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牦牛金属硫蛋白-Ⅲ(MT-Ⅲ)cDNA分子克隆及序列分析 被引量:7
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作者 刘斌 吴建平 +3 位作者 张利平 马彬云 杨联 高凤芹 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2006年第3期5-10,共6页
利用基因特异引物YMT-ⅢSP1和YMT-ⅢSP2,通过RT-PCR从牦牛大脑组织中克隆出了牦牛MT-Ⅲ基因编码区全长.将牦牛MT-ⅢcDNA序列在CBI上进行同源性搜索发现牦牛MT-Ⅲ编码区序列与羊、猪、人、鼠的同源性分别为95%、92%、89%、86%,该序... 利用基因特异引物YMT-ⅢSP1和YMT-ⅢSP2,通过RT-PCR从牦牛大脑组织中克隆出了牦牛MT-Ⅲ基因编码区全长.将牦牛MT-ⅢcDNA序列在CBI上进行同源性搜索发现牦牛MT-Ⅲ编码区序列与羊、猪、人、鼠的同源性分别为95%、92%、89%、86%,该序列在不同哺乳动物中相当保守,并通过牦牛MTs(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)编码区序列之间的分析表明,MT-Ⅰ与MT-Ⅱ编码的蛋白质性质、功能之间差异较小,而MT-Ⅲ与MT-Ⅰ/Ⅱ编码的蛋白质性质、功能之间差异相对较大.牦牛MT-Ⅲ基因编码的MT-Ⅲ蛋白由68个氨基酸组成,其中19个半胱氨酸,具有MTs保守的短肽结构如:C-X-C、C-C-X-C-C、C-X-X-C、KKS以及MT-Ⅲ特异的MDPE、CPCP等结构,在分子进化上很保守.分析表明了牦牛MT-Ⅲ蛋白质是一个低分子量,富含半胱氨酸.不含芳香族氨基酸,也无二硫键的蛋白质. 展开更多
关键词 牦牛 金属蛋白- cDNA分子克隆 序列分析
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金属硫蛋白对小鼠大脑皮层细胞的保护作用 被引量:2
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作者 康洁 李淑萍 《信阳师范学院学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2005年第2期172-175,共4页
用MT Ⅲ重组腺病毒感染原代培养的小鼠大脑皮层神经细胞,研究MT Ⅲ是否对谷氨酸和Aβ引起的神经毒性有保护作用 MTT法和PI Hochest(33342)双染色法分析细胞成活显示,MT Ⅲ的表达能有效地提高谷氨酸和Aβ处理后的神经细胞相对成活率,并... 用MT Ⅲ重组腺病毒感染原代培养的小鼠大脑皮层神经细胞,研究MT Ⅲ是否对谷氨酸和Aβ引起的神经毒性有保护作用 MTT法和PI Hochest(33342)双染色法分析细胞成活显示,MT Ⅲ的表达能有效地提高谷氨酸和Aβ处理后的神经细胞相对成活率,并在由谷氨酸诱导的细胞凋亡通路中阻碍CDK5 展开更多
关键词 金属蛋白- 淀粉状β蛋白 谷氨酸 早老性痴呆 神经毒性
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神经生长抑制因子在体外可抑制嗜铬细胞瘤株PC12 被引量:2
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作者 季清洲 茹柄根 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第19期1633-1636,共4页
神经生长抑制因子(GIF)又名金属硫蛋白-Ⅲ, 是神经系统中第一个被鉴定的具有神经元生长抑制功能的蛋白. 采用MTT还原测定法测定了重组GIF对嗜铬细胞瘤株PC12和成神经细胞瘤株SY5Y生长的影响: 重组GIF在体外可抑制PC12的生长; 在浓度为10... 神经生长抑制因子(GIF)又名金属硫蛋白-Ⅲ, 是神经系统中第一个被鉴定的具有神经元生长抑制功能的蛋白. 采用MTT还原测定法测定了重组GIF对嗜铬细胞瘤株PC12和成神经细胞瘤株SY5Y生长的影响: 重组GIF在体外可抑制PC12的生长; 在浓度为100 mg/L时, 对PC12的抑制率约为25%; 而当浓度为300 mg/L时, 对PC12的抑制率达到约50%. 表明PC12可作为神经元模型来测定GIF的神经元生长抑制活性. GIF在体外不能抑制常用作神经细胞瘤株模型的SY5Y, 表明GIF并不具有广谱的抑制神经细胞瘤株的作用; GIF抑制PC12可能就是针对它所具有的胆碱能神经元的某些特性. 这对于揭示GIF的神经元生长抑制活性的作用机制有着重要意义. 展开更多
关键词 神经生长抑制因子 嗜铬细胞瘤株PC12 成神经细胞瘤株SY5Y MTT还原测定法 生长抑制 金属蛋白-
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山羊金属硫蛋白-Ⅲ基因克隆及序列分析 被引量:1
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作者 王磊 杨联 +1 位作者 吴建平 汪晓娟 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第12期92-96,共5页
