不同浓度钛合金微粒对成骨细胞信号通路中转录表达因子RUNX2影响 被引量：10

1

作者 孙国静 杨书丰 +1 位作者 郭亭 赵建宁 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2013年第3期251-254,共4页

目的关节假体松动后出现骨溶解,如何有效阻止骨溶解,一直是个难题。文中通过探讨不同浓度钛合金微粒对转录因子RUNX2影响,进一步了解磨损微粒抑制成骨细胞作用机制。方法实验分为空白对照组和钛合金微粒处理组5μg/ml(A组)、10μg/ml(B... 目的关节假体松动后出现骨溶解,如何有效阻止骨溶解,一直是个难题。文中通过探讨不同浓度钛合金微粒对转录因子RUNX2影响,进一步了解磨损微粒抑制成骨细胞作用机制。方法实验分为空白对照组和钛合金微粒处理组5μg/ml(A组)、10μg/ml(B组)、15μg/ml(C组)。采用细胞计数试剂盒-8法检测各组培养120 h成骨细胞增殖活性。分别采用RT-PCR和蛋白免疫印迹法(Western)检测培养120 h后成骨细胞的RUNX2 mRNA和蛋白表达。结果培养120 h后,与空白对照组相比,各钛合金处理组细胞增殖活性显著下降(P<0.05),B组、C组细胞中RUNX2 mRNA水平亦明显下降(P<0.01),并且RUNX2蛋白表达水平变化趋势与其mRNA的表达变化趋势一致。结论钛合金微粒降低成骨细胞增殖活性,下调成骨细胞RUNX2-转录因子的表达。钛合金微粒对RUNX2表达水平的调控可能是其抑制成骨细胞增殖的机制之一。 展开更多

关键词 钛合金颗粒 成骨细胞 RUNX2

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人工关节炎性介质对滑膜细胞基质金属蛋白酶-9表达的影响 被引量：6

2

作者 庞显伦 杨健 秦昊 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期1052-1054,共3页

目的 观察人滑膜细胞基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达及活性受钛合金颗粒、白细胞介素-6（IL-6）、前列腺素E2（PGE2）的调控表现,探讨滑膜细胞在钛合金材料关节假体周围骨溶解的机制.方法 用钛合金颗粒、IL-6、PGE2加载滑膜细胞（关节... 目的 观察人滑膜细胞基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达及活性受钛合金颗粒、白细胞介素-6（IL-6）、前列腺素E2（PGE2）的调控表现,探讨滑膜细胞在钛合金材料关节假体周围骨溶解的机制.方法 用钛合金颗粒、IL-6、PGE2加载滑膜细胞（关节滑膜细胞来源于正常人严重创伤后捐献,体外培养5代）,于12、24、48、72 h等时间节点收集上清液,检测MMP-9的活性（优化明胶酶谱法）.结果 直径最小的钛合金颗粒（≤5 μm）能刺激人滑膜细胞MMP-9蛋白表达是对照组的3.75倍;钛合金颗粒、IL-6、PGE2及其中两者联合作用致MMP-9高表达（P＜0.01）,三者联合作用有协同效应（P＜0.01）.钛合金颗粒、IL-6、PGE2能够刺激人关节滑膜细胞增加MMP-9蛋白活性,并具有协同叠加效应.结论 钛合金材料人工关节置换术后,磨损颗粒和IL-6、PGE2协同刺激滑膜细胞,胞外基质降解,导致假体的骨性静态支持结构力学性能下降,破骨细胞活性被激活,参与假体无菌性松动的发生. 展开更多

关键词 钛合金颗粒 滑膜细胞 白细胞介素-6 前列腺素E2 基质金属蛋白酶-9 无菌性松动

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钛合金颗粒对成骨细胞增殖、分化、表型表达的影响 被引量：3

