冬虫夏草化学成分分析 被引量：72

1

作者 钱正明 李文庆 +3 位作者 孙敏甜 刘杏忠 李二伟 李文佳 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期476-490,共15页

本研究建立了冬虫夏草中7类主要化学成分的分析方法,包括采用高效液相色谱法分析冬虫夏草中的多糖、糖醇、氨基酸和核苷,采用气相色谱法分析冬虫夏草中的甾醇、脂肪酸和挥发性成分,所建立的分析方法均成功运用于冬虫夏草样本分析。从冬... 本研究建立了冬虫夏草中7类主要化学成分的分析方法,包括采用高效液相色谱法分析冬虫夏草中的多糖、糖醇、氨基酸和核苷,采用气相色谱法分析冬虫夏草中的甾醇、脂肪酸和挥发性成分,所建立的分析方法均成功运用于冬虫夏草样本分析。从冬虫夏草样本中鉴定了61个小分子化合物(2个糖醇、16个氨基酸、9个核苷、7个甾醇、18个脂肪酸、9个挥发性成分);在对其多糖分析中发现其分子量主要分布于3.3–1 300k Da范围内,由3个主要色谱峰组成。同时,还比较分析了培植冬虫夏草和野生冬虫夏草的化学成分,结果显示两者小分子化合物种类一致,多糖分子量分布一致。 展开更多

关键词 化学成分 野生冬虫夏草 培植冬虫夏草 高效液相色谱 气相色谱

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冬虫夏草人工繁育品和野生冬虫夏草中5种重金属及有害元素含量的比较 被引量：25

2

作者 刘杰 李耀磊 +6 位作者 昝珂 郑健 过立农 马双成 金红宇 钱正明 李文佳 《中国药事》 CAS 2016年第9期912-918,共7页

目的:比较冬虫夏草人工繁育品和野生冬虫夏草中5种重金属及有害元素(铅、镉、砷、汞、铜)的含量。方法:采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定冬虫夏草人工繁育品和野生冬虫夏草中5种重金属及有害元素(铅、镉、砷、汞、铜)的含量,并... 目的:比较冬虫夏草人工繁育品和野生冬虫夏草中5种重金属及有害元素(铅、镉、砷、汞、铜)的含量。方法:采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定冬虫夏草人工繁育品和野生冬虫夏草中5种重金属及有害元素(铅、镉、砷、汞、铜)的含量,并对得到的两组数据进行独立样本t检验。结果:冬虫夏草人工繁育品中铅(Pd)、砷(As)、铜(Cu)的含量低于野生冬虫夏草中的含量,且差异极显著;冬虫夏草人工繁育品中镉(Cd)的含量与野生冬虫夏草差异不显著。结论:冬虫夏草人工繁育品的铅(Pb)、镉(Cd)、砷(As)、汞(Hg)、铜(Cu)含量均符合国际标准,相对于野生冬虫夏草大多存在的砷超标现象,其安全性更容易控制。在冬虫夏草人工繁育品和野生冬虫夏草中,Hg均难以达到检测限。 展开更多

关键词 冬虫夏草人工繁育品 野生冬虫夏草 重金属及有害元素 含量测定

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冬虫夏草蛋白图谱及干燥条件对超氧化物歧化酶活性影响 被引量：19

3

作者 钱正明 李春红 +4 位作者 李文庆 刘铸 田野 刘杏忠 董彩虹 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期424-432,共9页

本文采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和双向电泳(2-DE)技术对3个野生冬虫夏草样本和3个培植冬虫夏草样本进行了比较分析。SDS-PAGE结果显示6个样品的蛋白质分子量主要分布在3–66.4k Da之间,Quantity one软件处理凝胶... 本文采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和双向电泳(2-DE)技术对3个野生冬虫夏草样本和3个培植冬虫夏草样本进行了比较分析。SDS-PAGE结果显示6个样品的蛋白质分子量主要分布在3–66.4k Da之间,Quantity one软件处理凝胶图谱显示蛋白条带在20–23条之间;采用PDQuest软件对双向电泳图谱处理,共检测到670–936个蛋白点,蛋白质主要分布在等电点为p I 4.5–6、分子量为29.0–66.7k Da和14.3–20.1k Da两个区域。尽管在不同样品之间存在一定程度的蛋白质差异,但是并没有发现野生冬虫夏草和培植冬虫夏草之间有显著差异。以超氧化物歧化酶(SOD)活力为评价指标对新鲜冬虫夏草以及冷冻干燥、20℃阴干和60℃烘干冬虫夏草样品进行比较,发现新鲜冬虫夏草SOD活力最高,冷冻干燥对冬虫夏草SOD活力的影响小于20℃阴干干燥,60℃烘干干燥对冬虫夏草SOD活力破坏最大,结果表明干燥条件对冬虫夏草SOD活性极其重要。 展开更多

