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铜绿假单胞菌亚胺培南及消毒剂耐药相关基因研究 被引量:14
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作者 黄支密 糜祖煌 +5 位作者 诸葛青云 秦玲 邹玉秀 熊春林 沈娟 王春新 《江西医学检验》 2005年第2期97-100,共4页
目的了解临床分离的对亚胺培南耐药铜绿假单胞菌中金属β内酰胺酶基因(blaIMP和blaVIM)、外膜孔蛋白D2(OprD2)基因(oprD)、消毒剂-磺胺耐药相关基因(qacE△1-sulⅠ)存在状况。方法采用ATBPSE5药敏试验条板微量肉汤法测定28株铜绿假单胞... 目的了解临床分离的对亚胺培南耐药铜绿假单胞菌中金属β内酰胺酶基因(blaIMP和blaVIM)、外膜孔蛋白D2(OprD2)基因(oprD)、消毒剂-磺胺耐药相关基因(qacE△1-sulⅠ)存在状况。方法采用ATBPSE5药敏试验条板微量肉汤法测定28株铜绿假单胞菌对14种抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应(PCR)技术及序列分析的方法检测耐药基因。结果该28株铜绿假单胞菌对亚胺培南、氨苄西林/舒巴坦、庆大霉素、妥布霉素和复方新诺明均完全耐药,对哌拉西林/他唑巴坦的敏感率最高为64.3%,其余的耐药率在57.1%~92.9%之间。28株Pa中blaIMP和blaVIM基因均阴性,25株(89.3%)oprD基因缺失,24株(85.7%)qacE△1-sulI基因阳性。结论浙江湖州解放军第98医院临床分离的对亚胺培南耐药铜绿假单胞菌多重耐药严重,oprD基因缺失是其对亚胺培南耐药的重要原因,qacE△1-sulⅠ基因携带率很高。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 亚胺培南 相关基因研究 消毒剂 聚合链反应(PCR) 金属β内酰胺酶基因 哌拉西林/他唑巴坦 氨苄西林/舒巴坦 耐药相关基因 blaIMP 临床分离 基因缺失 外膜孔蛋白 复方新诺明 基因携带率 耐药基因 序列分析
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金属β内酰胺酶基因及其检测方法 被引量:6
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作者 糜祖煌 《现代实用医学》 2004年第1期15-16,共2页
关键词 金属β内酰胺酶基因 检测方法 β内酰胺 抗生素 药物学
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臭鼻克雷伯和鲍曼不动杆菌中检出NDM-1型金属β内酰胺酶基因 被引量:32
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作者 杨银梅 叶惠芬 +2 位作者 张伟红 陈惠玲 周小棉 《国际检验医学杂志》 CAS 2011年第13期1407-1409,共3页
目的调查对碳青霉烯类抗菌剂敏感性降低的肠杆菌和鲍曼不动杆菌中NDM-1型金属β内酰胺酶基因的存在情况。方法应用改良Hodge试验和EDTA协同试验对2007~2010年本院收集的对碳青霉烯类抗菌剂敏感性降低的肠杆菌和鲍曼不动杆菌进行碳青霉... 目的调查对碳青霉烯类抗菌剂敏感性降低的肠杆菌和鲍曼不动杆菌中NDM-1型金属β内酰胺酶基因的存在情况。方法应用改良Hodge试验和EDTA协同试验对2007~2010年本院收集的对碳青霉烯类抗菌剂敏感性降低的肠杆菌和鲍曼不动杆菌进行碳青霉烯酶筛选。PCR法扩增NDM-1基因,并对PCR扩增阳性产物进行DNA测序分析。对NDM-1基因阳性菌株用PCR方法检测armA和rmtB16S rRNA甲基化酶基因,VIM、SPM、IMP和KPC碳青霉烯酶基因以及Ⅰ类整合子。Etests法进行药敏试验。结果 70株肠杆菌中10株Hodge Test和EDTA协同试验阳性,55株鲍曼不动杆菌中6株EDTA协同试验阳性。其中1株臭鼻克雷伯和3株鲍曼不动杆菌PCR扩增出NDM-1型金属β内酰胺酶基因目的片段,经测序比对为NDM-1型基因。其中1株臭鼻克雷伯和1株鲍曼不动杆菌检测出armA型16S rRNA甲基化酶基因,1株鲍曼不动杆菌检测出2000 bp左右的Ⅰ类整合子,未检出除NDM-1型外的其他碳青霉烯酶基因。NDM-1基因阳性菌除对替加环素、多黏菌素B敏感外,对其他检测的抗菌剂均耐药。结论臭鼻克雷伯和鲍曼不动杆菌中存在NDM-1型金属β内酰胺酶基因,有的携带armA型16S rRNA甲基化酶基因和Ⅰ类整合子,为该地区首次报道。 展开更多
