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三种经典钙黏蛋白分子在鸡胚脊髓发育过程中的表达模式
1
作者 李晗 杨慈清 +3 位作者 乔梁 张必超 于亚楠 林俊堂 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期261-264,F0003,共5页
目的：揭示神经钙黏蛋白、钙黏蛋白6与钙黏蛋白7在鸡胚脊髓发育过程中的时空表达模式。方法：取鸡胚正常发育过程 E3、E4、E5、E6、E8和 E10各时期的脊髓,原位杂交法检测神经钙黏蛋白、钙黏蛋白6与钙黏蛋白7在鸡胚脊髓发育过程中的时空... 目的：揭示神经钙黏蛋白、钙黏蛋白6与钙黏蛋白7在鸡胚脊髓发育过程中的时空表达模式。方法：取鸡胚正常发育过程 E3、E4、E5、E6、E8和 E10各时期的脊髓,原位杂交法检测神经钙黏蛋白、钙黏蛋白6与钙黏蛋白7在鸡胚脊髓发育过程中的时空表达模式。结果：在 E3~E6时期,神经钙黏蛋白主要在神经上皮层、生皮节、脊索、顶板、底板以及背根神经节区域表达,E8~E10时期,其 mRNA 信号主要在灰质区和背根神经节；在 E3~E5时期,钙黏蛋白6主要在生皮节、顶板和底板表达,之后在顶板和底板的表达均减弱,主要在侧运动柱表达；E3~E6时期,钙黏蛋白7主要在生皮节、底板、基板背部、运动柱、背根和腹根强烈表达,E8之后其表达主要集中在灰质区和腹根。结论：神经钙黏蛋白、钙黏蛋白6与钙黏蛋白7不同的表达模式预示着它们在脊髓及其周围组织发育过程中扮演不同角色。 展开更多
关键词 神经钙黏蛋白 钙黏蛋白6 钙黏蛋白7 原位杂交 表达模式
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原钙黏蛋白7的结构和功能及与肿瘤的关系
2
作者 陈红芳 刘瑞雪 +3 位作者 史金胜 刘爱珍 郑洁 宗佩君 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2024年第1期61-65,共5页
钙黏附蛋白是一类钙依赖性的黏附分子,是一种细胞跨膜糖蛋白,介导正常组织、肿瘤组织中细胞-细胞间的黏附作用,原钙黏蛋白(protocadherin,PCDH)是其最大的亚家族。PCDH广泛分布于中枢神经系统,根据基因结构分为非成簇原钙黏蛋白和成簇... 钙黏附蛋白是一类钙依赖性的黏附分子,是一种细胞跨膜糖蛋白,介导正常组织、肿瘤组织中细胞-细胞间的黏附作用,原钙黏蛋白(protocadherin,PCDH)是其最大的亚家族。PCDH广泛分布于中枢神经系统,根据基因结构分为非成簇原钙黏蛋白和成簇原钙黏蛋白。PCDH7属于非成簇PCDHs家族,在人类基因组中定位于4p15,主要在人类的脑和心脏中表达,具有与经典钙黏附蛋白相似的作用,介导细胞之间的识别和黏附。在多种肿瘤中均检测到不同程度PCDH7的异常表达,PCDH7可能与肿瘤的增殖、侵袭、转移和预后相关。本文对PCDH7的基因结构和功能与肿瘤的关系作一综述。 展开更多
关键词 原钙黏蛋白7 分子结构 生物学功能 肿瘤
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ICR小鼠脑发育过程中原钙黏蛋白7a表达及意义 被引量：4
3
作者 肖华娟 亓月 +1 位作者 李佳娜 熊轶 《中华实用诊断与治疗杂志》 2017年第11期1072-1075,共4页
目的探讨ICR小鼠不同发育阶段脑组织原钙黏蛋白7a(protocadherin 7a,Pcdh7a)基因表达及临床意义。方法取胚胎期第16.5、18.5天,出生即刻及出生后第3、7、14、21、30、60天ICR小鼠脑组织,采用实时荧光定量PCR法检测海马和小脑组织Pcdh7a... 目的探讨ICR小鼠不同发育阶段脑组织原钙黏蛋白7a(protocadherin 7a,Pcdh7a)基因表达及临床意义。方法取胚胎期第16.5、18.5天,出生即刻及出生后第3、7、14、21、30、60天ICR小鼠脑组织,采用实时荧光定量PCR法检测海马和小脑组织Pcdh7a基因表达,采用原位杂交法检测ICR小鼠不同部位脑组织Pcdh7a基因表达。