通过设计特异性引物MT-ⅢSP1和MT-ⅢSP2,采用RT-PCR方法从山羊脑组织中克隆出金属硫蛋白-Ⅲ(MT-Ⅲ)基因编码区全序列,片段长度均为207 bp,提交GenBank,登录号为:EF471976。山羊MT-Ⅲ基因编码68个氨基酸,含19个半胱氨酸,不含芳香族氨基... 通过设计特异性引物MT-ⅢSP1和MT-ⅢSP2,采用RT-PCR方法从山羊脑组织中克隆出金属硫蛋白-Ⅲ(MT-Ⅲ)基因编码区全序列,片段长度均为207 bp,提交GenBank,登录号为:EF471976。山羊MT-Ⅲ基因编码68个氨基酸,含19个半胱氨酸,不含芳香族氨基酸和组氨酸。BLAST比对结果表明,山羊与牛、绵羊、狗、猪、人、黑猩猩和鼠的氨基酸同源性分别为99.5%、98.6%、89.4%、88.5%、88.2%、88.2%和83.8%,说明MT-Ⅲ在物种间高度同源,进化上高度保守,含有MT-Ⅲ特有的MDPET、C-X-C、C-C-X-C-C、C-X-X-C、KKS(X为非Cys外的其它氨基酸)等保守的短肽结构。系统进化树结果表明,由核苷酸序列与氨基酸序列建立的系统进化树结果一致,并与比较形态学和比较生理学分类结果一致。 展开更多
关键词 山羊 金属蛋白- CDNA 序列分析
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山羊MT-Ⅲ分子特性研究
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作者 王磊 杨联 +3 位作者 张利平 吴建平 雷赵民 徐建峰 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期6-11,共6页
通过设计特异性引物MT-ⅢSP1和MT-ⅢSP2,采用RT-PCR方法分别从奶山羊和绒山羊脑组织中克隆出金属硫蛋白-Ⅲ(MT-Ⅲ)基因编码区全序列,并利用生物信息学方法分析山羊MT-Ⅲ的分子特性.结果表明:奶山羊和绒山羊MT-Ⅲ基因编码区全长均为207bp... 通过设计特异性引物MT-ⅢSP1和MT-ⅢSP2,采用RT-PCR方法分别从奶山羊和绒山羊脑组织中克隆出金属硫蛋白-Ⅲ(MT-Ⅲ)基因编码区全序列,并利用生物信息学方法分析山羊MT-Ⅲ的分子特性.结果表明:奶山羊和绒山羊MT-Ⅲ基因编码区全长均为207bp,编码68个氨基酸,其中含19个半胱氨酸,不含芳香族氨基酸和组氨酸;BLAST搜索结果表明,MT-Ⅲ编码氨基酸序列在物种间高度保守,含有MT-Ⅲ特有的MDPET、C-X-C、C-C-X-C-C、C-X-X-C、KKS(X为非Cys外的其它氨基酸)等保守的短肽结构;生物信息学分析表明,山羊MT-Ⅲ无明显疏水结构和跨膜结构域,无信号肽,是一种细胞质蛋白.山羊MT-Ⅲ蛋白质二级结构主要为不规则卷曲,仅在第40-50位氨基酸残基间有明显的螺旋结构;三级结构预测表明,山羊MT-Ⅲ的三级结构由α和β2个结构域组成,通过KKS连接,且MT-Ⅲ氨基酸序列中第30位保守的半胱氨酸在反刍动物中均突变成丝氨酸,位于β-结构域. 展开更多
关键词 山羊 金属蛋白- CDNA 分子特性
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金属硫蛋白-ⅢmRNA表达与神经元缺血性损伤的关系
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作者 周竹娟 郑健 +1 位作者 何英 赵士福 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期227-228,258,共3页
目的 :探讨大鼠前脑缺血 /再灌注后海马结构MT ⅢmRNA表达变化规律及其与神经元缺血性损伤之间的关系。方法 :建立前脑缺血 /再灌注模型 ,用原位杂交法检测海马结构MT ⅢmRNA表达 ,并观察缺血后各时相点海马神经元的病理变化。结果 :①... 目的 :探讨大鼠前脑缺血 /再灌注后海马结构MT ⅢmRNA表达变化规律及其与神经元缺血性损伤之间的关系。方法 :建立前脑缺血 /再灌注模型 ,用原位杂交法检测海马结构MT ⅢmRNA表达 ,并观察缺血后各时相点海马神经元的病理变化。结果 :①前脑缺血 /再灌注后 72h海马CA1区开始出现神经元变性 ,96h更为明显 ,7d时CA1区神经元多已坏死 ;②前脑缺血 /再灌注后海马CA1区锥体细胞和齿状回颗粒细胞内MT ⅢmRNA表达逐渐增加 ,96h达高峰 ,7d又降低至缺血前水平。结论 :前脑缺血 /再灌注后 ,海马神经元MT ⅢmRNA表达增加 。 展开更多
关键词 脑缺血 金属蛋白- 大鼠
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脑特异性金属硫蛋白Ⅲ研究进展 被引量:2
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作者 郑健 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期325-330,共6页
金属硫蛋白Ⅲ(MTⅢ)是富含半胱氨酸的低分子量蛋白,主要在脑内含Zn2+神经元表达,与脑的发育过程有关。MTⅢ可抑制体外培养的神经细胞生长和存活。MTⅢ与Zn2+的结合有相对特异性,可能影响依赖于Zn2+的一... 金属硫蛋白Ⅲ(MTⅢ)是富含半胱氨酸的低分子量蛋白,主要在脑内含Zn2+神经元表达,与脑的发育过程有关。MTⅢ可抑制体外培养的神经细胞生长和存活。MTⅢ与Zn2+的结合有相对特异性,可能影响依赖于Zn2+的一系列生物活动。AD患者脑内MTⅢ表达减少,敲除MTⅢ基因的小鼠对红藻氨酸诱发癫痫更敏感。 展开更多
关键词 金属蛋白 生长抑制因子 神经细胞
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