关键词 碳青霉烯 NDM-1型金属β内酰胺酶基因 抗药性 细菌 革兰氏阴性菌
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金属β内酰胺酶基因bla_(NDM)重组酶聚合酶扩增方法的建立 被引量:2
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作者 屠博文 赵莹 +6 位作者 黎俊宏 杜强 毛旭建 唐宏兵 吉俊敏 韩晓冬 王昆 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期99-103,108,共6页
目的建立一种基于重组酶聚合酶(recombinase polymerase amplification,RPA)扩增方法金属β内酰胺酶基因bla_(NDM)的快速检测方法,为广泛耐药菌基因类型的确定提供技术支持。方法遵照重组酶聚合酶扩增引物和探针设计原则,以bla_(NDM)基... 目的建立一种基于重组酶聚合酶(recombinase polymerase amplification,RPA)扩增方法金属β内酰胺酶基因bla_(NDM)的快速检测方法,为广泛耐药菌基因类型的确定提供技术支持。方法遵照重组酶聚合酶扩增引物和探针设计原则,以bla_(NDM)基因特异性序列为靶基因,设计相应的RPA扩增引物和探针。取梯度稀释已知拷贝数的DNA模板和致病菌核酸样品进行各扩增体系的RPA扩增实验,分析扩增体系的敏感性、特异性和重复性特征以便筛选和评价bla_(NDM)基因的RPA扩增体系。结果 3组扩增体系的引物和探针能够有效的扩增靶基因,检出限达到2×10~2copys/反应,与其他细菌样品无非特异性扩增反应,能够在2~7 min内实现靶基因有效扩增。结论建立了金属β内酰胺酶基因bla_(NDM)的重组酶聚合酶扩增体系,该反应迅速,检出限较低,具有较高的特异性,适用于耐药菌的现场检测。 展开更多
关键词 重组聚合扩增 金属β内酰胺酶基因blaNDM 现场检测技术 广泛耐药菌
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一株广泛耐药恶臭假单胞菌耐药机制研究 被引量:5
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作者 李军 邹明祥 +4 位作者 王海晨 胡咏梅 豆清娅 晏群 刘文恩 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2016年第1期1-5,共5页
目的研究一株临床分离广泛耐药恶臭假单胞菌(extensively drug resistant Pseudomonas putida,XDR-PP)的耐药机制,以期指导临床合理使用抗菌药物。方法采用VITEK-2compact全自动微生物分析系统对菌株进行鉴定及药敏试验;改良Hodge试验... 目的研究一株临床分离广泛耐药恶臭假单胞菌(extensively drug resistant Pseudomonas putida,XDR-PP)的耐药机制,以期指导临床合理使用抗菌药物。方法采用VITEK-2compact全自动微生物分析系统对菌株进行鉴定及药敏试验;改良Hodge试验初筛碳青霉烯酶;EDTA-亚胺培南协同试验和亚胺培南双纸片增效法初筛金属酶;PCR检测16SrRNA甲基化酶基因、金属β-内酰胺酶基因及可移动性遗传元件基因,产物测序,结果经BLAST软件比对分析。结果该菌株对所检测的抗菌药物均耐药。改良Hodge试验、EDTA-亚胺培南协同试验和亚胺培南双纸片增效法结果均为阳性。基因检测结果显示,金属β-内酰胺酶基因阳性的有blaVIM-2和blaIMP-4两种基因,16SrRNA甲基化酶基因阳性的有armA基因,13种可移动性遗传元件中,intI、tnpU和merA基因阳性,其余均为阴性。结论blaVIM-2、blaIMP-4、armA、intI、tnpU以及merA基因是导致其广泛耐药的重要机制。恶臭假单胞菌中同时检出blaVIM-2和blaIMP-4两种金属β-内酰胺酶基因及armA基因为国内首次报道。 展开更多
关键词 广泛耐药 恶臭假单胞菌 金属β-内酰胺酶基因 16SrRNA甲基化基因 可移动性遗传元件
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2013—2020年某医院耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌的临床分布、耐药性及金属β-内酰胺酶基因检测情况分析 被引量:4
