续记录INCX,tail,对比分析两者动作电位和INCX,tail特性。结果兔RVOT心室肌细胞动作电位复极时程(APD)的变异程度大于RV游离壁心肌细胞。在RVOT心肌细胞记录到早期后除极及显著延长的APD。动作电位显著延长及后除极的RVOT心肌细胞所对应的INCX,tail到达峰值时程较动作电位正常的细胞延迟,并且电流强度大于RV游离壁对照组心肌细胞(P<0.05)。结论 RVOT心肌细胞APD变异程度大,而且APD显著延长的RVOT细胞INCX,tail到达峰值时程延迟及相应电流显著增大,这是RVOT部位好发触发活动的重要机制。 展开更多

关键词 电生理学 右室流出道 触发机制 钠钙交换电流 动作电位

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