结果小脑组织Pcdh7amRNA相对表达量在胚胎期第18.5天(3.26±0.27),出生即刻及出生后第3、7、14、21、30、60天(4.45±0.23、5.13±0.33、3.47±0.39、5.22±0.75、5.74±0.38、6.48±0.29、6.20±0.29)均明显高于胚胎期第16.5天(1.00±0.03)(P<0.05);胚胎期第16.5、18.5天,出生即刻及出生后第3、7、14、21、30、60天海马组织Pcdh7amRNA相对表达量(1.00±0.04、0.94±0.07、1.06±0.08、0.96±0.08、0.93±0.03、0.82±0.01、0.84±0.01、1.00±0.03、1.00±0.02)比较差异均无统计学意义(P>0.05);原位杂交结果显示,胚胎期第16.5天、出生后第7天Pcdh7amRNA主要在嗅球、海马、皮层和小脑中高表达,出生后第21天主要在海马、小脑、延髓、脑桥高表达,出生后第30天主要在海马、皮层和小脑高表达,且在海马中主要表达于CA1区和DG区。结论 Pcdh7a基因在ICR小鼠不同发育阶段不同部位脑组织呈高表达,可能参与ICR小鼠神经系统发育过程中学习记忆、嗅觉系统及运动功能的调节。 展开更多
关键词 原钙黏蛋白7a 实时荧光定量PCR 原位杂交 神经系统发育 ICR小鼠
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异常甲基化的原钙黏蛋白7对雄激素非依赖性前列腺癌细胞生长的影响 被引量：2
4
作者 徐思琪 李红胜 +2 位作者 吴晓燕 郭建伟 张姣丽 《江苏医药》 CAS 2020年第9期865-868,共4页
目的探讨异常甲基化的原钙黏蛋白7(PCDH7)对雄激素非依赖性前列腺癌(AIPC)细胞生长的影响。方法培养AIPC细胞系LNCaP-AI,采用甲基化酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(AZA)处理细胞24 h,RT-PCR和Western blot法检测PCDH7 mRNA和蛋白的表达水... 目的探讨异常甲基化的原钙黏蛋白7(PCDH7)对雄激素非依赖性前列腺癌(AIPC)细胞生长的影响。方法培养AIPC细胞系LNCaP-AI,采用甲基化酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(AZA)处理细胞24 h,RT-PCR和Western blot法检测PCDH7 mRNA和蛋白的表达水平,CCK-8法检测细胞生长情况,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell法检测细胞侵袭能力。结果加入AZA后,PCDH7基因启动子片段1甲基化水平为0.00486±0.00144,低于对照组的0.00956±0.00594,片段2甲基化水平为0.00610±0.00171,低于对照组的0.00858±0.00180(P<0.05),且PCDH7 mRNA和蛋白表达均上调(P<0.01)。加入DNA甲基化转移酶1后PCDH7 mRNA和蛋白表达下调(P<0.05)。加入AZA后,细胞生长抑制率和细胞凋亡率增加[(15.3%vs.0%)和(5.06%vs.3.44%)](P<0.01),侵袭细胞数下降(P<0.01)。结论异常甲基化的PCDH7在AIPC细胞中表达上调,能够抑制细胞生长和侵袭能力,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 雄激素非依赖性前列腺癌 原钙黏蛋白7
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原钙黏蛋白7对小鼠皮层神经元细胞凋亡的影响 被引量：1
5
作者 张一丹 何英 +2 位作者 李佳娜 陈小帆 熊轶 《中华实用诊断与治疗杂志》 2019年第9期857-859,共3页
目的探讨原钙黏蛋白7(protocadherin 7,Pcdh7)基因在促进小鼠皮层神经元细胞凋亡中的作用及可能机制。方法原代培养的C57BL/6小鼠皮层神经元细胞,随机分为空载组(转染空白质粒)、Pcdh7过表达组(转染Pcdh7过表达质粒)、Ca^2+通道阻滞组(... 目的探讨原钙黏蛋白7(protocadherin 7,Pcdh7)基因在促进小鼠皮层神经元细胞凋亡中的作用及可能机制。方法原代培养的C57BL/6小鼠皮层神经元细胞,随机分为空载组(转染空白质粒)、Pcdh7过表达组(转染Pcdh7过表达质粒)、Ca^2+通道阻滞组(转染Pcdh7过表达质粒及Ca^2+通道抑制剂西尼地平)。转染48h,采用流式细胞仪检测3组神经元细胞内Ca^2+荧光强度,CCK-8法检测3组神经元细胞存活率,荧光探针法检测3组神经元细胞凋亡率。