3

作者 余存泰 徐中和 +1 位作者 杨庆铭 邓廉夫 《实用骨科杂志》 2005年第1期41-44,52,共5页

目的　观察钛合金颗粒对成骨细胞的作用。方法　成骨细胞暴露于各种浓度的钛合金颗粒 ,用 MTT比色法检测成骨细胞增殖。免疫组化染色观察 、 型胶原、TGF- β1 :末端原位标记法和流式细胞仪检测成骨细胞凋亡。双抗夹心法测上清液中 ... 目的　观察钛合金颗粒对成骨细胞的作用。方法　成骨细胞暴露于各种浓度的钛合金颗粒 ,用 MTT比色法检测成骨细胞增殖。免疫组化染色观察 、 型胶原、TGF- β1 :末端原位标记法和流式细胞仪检测成骨细胞凋亡。双抗夹心法测上清液中 型胶原 ,对硝基苯酯二钠盐比色法测上清液中碱性磷酸酶 ,放免法测上清液中骨钙素。反转录聚合酶链反应法 (RT- PCR)检测 型前胶原、 型前胶原 ,AL P,OCNm RNA表达。结果　钛合金颗粒可抑制成骨细胞增殖 ,浓度高的抑制更明显 ;免疫组化染色见成骨细胞 、TGF- β1 的合成减少 ,部分成骨细胞变性、产生 型胶原 ;TUNEL 检测成骨细胞凋亡发生比率为 :11.5 0 %± 3.6 7% ,Ti- 0 ,4 1.0 0 %± 14 .0 9% ,Ti- 10 ,4 7.33%± 14 .4 3% ,Ti-10 0 ;流式细胞仪检测成骨细胞凋亡发生比率 Ti- 0组 4 8h约 9.2 7% ,Ti- 10组 4 0 .8% ,Ti- 10 0组为 5 0 .4 8% ;上清液中 型胶原 ,AL P和骨钙素 (OCN)含量减少 ,RT- PCR分析其 m RNA的表达受抑制 ,少量成骨细胞出现异常的 型前胶原 m RNA表达。结论　钛合金颗粒抑制成骨细胞增殖、成骨表型表达 。 展开更多

关键词 钛合金颗粒 成骨 成骨细胞 分化 表型 表达 免疫组化染色 反转录聚合酶链反应法

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钛合金颗粒对成骨细胞骨保护素基因表达的影响 被引量：4

4

作者 徐炜 董启榕 《中华创伤骨科杂志》 CAS CSCD 2006年第6期562-565,共4页

目的研究钛合金颗粒对体外培养条件下的成骨细胞骨保护素(OPG)基因表达的影响,探讨人工关节假体松动中磨损颗粒导致的骨溶解机制。方法分别将不同浓度的钛合金颗粒(1、0．1、0．01 mg/mL)与第3～5代成骨细胞共同培养3、6、9d,用RT-PCR... 目的研究钛合金颗粒对体外培养条件下的成骨细胞骨保护素(OPG)基因表达的影响,探讨人工关节假体松动中磨损颗粒导致的骨溶解机制。方法分别将不同浓度的钛合金颗粒(1、0．1、0．01 mg/mL)与第3～5代成骨细胞共同培养3、6、9d,用RT-PCR方法半定量测定OPG基因mRNA的表达。结果不同浓度的钛合金颗粒均抑制成骨细胞OPG基因表达,各组与空白对照组比较差异有显著性意义(P＜0．01)；存在一定的剂量、时间-效应关系,随时间延长,钛合金颗粒对OPG基因作用逐渐降低。结论铁合金颗粒使成骨细胞OPG基因表达下降,使破骨细胞分化、活化功能增强,这可能是导致假体松动的骨溶解机制之一。 展开更多

关键词 钛合金颗粒 成骨细胞 骨保护素

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ERK信号通路对钛合金诱导成骨细胞RANKL、OPG表达的作用 被引量：3

