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辣椒轻斑驳病毒辽宁分离物的鉴定及序列分析 被引量:11
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作者 李晓冬 安梦楠 +2 位作者 王冠中 赵秀香 吴元华 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期29-34,共6页
采用鉴别寄主、血清学及RT-PCR检测的方法对采自辽宁省葫芦岛地区的辣椒病毒进行了分离与鉴定,并将克隆得到的病毒CP基因进行测序及同源性比较.结果表明:该病毒分离物可侵染辣椒(Capsicum frutescens)产生局部枯斑、系统斑驳或花叶;... 采用鉴别寄主、血清学及RT-PCR检测的方法对采自辽宁省葫芦岛地区的辣椒病毒进行了分离与鉴定,并将克隆得到的病毒CP基因进行测序及同源性比较.结果表明:该病毒分离物可侵染辣椒(Capsicum frutescens)产生局部枯斑、系统斑驳或花叶;局部侵染普通烟(Nicotiana tabacum)、心叶烟(Nicotiana glutinosa)、三生烟(Nicotiana tabacum. var. samsun)、矮牵牛(Petuniahybrida)产生坏死枯斑,在曼陀罗(Datura stramonium)、洋酸浆(Physalis pubescens)和苋色藜(Chenopodium amaranticolor)上引起褪绿斑;不能侵染番茄(Lycopersicon esculentum)、葫芦(Lagenaria siceraria)、甜瓜(Cucumis melo)、黄瓜(Cucumis sativus)、千日红(Gomphrena globosa)、白菜(Brassica pekinensis)、百日草(Zinnia elegans)、蚕豆(Vicia faba)和玉米(Zea mays).辣椒病叶、病果和种子及表现症状的鉴别寄主叶片经DAS-ELISA检测均证实存在辣椒轻斑驳病毒(Pepper mild mottle virus, PMMoV).通过RTPCR技术成功克隆获得该病毒CP基因,测序并分析其同源性表明,该分离物与GenBank 上已报道的13 个国内外PMMoV分离物同源性很高,核苷酸和氨基酸同源性均为94%-100%.将该分离物与其他13 个PMMoV分离物的CP基因序列一起构建系统发育进化树分析表明,该分离物与各亚洲分离物亲缘关系密切,并与国内各分离物可能具有相同的进化祖先.综上所述,辽宁辣椒上发现的病毒可鉴定为辣椒轻斑驳病毒辽宁分离物(PMMoV-LN),此为辽宁辣椒生产区首次报道.由于PMMoV 具有典型的种传特性,而我国目前尚未将其列为检疫对象,这将促进病毒的快速扩展蔓延,因此应重视该病毒的危害性及对我国辣椒生产的潜在威胁,并加强其抗病育种和检验检疫工作以达到对PMMoV防控的目的. 展开更多
关键词 辣椒 辣椒轻斑驳病毒 鉴别寄主反应 DAS-ELISA RT-PCR 序列分析
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来自安徽不同寄主PVY分离物的血清学鉴定及其cp基因分子进化分析 被引量:7
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作者 江彤 陈伟 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期540-543,共4页
Tobacco and potato samples showing symptoms of PVY were collected from different regions in Anhui Province,and the ELISA results of partial samples were positive.The total RNA was extracted from the positive samples b... Tobacco and potato samples showing symptoms of PVY were collected from different regions in Anhui Province,and the ELISA results of partial samples were positive.The total RNA was extracted from the positive samples by TRIZOL methods.Specific primer pair was designed to amplify cp gene of PVY by RT-PCR.Sequencing results indicated that the full length of cp gene of PVY from tobacco(PVY-CP-4) and potato(PVY-CP-7) is 801 nts,and each of them encodes 266 amino acids.A phylogenetic tree based on alignment of cp nucleotide sequences was constructed and the sequence comparing of cp gene was conducted.The results showed that PVY-CP-4 could be grouped into one branch with PVYO and PVYN:O and shared the highest sequence similarity(99.4%) with PVYO(EF026074).It was suggested that PVY-CP-4 derived from tobacco in Hefei might belong to PVYO.PVY-CP-7 clustered together with PVYN and PVYNTN and formed another branch.Furthermore,PVY-CP-7 shared the highest sequence similarity(98.3%) with PVYNTN(AJ890347),PVYNTN(EF026075) and PVYNTN(AJ585342).It was supposed that PVY-CP-7 derived from potato in Wuhe probably belonged to PVYNTN. 展开更多