结果Pcdh7过表达组神经元细胞内Ca^2+荧光强度[(30.57±4.34)MFI]高于空载组[(18.60±0.57)MFI]和Ca^2+通道阻滞组[(18.63±1.97)MFI](P<0.05),空载组与Ca^2+通道阻滞组比较差异无统计学意义(P>0.05);Pcdh7过表达组神经元细胞存活率吸光度值(0.64±0.04)低于空载组(1.01±0.03)和Ca^2+通道阻滞组(0.84±0.02)(P<0.05),且Ca^2+通道阻滞组低于空载组(P<0.05);Pcdh7过表达组神经元细胞凋亡率[(34.10±4.00)%]高于空载组[(13.56±2.48)%]和Ca^2+通道阻滞组[(13.98±3.00)%](P<0.05),空载组与Ca^2+通道阻滞组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论过表达Pcdh7基因可诱导小鼠皮层神经元细胞凋亡,其机制可能与促进细胞内Ca^2+内流有关。 展开更多
关键词 原钙黏蛋白7 皮层神经元细胞 凋亡 CA^2+ 小鼠
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过表达原钙黏蛋白7对小鼠皮层神经元突起的影响
6
作者 何英 宇文婷 +2 位作者 李佳娜 陈小帆 熊轶 《解剖学研究》 CAS 2020年第3期193-196,共4页
目的探讨过表达原钙黏蛋白7(Pcdh7)基因对小鼠原代皮层神经元突起发育的影响。方法体外原代培养C57/B6小鼠胚胎18.5 d的大脑皮层神经元,随机分为空白对照组、实验对照组(空载组)和过表达原钙黏蛋白7基因组(过表达组)。运用免疫细胞化学... 目的探讨过表达原钙黏蛋白7(Pcdh7)基因对小鼠原代皮层神经元突起发育的影响。方法体外原代培养C57/B6小鼠胚胎18.5 d的大脑皮层神经元,随机分为空白对照组、实验对照组(空载组)和过表达原钙黏蛋白7基因组(过表达组)。运用免疫细胞化学术检测神经元突起的标记物β-Tubulin Ⅲ的表达来反映各组培养的神经元轴突的长度和初级树突分支数,同时,采用Western blot检测各组神经元Pcdh7及磷酸化丝切蛋白的表达水平。结果过表达Pcdh7基因后,其皮层神经元轴突长度[(247.4±99.38)μm]显著高于对照组和实验对照组[分别为(179.4±97.91)μm和(172.1±65.20)μm],差异有统计学意义(P<0.01),但其初级树突分支数(2.74±1.302)却明显低于对照组和空载组(分别为3.726±0.890和3.793±1.196)(P<0.01);而Western blot结果显示,当原代培养的神经元过表达Pcdh7基因时,与对照组相比,其磷酸化丝切蛋白的表达水平明显降低(P<0.01)。结论在原代培养的小鼠皮层神经元中过表达Pcdh7基因,在致其神经元轴突过度生长的同时,并抑制其树突产生分支。其机制可能与下调磷酸化丝切蛋白的表达水平相关。 展开更多
关键词 原钙黏蛋白7 皮层神经元 轴突发育 树突分支 丝切蛋白
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原钙黏蛋白7b与绿色荧光蛋白融合基因表达载体的构建及其在MCF10A细胞中的表达定位
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作者 陈昂 袁龙 +8 位作者 张峥嵘 梁剑青 闫敏 李世崇 王启伟 孙强 刘真真 管静芝 陈昭烈 《生物技术通讯》 CAS 2016年第3期322-325,共4页
目的:构建原钙黏蛋白7b(PCDH7b)与绿色荧光蛋白(GFP)的融合基因表达载体pQCXIP-PCDH7b-EGFP,并检测PCDH7b-GFP融合蛋白在细胞中的表达定位。方法:以MDA-MB-436细胞基因组DNA为模板,PCR扩增人PCDH7b基因,克隆入逆转录病毒载体pQCXIP-EGFP... 目的:构建原钙黏蛋白7b(PCDH7b)与绿色荧光蛋白(GFP)的融合基因表达载体pQCXIP-PCDH7b-EGFP,并检测PCDH7b-GFP融合蛋白在细胞中的表达定位。方法:以MDA-MB-436细胞基因组DNA为模板,PCR扩增人PCDH7b基因,克隆入逆转录病毒载体pQCXIP-EGFP-N1构建pQCXIP-PCDH7b-EGFP,病毒包装后感染人乳腺上皮细胞系MCF10A,免疫荧光染色检测其与膜蛋白E钙黏蛋白的相对表达定位。结果:构建获得逆转录病毒载体pQCXIP-PCDH7b-EGFP,融合蛋白PCDH7b-GFP定位于细胞浆和细胞膜,与E钙黏蛋白有共定位。结论:PCDH7b-GFP融合蛋白的表达,为后续活细胞成像分析PCDH7b在细胞内的动态分布奠定了基础。 展开更多
关键词 原钙黏蛋白7 基因克隆 亚细胞定位
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