5

作者 谢守祥 许铁 +3 位作者 刘林 姚爱明 刘凯 刘筱 《徐州医学院学报》 CAS 2012年第6期363-366,共4页

目的探讨钛合金颗粒对体外培养的小鼠成骨细胞核因子-κB受体活化因子配体（RANKL）及骨保护素（OPG）基因表达和蛋白分泌的影响，以及细胞外信号调控激酶1／2（ERKl／2）信号通路在其中的作用。方法体外培养成骨细胞。实验分3组：对照... 目的探讨钛合金颗粒对体外培养的小鼠成骨细胞核因子-κB受体活化因子配体（RANKL）及骨保护素（OPG）基因表达和蛋白分泌的影响，以及细胞外信号调控激酶1／2（ERKl／2）信号通路在其中的作用。方法体外培养成骨细胞。实验分3组：对照组（A组）；钛合金组（B组）：给予浓度为0．1g／L钛合金颗粒干预；抑制剂组（c组）：给予钛合金颗粒＋ERK信号通路抑制剂P1）98059，每组6个样本。采用RT—PCR和ELISA法分别检测成骨细胞RANKL、OPG基因和蛋白表达。结果3组各个时间点均可见RANKL、OPG的表达；但B组RANKL、OPGmRNA的表达和蛋白分泌量以及RANKL／OPG比值显著高于A组（P〈0．01）；而c组RANKL、OPGmRNA的表达和蛋白分泌水平以及RANKL／OPG比值的增幅显著小于B组（P〈0．01）。结论钛合金颗粒可刺激成骨细胞RANKLmRNA、OPGmRNA的表达并促进RANKL、OPG蛋白的分泌，增加RANKL／OPG比值；ERK信号通路抑制剂PD98059可一定程度抑制RANKL和OPG的表达，降低RANKL／OPG比值，对减少假体周围骨溶解的发生可能起重要作用。 展开更多

关键词 ERK1/2信号通路 成骨细胞 钛合金颗粒 细胞核因子-κB受体活化因子配体 骨保护素

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钛合金颗粒对体外培养成骨细胞的作用 被引量：3

6

作者 徐炜 董启榕 徐又佳 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期150-152,共3页

目的探讨钛合金颗粒对体外培养的成骨细胞增殖、成骨能力的影响。方法以人骨髓基质细胞(hMSCs)来源的成骨细胞作为研究对象,将不同浓度的钛合金颗粒(1.0、0.1和0.01mg/ml)与其共同培养,分别测量细胞增殖情况,检测碱性磷酸酶(ALP)活性以... 目的探讨钛合金颗粒对体外培养的成骨细胞增殖、成骨能力的影响。方法以人骨髓基质细胞(hMSCs)来源的成骨细胞作为研究对象,将不同浓度的钛合金颗粒(1.0、0.1和0.01mg/ml)与其共同培养,分别测量细胞增殖情况,检测碱性磷酸酶(ALP)活性以及I型胶原(COLLⅠ)合成的情况。结果1.0mg/ml组和0.1mg/ml钛合金颗粒抑制了成骨细胞的增殖(P<0.05),0.01mg/ml组对成骨细胞的增殖影响不明显。不同浓度的钛合金颗粒对成骨细胞碱性磷酸酶的活性和I型胶原合成均有抑制作用(P<0.05),存在一定的剂量-时间-效应关系。结论钛合金颗粒对成骨细胞的增殖和成骨能力均有抑制作用,这也是导致假体松动的骨溶解机制之一。 展开更多

关键词 钛合金颗粒 成骨细胞 增殖 成骨能力

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钛合金微粒负荷成骨细胞对肿瘤坏死因子-α、白介素-1β和白介素-6的影响 被引量：2

7

作者 杨书丰 赵建宁 +2 位作者 薛孝威 郭亭 孙国静 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 2013年第3期251-254,共4页

