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Calcein-AM/PI双染法结合流式细胞术检测γδT细胞毒性的方法 被引量:3
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作者 饶秀茸 崔博婧 +2 位作者 付凡 王宇环 马飞 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期620-625,共6页
目的建立和优化钙黄绿素-AM(Calcein-AM)和碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染法结合流式细胞术检测γδT细胞细胞毒活性的方法。方法利用Calcein-AM标记靶细胞,然后与效应细胞共孵育24 h,结束后加入PI,最后流式细胞术检测;通过BD... 目的建立和优化钙黄绿素-AM(Calcein-AM)和碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染法结合流式细胞术检测γδT细胞细胞毒活性的方法。方法利用Calcein-AM标记靶细胞,然后与效应细胞共孵育24 h,结束后加入PI,最后流式细胞术检测;通过BD公司绝对细胞计数管验证上述流程的稳定性和可靠性。结果 Calcein-AM能在较低浓度(0.1~0.5μmol/L)下对靶细胞在宽密度范围(0.1~10)×10^6/ml内进行很好标记,而且24 h内对细胞活率无影响,同时还能与未标记细胞进行很好的区分;整个流程具有很好的稳定性和可靠性。结论建立并优化了Calcein-AM/PI双染法结合流式细胞术检测γδT细胞细胞毒效应的方法,本方法除操作简单、重复性好、灵敏度高外,还能更好的区分死亡细胞的来源。 展开更多
关键词 钙黄绿素-am ΓΔT细胞 细胞毒活性 流式细胞术
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双黄连粉针剂体外抗HIV-1作用的实验研究 被引量:1
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作者 曾祥凤 曾耀英 +2 位作者 李海仙 林长乐 李莉平 《河南中医学院学报》 CAS 2006年第1期3-5,共3页
目的:探讨双黄连粉针剂在体外是否有抗HIV作用及其可能的作用机制。方法:采用荧光染料Calcien AM标记HIV感染的慢性H9细胞(H9/HIV-1ⅢB)与不同稀释浓度的双黄连粉针剂作用后,与靶细胞MT-2细胞混合培养,观察MT-2和H9/HIV-1ⅢB融合细胞的... 目的:探讨双黄连粉针剂在体外是否有抗HIV作用及其可能的作用机制。方法:采用荧光染料Calcien AM标记HIV感染的慢性H9细胞(H9/HIV-1ⅢB)与不同稀释浓度的双黄连粉针剂作用后,与靶细胞MT-2细胞混合培养,观察MT-2和H9/HIV-1ⅢB融合细胞的变化;MTT法检测双黄连对HIV感染细胞的保护作用;HIV-1 P24抗原试剂盒检测药物作用后的细胞培养上清P24抗原含量的变化。结果:双黄连粉针剂能够抑制MT2和H9/HIV-1ⅢB融合,能够保护HIV感染细胞的死亡,减少HIV-1 P24抗原的表达。结论:双黄连粉针剂在体外具有抗HIV-1的作用。 展开更多
关键词 双黄连 HIV-1 细胞融合 钙黄绿素am
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