关键词 野生冬虫夏草 培植冬虫夏草 凝胶电泳 双向电泳 干燥条件

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一测多评法同时测定冬虫夏草中5个核苷类成分的含量 被引量：19

4

作者 昝珂 崔淦 +5 位作者 过立农 刘杰 郑健 马双成 钱正明 李文佳 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期630-635,共6页

目的:建立一测多评法同时测定冬虫夏草中尿苷、肌苷、鸟苷、腺苷、2′-脱氧腺苷含量,并验证方法准确性。方法:采用RP-HPLC进行含量测定,使用Agilent ZOBAX SB-AQ C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-水(B)为流动相,梯度洗... 目的:建立一测多评法同时测定冬虫夏草中尿苷、肌苷、鸟苷、腺苷、2′-脱氧腺苷含量,并验证方法准确性。方法:采用RP-HPLC进行含量测定,使用Agilent ZOBAX SB-AQ C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱(0~5 min,0%A;5~15 min,0%A→10%A;15~30 min,10%A),流速1.0 m L·min^(-1),柱温30℃,检测波长260 nm,进样量5μL。以腺苷为参照物,建立其对尿苷、肌苷、鸟苷、2′-脱氧腺苷的相对校正因子,并用该校正因子进行尿苷、肌苷、鸟苷、2′-脱氧腺苷的含量计算,实现一测多评;同时采用外标法测定冬虫夏草中5个核苷的含量,并比较计算值与实测值的差异,以验证一测多评法的准确性和可行性。结果:尿苷、肌苷、鸟苷、腺苷、2′-脱氧腺苷进样量分别在4.945~98.90、1.852~37.04、4.795~95.90、5.175~103.5和1.892~37.84μg·m L-1范围内呈现良好线性关系;平均加样回收率(n=6)分别为98.3%(RSD=1.6%)、101.3%(RSD=1.3%)、100.6%(RSD=1.1%)、98.8%(RSD=1.4%)和101.1%(RSD=1.7%)。尿苷、肌苷、鸟苷、2′-脱氧腺苷相对于腺苷的相对校正因子分别为1.41、1.90、1.74和0.964;且在不同实验条件下重现性良好(RSD<3.0%);一测多评法的计算结果与外标法实测值之间无显著差异。20批冬虫夏草中尿苷、肌苷、鸟苷、腺苷和2′-脱氧腺苷的含量范围分别为0.101%~0.210%、0.037%~0.135%、0.066%~0.203%、0.015%~0.102%和0.001 8%~0.013%。结论:建立的一测多评法可作为冬虫夏草中5个核苷类化学成分的含量测定方法。 展开更多

关键词 一测多评(QAMS) 校正因子 冬虫夏草人工繁育品 野生冬虫夏草 核苷 尿苷、肌苷、鸟苷、腺苷、2′-脱氧腺苷

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冬虫夏草繁育品和野生品虫草酸含量比较 被引量：18

5

作者 李文庆 李文佳 +2 位作者 董彩虹 周建桥 钱正明 《菌物研究》 CAS 2018年第2期102-105,共4页

为了建立冬虫夏草中虫草酸含量的检测方法,比较冬虫夏草繁育品和野生冬虫夏草中的虫草酸含量,文中采用超声水提法研究了料液比和提取时间对虫草酸含量的影响,筛选出料液比为1∶50、提取时间为5 min时可高效提取冬虫夏草样品中的虫草酸... 为了建立冬虫夏草中虫草酸含量的检测方法,比较冬虫夏草繁育品和野生冬虫夏草中的虫草酸含量,文中采用超声水提法研究了料液比和提取时间对虫草酸含量的影响,筛选出料液比为1∶50、提取时间为5 min时可高效提取冬虫夏草样品中的虫草酸。检测方法经方法学考察,专属性、重复性、准确度、稳定性均符合要求;21批冬虫夏草繁育品样本中的虫草酸含量为9.04%~14.14%;21批野生冬虫夏草虫草酸含量为6.16%~13.94%。通过t检验统计分析显示,冬虫夏草繁育品和野生冬虫夏草的虫草酸含量差异不显著,具有良好一致性。 展开更多