目的探讨不同浓度钛合金微粒对成骨细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)的影响,了解骨溶解后炎性反应因子和成骨细胞间的关系。方法将培养成骨细胞分为空白对照组和不同浓度钛合金微粒处理组:5 mg/mL(A组)... 目的探讨不同浓度钛合金微粒对成骨细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)的影响,了解骨溶解后炎性反应因子和成骨细胞间的关系。方法将培养成骨细胞分为空白对照组和不同浓度钛合金微粒处理组:5 mg/mL(A组)、10 mg/mL(B组)、15 mg/mL(C组)。采用Elisa法检测各组细胞培养72 h后TNF-α、IL-1β和IL-6含量的变化。结果培养72 h后,与对照组相比,各实验组TNF-α、IL-1β和IL-6含量均增加,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论钛合金微粒可增加成骨细胞TNF-α、IL-1β和IL-6含量,刺激破骨细胞导致骨溶解可能是关节松动的机制之一。 展开更多

关键词 钛合金颗粒 成骨细胞 TNF-α IL-1Β IL-6

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钛合金颗粒对小鼠成骨细胞增殖及核因子-κB受体活化因子配体的影响 被引量：2

8

作者 刘林 谢守祥 +3 位作者 赵宁军 姚爱明 秦宏敏 许铁 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期305-307,共3页

目的观察钛合金颗粒对体外培养小鼠成骨细胞增殖以及核因子（NF）-κB受体活化因子配体（RANKL）的影响，探讨假体周围骨溶解机制。方法体外培养小鼠成骨细胞，随机分为空白对照组和钛合金颗粒处理A（0．01％）、B（0．10％）、C（1．0... 目的观察钛合金颗粒对体外培养小鼠成骨细胞增殖以及核因子（NF）-κB受体活化因子配体（RANKL）的影响，探讨假体周围骨溶解机制。方法体外培养小鼠成骨细胞，随机分为空白对照组和钛合金颗粒处理A（0．01％）、B（0．10％）、C（1．00％）组。采用细胞计数试剂盒（CCK）-8法检测培养24、48、96、168h成骨细胞增殖活性。分别采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、酶联免疫吸附试验（ELISA）检测培养24、48h后成骨细胞的RANKLmRNA表达及培养上清液的RANKL含量。结果培养48h，A组、B组与对照组比较细胞增殖活性差异无统计学意义（P〉0．05），C组与其他各组比较细胞增殖活性明显降低（P〈0．01）。培养168h，B组细胞增殖活性下降，和对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。培养24、48h，和对照组比较，各实验组RANKLmRNA表达及分泌量均明显升高（P〈0．01），各实验组之间差异有统计学意义（P〈0．01）。结论钛合金颗粒可降低成骨细胞增殖活性，促进成骨细胞RANKL表达与分泌，是假体周围骨溶解机制之一。 展开更多

关键词 钛合金颗粒 成骨细胞 核因子-KB 骨溶解

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ERK信号通路对不同浓度钛合金颗粒诱导成骨细胞RANKL和OPG表达的影响 被引量：2

9

作者 金清 谢守祥 +2 位作者 许铁 孙虹 严庄 《中国临床研究》 CAS 2018年第12期1614-1618,共5页

目的探讨不同浓度钛合金颗粒对小鼠成骨细胞核因子-κB受体活化因子配基(RANKL)及骨保护素(OPG)表达的影响,以及细胞外信号调控激酶1/2(ERK1/2)信号通路在其中的作用。方法体外培养小鼠成骨细胞,按照培养基中是否加用ERK1/2特异性抑制剂... 目的探讨不同浓度钛合金颗粒对小鼠成骨细胞核因子-κB受体活化因子配基(RANKL)及骨保护素(OPG)表达的影响,以及细胞外信号调控激酶1/2(ERK1/2)信号通路在其中的作用。方法体外培养小鼠成骨细胞,按照培养基中是否加用ERK1/2特异性抑制剂(PD98059),将成骨细胞分为无PD98059干预组和PD98059干预组两个大组,每大组又分为空白对照组,钛合金颗粒干预A组(0. 01 g/L)、B组(0. 1 g/L)和C组(1.0 g/L),每组6个样本。分别在培养第24 h和48 h两个时间点,收集各组细胞,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测成骨细胞内RANKL和OPG mRNA的相对表达量。结果 RT-PCR结果显示,与不同浓度钛颗粒共培养24 h、48 h后,各组成骨细胞均有RANKL、OPG mRNA的表达;在各时间点A组、B组和C组成骨细胞RANKL和OPG mRNA相对表达量以及RANKL/OPG mRNA比值均较对照组显著增加(P<0. 05,P<0. 01)。PD98059干预组成骨细胞RANKL、OPG mRNA相对表达量以及RANKL/OPG mRNA比值均低于无PD98059干预组(P<0. 01,P<0. 05)。结论不同浓度钛合金颗粒可促进成骨细胞RANKL mRNA、OPG mRNA的表达,尤其是RANKL mRNA的表达,同时也能上调RANKL/OPG的比值。ERK信号通路抑制剂PD98059可一定程度抑制OPG的表达,尤其是RANKL的表达,提示ERK1/2信号通路可能参与调节钛合金颗粒诱导的成骨细胞RANKL、OPG的表达。 展开更多

