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无血清培养上调N2a细胞钙反应性反式激活因子的表达 被引量：2
1
作者 王巧真 金真真 +2 位作者 彭挺 管英俊 李和 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2012年第5期447-452,共6页
目的探讨钙反应性反式激活因子(calcium-responsive transactivator,CREST)是否与神经细胞的分化有关。方法选用在促分化因素作用下具有分化为神经元能力的小鼠神经母细胞瘤(N2a)细胞,用无血清培养(血清撤除)诱导N2a细胞分化。接种和培... 目的探讨钙反应性反式激活因子(calcium-responsive transactivator,CREST)是否与神经细胞的分化有关。方法选用在促分化因素作用下具有分化为神经元能力的小鼠神经母细胞瘤(N2a)细胞,用无血清培养(血清撤除)诱导N2a细胞分化。接种和培养N2a细胞12～24h后,将其分为对照组和无血清诱导组,对照组继续在含5%胎牛血清(FBS)的培养基中培养,无血清诱导组在不含FBS的培养基中培养。采用免疫印迹技术、免疫荧光技术和RT-PCR检测无血清诱导分化对N2a细胞CREST蛋白和mRNA表达的影响。结果在含5%胎牛血清(FBS)培养基培养的对照N2a细胞中,CREST蛋白水平在各时间点均无明显变化,CREST mRNA水平仅在培养48h后略有升高。而在无血清诱导分化的N2a细胞中,CREST蛋白表达水平在无血清诱导12h时无明显变化,但在诱导24h后明显升高,诱导48h后进一步升高;RT-PCR检测显示,CREST mRNA在无血清诱导12h后即开始升高,诱导24h和48h则升高更为明显。结论无血清诱导分化的N2a细胞中CREST的表达上调,提示CREST可能参与神经细胞的分化。 展开更多
关键词 钙反应性反式激活因子 小鼠神经母细胞瘤细胞 神经元分化
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CREST对N2a细胞突起生长的影响
2
作者 王巧真 李和 +1 位作者 金真真 彭挺 《潍坊医学院学报》 2014年第5期321-323,351,共4页
目的观察钙反应性反式激活因子(CREST)过表达对小鼠神经母细胞瘤(N2a)细胞突起生长的影响。方法实验分为3组,实验组用pCMV-HA-CREST转染的N2a细胞,空载体对照组用pCMV-HA转染的N2a细胞,空白对照组用未转染任何试剂的N2a细胞,分别加入70m... 目的观察钙反应性反式激活因子(CREST)过表达对小鼠神经母细胞瘤(N2a)细胞突起生长的影响。方法实验分为3组,实验组用pCMV-HA-CREST转染的N2a细胞,空载体对照组用pCMV-HA转染的N2a细胞,空白对照组用未转染任何试剂的N2a细胞,分别加入70mmol/L KCl孵育过夜。在转染后24h,48h采用考马斯亮蓝染色法检测N2a细胞突起生长状态。结果在转染后24h,CREST基因过表达的细胞与两对照组细胞相比较,细胞突起生长差异无显著性。在转染后48h,CREST基因过表达的细胞与两对照组细胞相比较,突起生长明显,部分突起交织成网络。两对照组间在细胞转染后各时间点突起生长状态差异无显著性(P<0.05)。结论过表达CREST可促进N2a细胞突起的生长。 展开更多
关键词 钙反应性反式激活因子 小鼠神经母细胞瘤细胞 突起生长
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钙反应性反式激活因子在肌萎缩侧索硬化症转基因鼠中的表达及意义
3
作者 卢强 陈燕春 +6 位作者 刘永新 接琳琳 王巧真 杜红梅 宋妍 侯琛 周风华 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2017年第17期4177-4179,共3页
目的探讨钙反应性反式激活因子(CREST)在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠脊髓及脑干组织中的表达变化及相关性作用。方法分别取出生后95 d、108 d、122 d(早、中、晚期)野生型与SOD1-G93A转基因鼠,通过RT-PCR、蛋白免疫印迹技术检测脊髓... 目的探讨钙反应性反式激活因子(CREST)在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠脊髓及脑干组织中的表达变化及相关性作用。方法分别取出生后95 d、108 d、122 d(早、中、晚期)野生型与SOD1-G93A转基因鼠,通过RT-PCR、蛋白免疫印迹技术检测脊髓组织中CREST mRNA及蛋白水平表达变化,通过免疫荧光双标记技术检测脊髓及脑干组织中CREST的表达变化及与神经元及星形胶质细胞的共表达情况。结果 (1)与野生型鼠相比较,SOD1-G93A转基因鼠脊髓组织中CREST蛋白水平下调(P<0.05),在mRNA水平变化并不明显。(2)免疫荧光双标检测显示,CREST主要表达于细胞核,与神经元有共表达,与星形胶质细胞不存在共表达;与野生型鼠比较,SOD1-G93A转基因鼠脊髓和脑干组织中CREST表达下调(P<0.05)。结论 CREST的差异表达可能与ALS运动神经元的功能障碍有关。 展开更多
关键词 钙反应性反式激活因子 肌萎缩侧索硬化症
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CREST在骨巨细胞瘤中的表达及意义
4
作者 王巧真 刘焕彩 +1 位作者 陈燕春 周风华 《潍坊医学院学报》 2014年第6期408-410,446,共4页
目的研究钙反应性反式激活因子(CREST)在各级骨巨细胞瘤组织中的表达变化,探讨其与骨巨细胞瘤临床病理分级的关系。方法应用免疫组织化学技术检测60例骨巨细胞瘤标本中CREST的表达变化。结果 CREST定位于细胞核,表达于大多数骨巨细胞瘤... 目的研究钙反应性反式激活因子(CREST)在各级骨巨细胞瘤组织中的表达变化,探讨其与骨巨细胞瘤临床病理分级的关系。方法应用免疫组织化学技术检测60例骨巨细胞瘤标本中CREST的表达变化。结果 CREST定位于细胞核,表达于大多数骨巨细胞瘤的肿瘤细胞中。随着肿瘤组织临床病理分级增高,CREST表达率增高,CREST的表达在骨巨细胞瘤率Ⅰ级和骨巨细胞瘤Ⅲ级间的差别有统计学意义(P<0.05),在骨巨细胞瘤其他各分级间差异无显著性(P>0.05)。结论 CREST的表达与临床病理分级存在一定相关性。 展开更多
关键词 钙反应性反式激活因子 骨巨细胞瘤 免疫组织化学技术
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