关键词 冬虫夏草繁育品 野生冬虫夏草 虫草酸 高效液相色谱

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冬虫夏草人工繁育品与野生品基于甾醇特征图谱的比较研究 被引量：16

6

作者 过立农 张美 +5 位作者 刘杰 马双成 钱正明 李文佳 昝珂 郑健 《中国药事》 CAS 2017年第8期951-959,共9页

目的:对冬虫夏草人工繁育品与野生品进行比较研究,建立基于甾醇类成分的特征图谱,并比较麦角甾醇含量的差异,为该药材的质量监管提供参考。方法:以10批冬虫夏草人工繁育品、17批野生品以及5批凉山虫草为研究对象,采用超高效液相色谱法,... 目的:对冬虫夏草人工繁育品与野生品进行比较研究,建立基于甾醇类成分的特征图谱,并比较麦角甾醇含量的差异,为该药材的质量监管提供参考。方法:以10批冬虫夏草人工繁育品、17批野生品以及5批凉山虫草为研究对象,采用超高效液相色谱法,以麦角甾醇为对照品,选用XBridge C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.6μm);流动相为甲醇-水(95∶5),检测波长282 nm,流速0.3 m L·min^(-1),柱温30℃,采用CHEMPATTERN化学计量学软件对野生品色谱图进行处理,生成特征图谱,并计算所有批次的相似度。结果:17批野生冬虫夏草、10批冬虫夏草人工繁育品与野生品对照图谱之间的相似度均大于0.9,相似度良好;而5批凉山虫草相似度均未超过0.8,相似度较低。10批人工繁育品的平均含量为0.121%±0.031%;17批野生品的平均含量为0.115%±0.045%;5批凉山虫草的平均含量为0.468%±0.038%。冬虫夏草人工繁育品和野生品基于甾醇的特征图谱以及麦角甾醇含量基本一致;与凉山虫草有显著性差异。结论:本研究有助于冬虫夏草的真伪鉴别,同时为冬虫夏草人工繁育资源开发以及合理使用提供科学依据。 展开更多

关键词 冬虫夏草繁育品 野生冬虫夏草 凉山虫草 特征图谱 甾醇 麦角甾醇 含量比较 中药材资源开发

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冬虫夏草人工繁育品与野生冬虫夏草中腺苷含量的比较研究 被引量：15

7

作者 昝珂 苏蕊 +5 位作者 刘杰 郑健 过立农 马双成 钱正明 李文佳 《中国药事》 CAS 2016年第6期598-603,共6页

目的:采用反相高效液相色谱法测定冬虫夏草人工繁育品与野生冬虫夏草中腺苷的含量。方法:采用T3色谱柱(250 mm×4.6 mm;5μm),以磷酸盐缓冲液(p H 6.5)-甲醇(85︰15)为流动相,流速为1.0 m L·min^(-1),检测波长260 nm,进样量5... 目的:采用反相高效液相色谱法测定冬虫夏草人工繁育品与野生冬虫夏草中腺苷的含量。方法:采用T3色谱柱(250 mm×4.6 mm;5μm),以磷酸盐缓冲液(p H 6.5)-甲醇(85︰15)为流动相,流速为1.0 m L·min^(-1),检测波长260 nm,进样量5μL;柱温25℃。结果:20批人工繁育品的平均含量为0.050%±0.013%,26批野生品的平均含量为0.043%±0.022%。所有批次的腺苷含量测定结果均大于0.010%,符合《中国药典》2015年版的规定。结论:采用t检验(P>0.05)分析,冬虫夏草人工繁育品中腺苷的含量和野生品之间无显著性差异。 展开更多

关键词 冬虫夏草人工繁育品 野生冬虫夏草 腺苷 含量测定

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野生及人工繁育冬虫夏草对肾阳虚小鼠补肾作用的对比研究 被引量：10

8

作者 郑健 霍晓奎 +7 位作者 王妍 过立农 刘杰 昝珂 马骁驰 马双成 钱正明 李文佳 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第22期1908-1912,共5页