关键词 成骨细胞 钛合金颗粒 核因子-κB受体活化因子配基 骨保护素 细胞外信号调控激酶1/2信号通路

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钛合金颗粒对人外周血单核细胞RANK基因表达影响 被引量：1

10

作者 杨旭 杨庆铭 +1 位作者 邓廉夫 许福平 《国外医学（骨科学分册）》 2002年第3期168-170,共3页

目的:探讨钛合金颗粒对人外周血单核细胞RANK基因表达影响。方法:从健康志愿者外周静脉血分离单核细胞,用无血清DMEM培养液将钛合金颗粒制成0.002％、0.01％、0.05％(v/v)三种实验浓度颗粒悬浮液,分别干预单核细胞8小时、24小时和72小时... 目的:探讨钛合金颗粒对人外周血单核细胞RANK基因表达影响。方法:从健康志愿者外周静脉血分离单核细胞,用无血清DMEM培养液将钛合金颗粒制成0.002％、0.01％、0.05％(v/v)三种实验浓度颗粒悬浮液,分别干预单核细胞8小时、24小时和72小时,采用RT-PCR半定量法和免疫组化结合共聚焦显微镜半定量法分别检测单核细胞RANK基因在mRNA和蛋白水平的变化。结果:0.01％浓度颗粒作用后,单核细胞RANK基因mRNA在8小时表达增强(P<0.05),24小时达到最高值(P<0.01),而且颗粒作用表现为浓度依赖效应关系;0.002％、0.01％浓度颗粒能够延缓举核细胞RANK蛋白在体外递减的变化趋势。结论:钛合金颗粒能够在mRNA和蛋白水平影响人外周血单核细胞RANK基因表达。 展开更多

关键词 钛合金颗粒 基因表达 磨损颗粒 假体松动 单核细胞 RANK基因 界膜 人工关节松动 骨溶解

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不同浓度钛合金颗粒对小鼠成骨细胞ERK1／2蛋白磷酸化水平的影响 被引量：1

11

作者 谢守祥 许铁 +1 位作者 孙虹 刘林 《徐州医学院学报》 CAS 2017年第3期165-168,共4页

目的探讨不同浓度钛合金颗粒对体外培养的小鼠成骨细胞的细胞外信号调控激酶1／2（ERK1／2）蛋白磷酸化水平的影响。方法①实验设空白对照组（control）和钛合金颗粒干预组（0．1g／L），每组又分为0、0．5、1、3和6h5个亚组。分别在培... 目的探讨不同浓度钛合金颗粒对体外培养的小鼠成骨细胞的细胞外信号调控激酶1／2（ERK1／2）蛋白磷酸化水平的影响。方法①实验设空白对照组（control）和钛合金颗粒干预组（0．1g／L），每组又分为0、0．5、1、3和6h5个亚组。分别在培养第0、0．5、1、3和6h5个时点，采用WesternBlot法检测不同时间点ERK1／2磷酸化水平。②实验设空白对照组（control），钛合金颗粒干预A组（0．01g／L）、B组（0．1g／L）和C组（1g／L）。在培养第0．5h，采用WesternBlot法检测不同钛合金颗粒浓度作用下成骨细胞ERK1／2磷酸化水平。结果在第0．5、1、6h时点，钛合金颗粒干预组（0．1g／L）ERK1／2磷酸化水平均较对照组高，差异有统计学意义（P〈0．01），其中0．5h亚组成骨细胞ERK1／2蛋白磷酸化水平最高；但在第3h时点，2组ERK1／2磷酸化水平的差异无统计学意义（P〉0．05）。不同浓度钛合金颗粒共培养的结果显示，不同浓度钛合金颗粒组成骨细胞的ERK1／2磷酸化水平均高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论不同浓度钛合金颗粒可促进成骨细胞ERK蛋白磷酸化水平，激活ERK信号通路。 展开更多