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作者 梁修珍 杨晓琼 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1299-1304,共6页
目的回顾性分析2013—2020年重庆某医院耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌(CRPA)的临床分布、耐药性及金属β-内酰胺酶(MBL)常见基因型分布情况,为指导临床抗感染治疗提供可靠的依据。方法收集重庆某医院2013—2020年临床分离的非重复病原菌1281... 目的回顾性分析2013—2020年重庆某医院耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌(CRPA)的临床分布、耐药性及金属β-内酰胺酶(MBL)常见基因型分布情况,为指导临床抗感染治疗提供可靠的依据。方法收集重庆某医院2013—2020年临床分离的非重复病原菌12810株,所有菌株利用DL-96全自动细菌测定系统进行菌株鉴定和体外药敏试验,药敏结果参照CLSI-M100文件标准进行判读,利用WHONET 5.6软件对其中482株CRPA的临床分布和耐药特征进行统计分析,同时采用亚胺培南-EDTA双纸片协同法筛选金属酶表型阳性的菌株,再利用PCR法检测铜绿假单胞菌MBL常见基因型(bla_(IMP)、bla_(VIM)、bla_(SPM)、bla_(GIM)、bla_(SIM)和bla_(NDM))的分布情况。结果12810株病原菌中共检出铜绿假单胞菌2375株,其中CRPA 482株。482株CRPA中痰液占83.6%,肺泡灌洗液占7.5%,分泌物占2.1%,尿液占3.1%,血液占1.0%,其他样本占2.7%;患者年龄大部分集中在61~70岁,无20岁及以下患者;主要分布科室为呼吸内科、重症医学科和神经外科。体外药敏实验结果显示CRPA对临床常用抗菌药物的耐药率和敏感率均存在小幅度波动但基本维持稳定。PCR检测结果显示,MBL常见基因阳性98株(20.3%),其中bla_(IMP)型42株,bla_(VIM)型36株,bla_(SPM)型20株,未检测出其他基因型。结论2013—2020年我院分离的482株CRPA临床分布广泛,对临床上常用的抗菌药物的敏感率普遍较低,产MBL可能是引起铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的主要原因,临床应加强对产金属酶铜绿假单胞菌的检测和监控,制定合理有效的感染控制措施,合理使用广谱抗菌药物,最大限度阻止CRPA菌株的播散。 展开更多
关键词 耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌 临床分布 耐药性 金属β-内酰胺酶基因
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上海地区碳青霉烯耐药肠杆菌科细菌的分子生物学特性研究 被引量:2
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作者 高芬 陈涌 +4 位作者 庄源 陈洪友 罗嘉远 张曦 陈敏 《上海预防医学》 CAS 2021年第7期599-604,共6页
【目的】分析上海市腹泻患者肠道碳青霉烯耐药肠杆菌科细菌(CRE)的耐药特征和分子分型,为该耐药菌的监测及防控提供依据。【方法】收集上海市腹泻病监测系统23家哨点医院2018年1月—2019年12月肠道门诊患者的粪便或肛拭子样本800份,采用... 【目的】分析上海市腹泻患者肠道碳青霉烯耐药肠杆菌科细菌(CRE)的耐药特征和分子分型,为该耐药菌的监测及防控提供依据。【方法】收集上海市腹泻病监测系统23家哨点医院2018年1月—2019年12月肠道门诊患者的粪便或肛拭子样本800份,采用含1μg/μL美罗培南的麦康凯琼脂培养基分离CRE菌株。使用VITEK-2 Compact全自动细菌鉴定系统和VITEK MS质谱系统进行菌种鉴定。采用微量肉汤稀释法检测菌株的最小抑菌浓度(MIC)。采用多位点序列分型(MLST)及脉冲场凝胶电泳(PFGE)对耐药菌株进行同源性分析。通过接合实验研究耐药基因的可转移性。采用全基因组测序进行耐药分子特征研究。【结果】从800份粪便或肛拭子标本中分离出7株CRE菌株,皆为产新德里金属β-内酰胺酶(NDM)的多重耐药大肠埃希菌,对多种临床常用的抗生素均耐药。分子分型结果显示,CRE菌株序列型别均不相同,PFGE呈现多样性。bla_(NDM)基因均为阳性,包括bla_(NDM-5)和bla_(NDM-13),主要型别为blaNDM-5,并可通过接合转移至大肠埃希菌EC600。【结论】肠道分离碳青霉烯耐药菌株均为多重耐药大肠埃希菌,其耐药机制均为产NDM,同时携带bla_(NDM)及其他多种耐药基因。MLST显示菌株属于不同的克隆型。耐药基因可通过接合转移实现耐药基因的水平转移。 展开更多