目的观察野生冬虫夏草和冬虫夏草人工繁育品对肾阳虚小鼠的补肾作用,并比较野生及人工繁育冬虫夏草药理作用的差异。方法建立氢化可的松诱导的肾阳虚小鼠模型,灌胃给予2种冬虫夏草(低、高剂量),观察各组小鼠体重、负重游泳能力、性腺器... 目的观察野生冬虫夏草和冬虫夏草人工繁育品对肾阳虚小鼠的补肾作用,并比较野生及人工繁育冬虫夏草药理作用的差异。方法建立氢化可的松诱导的肾阳虚小鼠模型,灌胃给予2种冬虫夏草(低、高剂量),观察各组小鼠体重、负重游泳能力、性腺器官及免疫器官脏器指数、肾脏和睾丸组织形态等指标。结果野生冬虫夏草和冬虫夏草人工繁育品可改善氢化可的松所致肾阳虚小鼠体重增加变慢,负重游泳时间缩短,机体抗氧化能力下降,胸腺、脾、储精囊、包皮腺等腺体指数下降,肾脏和睾丸组织形态出现病理性改变的现象。结论野生冬虫夏草和冬虫夏草人工繁育品均具有显著的逆转氢化可所致小鼠肾阳虚的活性,具有一定的临床应用指导意义。 展开更多

关键词 野生冬虫夏草 肾阳虚 补肾作用 人工繁育冬虫夏草

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冬虫夏草人工繁育品与野生冬虫夏草DNA条形码比较研究 被引量：6

9

作者 过立农 刘杰 +5 位作者 袁航 昝珂 郑健 马双成 钱正明 李文佳 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期147-155,共9页

目的:从分子生物学的角度比较分析冬虫夏草人工繁育品和野生冬虫夏草的核糖体DNA内部转录间隔区(ITS)和细胞色素C氧化酶亚基1(COⅠ)条形码序列,并验证冬虫夏草人工繁育品与野生冬虫夏草虫和菌的来源是否符合《中华人民共和国药典》规定... 目的:从分子生物学的角度比较分析冬虫夏草人工繁育品和野生冬虫夏草的核糖体DNA内部转录间隔区(ITS)和细胞色素C氧化酶亚基1(COⅠ)条形码序列,并验证冬虫夏草人工繁育品与野生冬虫夏草虫和菌的来源是否符合《中华人民共和国药典》规定。方法:通过聚合酶链式反应(PCR)对冬虫夏草人工繁育品和野生冬虫夏草的ITS和COⅠ序列进行扩增,利用邻接法比较冬虫夏草人工繁育品与野生冬虫夏草的亲缘关系;通过与GenBank数据库进行Blast比对,确定冬虫夏草虫与菌的科属。结果:冬虫夏草人工繁育品与野生冬虫夏草ITS和COⅠ序列的电泳结果均显示为明亮单一条带,且条带大小介于500 bp和750 bp之间;COⅠ序列的系统树结果中冬虫夏草人工繁育品和野生冬虫夏草除野生冬虫夏草-18、野生冬虫夏草-20这2个样品均各自聚为一支,且支持率为99%,呈现良好的单系性,ITS序列的系统树结果中冬虫夏草人工繁育品和野生冬虫夏草混聚在一起,没有明确的分支;冬虫夏草人工繁育品的COⅠ序列经GenBank数据库比对结果均为小金蝠蛾(Hepialus xiaojinensis),为蝙蝠蛾科Hepialidae sp.昆虫,野生冬虫夏草的COⅠ序列经GenBank数据库比对结果均为蝙蝠蛾科Hepialidae sp.昆虫,其中野生冬虫夏草-8为人支蝠蛾(Thitarodes renzhiensis),野生冬虫夏草-12为贡嘎蝠蛾(Thitarodes gonggaensis),冬虫夏草人工繁育品及野生冬虫夏草的ITS序列与GenBank数据库比对后,相似度达99%以上,比对结果显示20批冬虫夏草人工繁育品和26批野生冬虫夏草的虫菌均为冬虫夏草菌(Ophiocordyceps sinensis)。Ophiocordyceps sinensis和Cordyceps sinensis为同物异名。结论:20批冬虫夏草人工繁育品的虫体及虫菌来源与26批野生冬虫夏草的虫体及虫菌来源均符合《中华人民共和国药典》2015年版中的描述:冬虫夏草为麦角菌科真菌冬虫夏草菌Cordyceps sinensis(Berk.)Sacc.寄生在蝙� 展开更多

关键词 野生冬虫夏草 冬虫夏草人工繁育品 内部转录间隔区(ITS) 细胞色素C氧化酶亚基1(CO Ⅰ) 聚合酶链式反应(PCR) DNA条形码

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野生与人工冬虫夏草伴生菌及栖息地土壤微生物群落多样性比较研究 被引量：5

10

作者 杨晶艳 童芯锌 +3 位作者 何成艳 白静 王芳 国锦琳 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期3106-3115,共10页