关键词 ERK1/2信号通路 成骨细胞 钛合金颗粒

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增强体表面镀钛对TiC/TC4复合材料耐磨性的影响

12

作者 赵彦文 闫华 《兵器材料科学与工程》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期30-34,共5页

为研究增强体表面镀钛对TiC/TC4复合材料耐磨性能的影响,以酒精为分散剂对酸洗和碱洗后的钛合金颗粒进行真空微蒸发镀钛处理,获得镀钛后的钛合金粉。将质量分数大于99%的碳化钛粉和镀钛后的钛合金粉,按不同比例混合,压制成不同增强体表... 为研究增强体表面镀钛对TiC/TC4复合材料耐磨性能的影响,以酒精为分散剂对酸洗和碱洗后的钛合金颗粒进行真空微蒸发镀钛处理,获得镀钛后的钛合金粉。将质量分数大于99%的碳化钛粉和镀钛后的钛合金粉,按不同比例混合,压制成不同增强体表面镀钛的TiC/TC4复合材料。测试其表面形貌和微观结构,并进行滑动摩擦和拉伸试验。结果表明:增强体表面镀钛处理的TiC/TC4复合材料硬度上升12.3HV,抗拉性能提高40 MPa,磨损量降低0.06 mg,动摩擦因数降低0.23,摩擦后不易脆性断裂,摩擦痕迹较轻微,耐磨性良好。 展开更多

关键词 增强体 表面镀钛 TiC/TC4复合材料 耐磨性 钛合金颗粒

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钛合金微粒通过smad通路下调成骨细胞Runx2表达

13

作者 孙国静 杨书丰 +2 位作者 郭国栋 樊根涛 赵建宁 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 2015年第2期148-151,共4页

目的探讨钛合金微粒(Ti-6Al-4V)对smad4、smad5、smad8影响,了解微粒对促骨形成信号通路影响。方法根据Ti-6Al-4V微粒浓度高低,将成骨细胞分为正常对照组(0μg/mL)、Ti-6Al-4V组(5、10、15μg/mL),采用RT-PCR和蛋白免疫印迹法(Western B... 目的探讨钛合金微粒(Ti-6Al-4V)对smad4、smad5、smad8影响,了解微粒对促骨形成信号通路影响。方法根据Ti-6Al-4V微粒浓度高低,将成骨细胞分为正常对照组(0μg/mL)、Ti-6Al-4V组(5、10、15μg/mL),采用RT-PCR和蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测培养72h成骨细胞smad4、smad5、smad8 mRNA和蛋白表达。结果培养72h后,与对照组比较,smad 4、smad5、smad8 mRNA水平下降,差异有统计学意义(P<0.05),smad4 mRNA水平随Ti-6Al-4V微粒浓度增加呈抑制作用,差异有统计学意义(P<0.05),smad4、smad5、smad8蛋白水平分别与其mRNA表达变化趋势一致。结论 Ti-6Al-4V微粒下调受体调节蛋白smad5、smad8和公用型蛋白Smad4表达,是Ti-6Al-4V微粒抑制核转录因子runx2表达关联因素之一。 展开更多

关键词 钛合金颗粒 成骨细胞 SMADS蛋白 RUNX2

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