关键词 碳青霉烯 肠杆菌科 大肠埃希菌 金属β-内酰胺酶基因
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临床分离革兰阴性菌金属β-内酰胺酶基因检测及其同源性分析
8
作者 赵亚楠 郭育奇 +4 位作者 黄红兰 武晓琳 韦珍 孙超 赵春燕 《中国感染控制杂志》 CAS 北大核心 2015年第3期145-148,共4页
目的:了解临床分离革兰阴性菌产 IMP 及VIM 金属β-内酰胺酶(MβLs)基因的检出情况,以及对β-内酰胺类抗生素的耐药状况。方法采用 K-B 法对临床分离的113株细菌进行药物敏感试验,采用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因 IMP 和 VIM... 目的:了解临床分离革兰阴性菌产 IMP 及VIM 金属β-内酰胺酶(MβLs)基因的检出情况,以及对β-内酰胺类抗生素的耐药状况。方法采用 K-B 法对临床分离的113株细菌进行药物敏感试验,采用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因 IMP 和 VIM ,测序并进行 BLAST 比对分析。结果1株荧光假单胞菌检出 VIM 基因;15株菌中检出 IMP 基因,其中肺炎克雷伯菌6株,鲍曼不动杆菌 3株,大肠埃希菌2株,罗尔斯顿菌、铜绿假单胞菌、无丙二酸柠檬酸杆菌、阴沟肠杆菌各1株。BLAST 结果显示,VIM 基因为VIM-2型,与基因库中序列相似度99%;IMP 基因均为 IMP-1亚型,相似度在98%~99%,高度同源。IMP 阳性菌株对头孢曲松、头孢噻肟、头孢西丁、氨曲南和亚胺培南的耐药率高于阴性菌株,差异均具有统计学意义(均 P <0.05)。结论不同菌株 IMP 基因高度同源,均为 IMP-1型,表明 IMP 基因的传播能力很强,可以突破种属的限制在不同细菌中传播。IMP 基因与细菌对β-内酰胺类抗生素耐药相关。 展开更多
关键词 革兰阴性菌 金属β-内酰胺酶基因 IMP VIM 多重耐药性 抗药性 微生物 医院感染
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苏北及周边地区水禽致病性大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析 被引量:8
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作者 胡紫萌 王卓昊 +6 位作者 吴坤 徐正军 魏丹 郭庚霖 李敏 董永毅 张炜 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期439-444,共6页
为研究近年来禽致病性大肠杆菌(APEC)的耐药性,本研究室于2018年~2019年对江苏北部及周边地区228份水禽组织病料样品(鸭头、鸭肝样品;鹅头、鹅肝样品)进行了细菌分离培养和APEC的PCR鉴定。对分离到的APEC菌株采用K-B纸片法进行药敏试验... 为研究近年来禽致病性大肠杆菌(APEC)的耐药性,本研究室于2018年~2019年对江苏北部及周边地区228份水禽组织病料样品(鸭头、鸭肝样品;鹅头、鹅肝样品)进行了细菌分离培养和APEC的PCR鉴定。对分离到的APEC菌株采用K-B纸片法进行药敏试验;同时对其碳青霉烯类、β-内酰胺类、氨基糖苷类、磺胺类、粘菌素类、喹诺酮类、四环素类7大类共计16种耐药基因进行了PCR检测。结果显示,在分离到的细菌中,共鉴定出50株APEC菌株。药敏试验结果显示,APEC分离菌株对四环素、氨苄西林、氟苯尼考耐药性较强,耐药菌株分别占100%、96%、86%;对头孢噻肟、恩诺沙星、链霉素、氧氟沙星中等耐药,耐药菌株分别占76%、70%、58%、36%;对美罗培南、呋喃妥因、丁胺卡那霉素的耐药性较低,耐药菌株仅分别占4%、4%、6%。其中多重耐药性较严重,耐4、5、6、7种抗生素的现象较普遍。