关键词 鉴别寄主反应 PVY 血清学鉴定 分子进化 CP基因 分离物 马铃薯Y病毒 安徽
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大豆胞囊线虫生理小种的鉴定及其比较电泳研究 被引量:5
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作者 齐军山 陈品三 +1 位作者 胡起宇 王寿华 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期71-75,共5页
对采自内蒙古、山东、黑龙江、江苏、北京五省市(区)大豆胞囊线虫种群在国际统一的鉴别寄主Pickett、Peking、PI88788、PI90763和Lee上进行了生理小种鉴定。鉴定出1号、2号、3号、4号、5号和6号生理小种。其中1号、3号和4号生理小种分... 对采自内蒙古、山东、黑龙江、江苏、北京五省市(区)大豆胞囊线虫种群在国际统一的鉴别寄主Pickett、Peking、PI88788、PI90763和Lee上进行了生理小种鉴定。鉴定出1号、2号、3号、4号、5号和6号生理小种。其中1号、3号和4号生理小种分布较广,为优势生理小种。应用改良的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)将大豆胞囊线虫1~4号生理小种中国种群的可溶性蛋白分为30~31条蛋白带。其中3号和4号生理小种有31条蛋白带,而1号和2号生理小种只有30条蛋白带,前者比后者多一条蛋白带,其分子量为91201。 展开更多
关键词 大豆 胞囊线虫 生理小种 鉴定 SDS-PAGE 鉴别寄主反应
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聚类分析在棉花枯萎菌生理小种鉴定中的应用 被引量:3
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作者 田新莉 赵宗胜 李国英 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2001年第4期288-290,319,共4页
为找到一种较为客观地鉴定生理小种的方法 ,对采用鉴别寄主法鉴定枯萎病菌生理小种的一些数据运用UPGMA聚类分析的方法进行处理 ,结果两者基本一致 ,且聚类分析可将传统方法分类不明确的菌株有个较明确的归属。传统试验方法结合聚类分... 为找到一种较为客观地鉴定生理小种的方法 ,对采用鉴别寄主法鉴定枯萎病菌生理小种的一些数据运用UPGMA聚类分析的方法进行处理 ,结果两者基本一致 ,且聚类分析可将传统方法分类不明确的菌株有个较明确的归属。传统试验方法结合聚类分析能使棉花枯萎菌生理小种的划分更加科学。 展开更多
关键词 聚类分析 棉花枯萎菌 生理小种 鉴别寄主 鉴别寄主反应 尖孢镰孢菌
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番茄黑环病毒检测方法的建立 被引量:4
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作者 高焕利 杨翠云 +3 位作者 周国梁 于翠 乔艳艳 马青 《植物检疫》 2007年第3期149-152,共4页
通过汁液摩擦接种的方法接种几种鉴别寄主,筛选出检测番茄黑环病毒(TBRV)的一套鉴别寄主。同时建立了免疫学电镜检测方法。根据TBRV外壳蛋白基因的保守序列设计2对引物,应用RT-PCR均能从TBRV的6个分离物中扩增到与预期大小相同的DNA片... 通过汁液摩擦接种的方法接种几种鉴别寄主,筛选出检测番茄黑环病毒(TBRV)的一套鉴别寄主。同时建立了免疫学电镜检测方法。根据TBRV外壳蛋白基因的保守序列设计2对引物,应用RT-PCR均能从TBRV的6个分离物中扩增到与预期大小相同的DNA片段。利用抽提的质粒研究了RT-PCR方法检测TBRV的灵敏度。 展开更多
关键词 番茄黑环病毒(TBRV) 鉴别寄主反应 免疫电镜 RT-PCR 灵敏度
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建兰花叶病毒检测标准方法的建立 被引量:2
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作者 杨翠云 于翠 +4 位作者 郑建中 陶庭典 王寿南 顾劲翊 赵惠玲 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2006年第3期250-255,共6页
经过2004 ̄2005两年对上海口岸进境和进境后种植的260个兰花品种上建兰花叶病毒(CyMV)检测方法的研究,分别建立了检测和鉴定兰花上建兰花叶病毒的DAS-ELISA、电镜观察、鉴别寄主反应、RT-PCR和IC-RT-PCR的方法。
关键词 建兰花叶病毒 鉴别寄主反应 DAS-ELISA 电镜观察 RT-PCR IC-RT-PCR
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