在对其β-内酰胺类的耐药基因检测中,CTX-M、TEM、SHV的检出率分别为60%、58%、20%;氨基糖苷类:ant(3’’)-I a、aac(3’)-I b的检出率分别为0,50%(25/50);磺胺类sul I的检出率为82%(41/50);粘菌素类mcr-1的检出率为6%(3/50);喹诺酮类:qnrB、parC的检出率分别为68%(34/50)、98%(49/50);四环素类:tetA、tetB的检出率分别为66%(33/50)、10%(5/50)。值得注意的是,从50株APEC分离菌中,鉴定出3株携带粘菌素类耐药基因mcr-1和2株携带碳青霉烯类耐药基因NDM的APEC,进一步经改良Hoge试验检测该2株菌均产碳青霉烯酶。表明这两株菌均耐美罗培南等碳青霉烯类抗生素,也进一步表明分离的APEC耐药情况的严重性。本研究为养禽场相关疫病的用药提供了参考依据。 展开更多
关键词 APEC 耐药性 耐药基因 碳青霉烯 新德里金属β-内酰胺酶基因(NDM)
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阴沟肠杆菌耐药性分析及NDM-1基因检测 被引量:12
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作者 刘鹏飞 陈佑明 +2 位作者 孙恒彪 马晓霞 张婧 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第21期5204-5206,共3页
目的探讨阴沟肠杆菌的耐药性以及对亚胺培南耐药菌株进行新德里金属β-内酰胺酶1型(NDM-1)基因检测分析,为临床治疗阴沟肠杆菌感染合理用药提供试验依据。方法试验菌株分离自2011年7月-2012年6月的临床标本,采用西门子Microscan Walkway... 目的探讨阴沟肠杆菌的耐药性以及对亚胺培南耐药菌株进行新德里金属β-内酰胺酶1型(NDM-1)基因检测分析,为临床治疗阴沟肠杆菌感染合理用药提供试验依据。方法试验菌株分离自2011年7月-2012年6月的临床标本,采用西门子Microscan Walkway 40plus全自动微生物分析系统对菌株进行鉴定及药敏检测,应用WHONET5.4对数据进行分析统计;聚合酶链反应(PCR)特异性扩增NDM-1基因,并对扩增产物进行测序和BLAST分析。结果共分离得到35株阴沟肠杆菌,对亚胺培南敏感性最高,敏感率为91.4%,但也出现3株耐药菌株,其次为阿米卡星;对第一代头孢菌素头孢唑林及广谱青霉素的耐药率>90.0%,对其他抗菌药耐药率>40.0%;3株亚胺培南耐药菌株NDM-1检测均为阳性,且同源性为100.0%。结论多药耐药阴沟肠杆菌及产NDM-1阴沟肠杆菌的出现,造成耐药形势日益严峻,需要加强监测力度。 展开更多
关键词 阴沟肠杆菌 金属β-内酰胺酶1型基因 耐药
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清开灵注射液提取物及清开灵注射液与抗生素联合对含blaNDM-1超级细菌的抑菌效果 被引量:6
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作者 尚伟 王雪松 +3 位作者 邹大阳 张状年 廖祥儒 袁静 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期506-509,共4页
目的体外初步研究清开灵注射液主成分提取液和清开灵注射液与抗生素联合用药分别对含产新德里金属β-内酰胺酶-1(New Delhi metallo-β-lactamase1,NDM-1)基因的耐药细菌(blaNDM-1细菌)的抑菌性。方法采用琼脂稀释法和K-B法对清开灵注... 目的体外初步研究清开灵注射液主成分提取液和清开灵注射液与抗生素联合用药分别对含产新德里金属β-内酰胺酶-1(New Delhi metallo-β-lactamase1,NDM-1)基因的耐药细菌(blaNDM-1细菌)的抑菌性。方法采用琼脂稀释法和K-B法对清开灵注射液主成分板蓝根、金银花、栀子、黄芩苷4种药物提取液和清开灵注射液与抗生素联合用药分别对耐药超级细菌进行抑菌实验。并测定各提取液的最小抑菌浓度(MIC)值。结果清开灵主成分提取液对含blaNDM-1基因的耐药细菌均有不同程度的抑制效果,其中以黄芩苷为最好,对含blaNDM-1基因的耐药菌不动杆菌属/乙酸钙不动杆菌(WD)、鲍曼不动杆菌(WX)、嗜麦芽寡养单胞菌(WJ)和大肠杆菌pGEX-4T-NDM-1/DH5α(GST-NDM-1)的MIC分别为0.015、0.020、0.005、>0.020g/mL,而各提取液的MIC值的大小依次为黄芩苷、金银花、栀子、板蓝根;清开灵注射液与抗生素联合用药后,对含blaNDM-1基因多重耐药菌的抑菌效果非常明显,大大提高了各类抗生素单独用药的抑菌能力,其中以与青霉素类(青霉素G、美洛西林、哌拉西林/他唑巴坦、氨苄西林/舒巴坦)效果最好,抑菌效果提高10倍左右,其他抗生素类药物抑菌效果都有不同程度的提高。结论清开灵注射液主成分提取液和清开灵注射液与抗生素联合用药对含blaNDM-1耐药基因细菌都有很好的抑菌效果,此研究为药物开发及对blaNDM-1超级耐药细菌的用药和治疗提供了理论依据。 展开更多
关键词 清开灵注射液提取物 抑菌效果 超级耐药细菌 新德里金属β-内酰胺酶-1基因 最小抑菌浓度
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NDM1基因常规PCR与荧光定量PCR检测方法的建立及其检测结果比较 被引量:1
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作者 陈宣男 全首祯 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期625-629,F0003,共6页
目的:建立NDM1基因常规PCR和荧光定量PCR(FQ-PCR)检测方法,并对其检测结果进行比较。方法:设计3对NDM1基因常规PCR与FQ-PCR引物,建立常规PCR与FQ-PCR反应体系和条件,比较2种检测方法的特异性、灵敏度和对模拟临床样品的检测效果。结果:... 目的:建立NDM1基因常规PCR和荧光定量PCR(FQ-PCR)检测方法,并对其检测结果进行比较。方法:设计3对NDM1基因常规PCR与FQ-PCR引物,建立常规PCR与FQ-PCR反应体系和条件,比较2种检测方法的特异性、灵敏度和对模拟临床样品的检测效果。结果:成功建立NDM1基因常规PCR和FQ-PCR检测方法;特异性检测,常规PCR与FQ-PCR检测7种常见病原菌均为阴性;灵敏度检测,常规PCR检测限为106 mL-1,FQ-PCR检测限为104 mL-1;模拟临床样品检测,常规PCR和FQ-PCR检测结果一致。结论:常规PCR与FQ-PCR均有很好的特异性,FQ-PCR灵敏度比常规PCR高100倍。 展开更多
关键词 新德里金属-β-内酰胺酶1基因 常规PCR 荧光定量PCR
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海南分离出一株产新德里金属β-内酰胺酶-1基因的产气肠杆菌 被引量:1
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作者 李天娇 张强 +3 位作者 符生苗 王旭明 黄涛 符惠群 《中华临床实验室管理电子杂志》 2015年第2期109-112,共4页
目的分离与鉴定海南地区临床发现的耐碳青酶烯类药物的产气肠杆菌是否携带新德里金属β-内酰胺酶-1(New Delhi metallo-beta-lactamas-1,NDM-1)基因。方法用法国梅里埃API 20E生化鉴定条和VITEK2全自动细菌鉴定仪及其配套CNS试剂,鉴定... 目的分离与鉴定海南地区临床发现的耐碳青酶烯类药物的产气肠杆菌是否携带新德里金属β-内酰胺酶-1(New Delhi metallo-beta-lactamas-1,NDM-1)基因。方法用法国梅里埃API 20E生化鉴定条和VITEK2全自动细菌鉴定仪及其配套CNS试剂,鉴定出临床耐亚胺培南和美洛培南的产气肠杆菌,并用亚胺培南/亚胺培南+EDTA纸片法协同试验测定产金属酶类碳青霉烯酶;然后,对目的菌株进行NDM-1耐药基因聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)特异性扩增后,将扩增产物行琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定及BLAST比对,以确定其NDM-1基因。结果采用亚胺培南/亚胺培南+EDTA纸片法协同试验,从10株耐亚胺培南或美洛培南的产气肠杆菌中,检出4株金属类碳青霉烯酶表型阳性菌株。对其中4株金属酶表型阳性的产气肠杆菌进行NDM-1基因PCR扩增后,对其产物进行琼脂糖凝胶电泳和测序分析,确认1株为携带NDM-1的耐药基因菌株。结论海南发现1株携带bla NDM-1基因的产气肠杆菌。 展开更多
关键词 耐碳青烯类抗生素 新德里金属β-内酰胺酶-1基因 产气肠杆菌
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