为探究野生和人工冬虫夏草伴生菌及其周际土壤的微生物群落多样性的差异,该研究选取野生和人工繁育冬虫夏草及其周际土壤样本,采用16S rRNA V3V4和ITS1高通量测序技术进行细菌和真菌群落进行分析。研究发现,野生和人工冬虫夏草优势细菌... 为探究野生和人工冬虫夏草伴生菌及其周际土壤的微生物群落多样性的差异,该研究选取野生和人工繁育冬虫夏草及其周际土壤样本,采用16S rRNA V3V4和ITS1高通量测序技术进行细菌和真菌群落进行分析。研究发现,野生和人工冬虫夏草优势细菌主要是变形菌门,而土壤环境中的主要优势菌是放线菌门,冬虫夏草菌属真菌是冬虫夏草子座的绝对优势真菌。α多样性分析显示子座的真菌多样性较其他部位低,且野生冬虫夏草子座的真菌多样性低于人工繁育冬虫夏草。β多样性分析显示土壤微生境样品与冬虫夏草的微生物群落存在明显差异,而野生和人工冬虫夏草伴生菌尤其是真菌差异相对较小,且菌核的真菌菌落构成比较相似。LEfSe分析显示野生和人工冬虫夏草存在丰富的差异微生物物种。上述结果表明冬虫夏草菌是野生和人工冬虫夏草的优势微生物,与周际土壤微生物群落差异显著,野生和人工冬虫夏草伴生菌真菌表现出的差异较细菌小,这些差异物种将为深入研究冬虫夏草在不同生境中发育的差异,以及成分表达差异的研究提供新思路和理论基础。 展开更多

关键词 野生冬虫夏草 人工冬虫夏草 细菌群落 真菌群落 高通量测序

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冬虫夏草人工繁育品、野生品及亚香棒虫草中氨基酸比较 被引量：5

11

作者 昝珂 过立农 +3 位作者 钱正明 李文佳 郑健 马双成 《中国药事》 CAS 2018年第5期611-619,共9页

目的:比较冬虫夏草人工繁育品、野生品与亚香棒虫草中水解和游离氨基酸的含量。方法:采用氨基酸分析仪测定冬虫夏草人工繁育品、野生品以及亚香棒虫草中17种氨基酸的含量。结果:冬虫夏草人工繁育品的水解氨基酸含量为16.776%~19.080%,... 目的:比较冬虫夏草人工繁育品、野生品与亚香棒虫草中水解和游离氨基酸的含量。方法:采用氨基酸分析仪测定冬虫夏草人工繁育品、野生品以及亚香棒虫草中17种氨基酸的含量。结果:冬虫夏草人工繁育品的水解氨基酸含量为16.776%~19.080%,野生冬虫夏草为14.857%~21.959%,亚香棒虫草为13.043%~14.933%。冬虫夏草人工繁育品的游离氨基酸含量为1.767%~2.373%,野生冬虫夏草为1.753%~2.521%,亚香棒虫草为2.856%~3.197%。结论:冬虫夏草人工繁育品和野生品中氨基酸含量基本一致,和亚香棒虫草有显著性差异。本研究为冬虫夏草的鉴别及人工繁育品的进一步开发利用提供科学依据。 展开更多

关键词 冬虫夏草人工繁育品 野生冬虫夏草 亚香棒虫草 水解氨基酸 游离氨基酸

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野生冬虫夏草与人工冬虫夏草蛋白质组差异研究 被引量：4

12

作者 王艺璇 王芳 +4 位作者 张涵 童芯锌 陈璐 彭成 国锦琳 《中药与临床》 2018年第4期5-8,共4页

目的:揭示野生冬虫夏草与人工培育冬虫夏草蛋白组的差异,为从蛋白质水平评价人工冬虫夏草奠定基础。方法:应用双向电泳技术(2-DE)对野生冬虫夏草完全体、菌虫复合体、子座及人工冬虫夏草完全体、菌虫复合体、子座的蛋白质组进行对比分析... 目的:揭示野生冬虫夏草与人工培育冬虫夏草蛋白组的差异,为从蛋白质水平评价人工冬虫夏草奠定基础。方法:应用双向电泳技术(2-DE)对野生冬虫夏草完全体、菌虫复合体、子座及人工冬虫夏草完全体、菌虫复合体、子座的蛋白质组进行对比分析,筛选出野生冬虫夏草与人工冬虫夏草差异性蛋白质。结果:野生冬虫夏草及其菌虫复合体、子座虽然与人工冬虫夏草2-DE图谱相似,具有相似的蛋白质成分表达,但野生冬虫夏草在蛋白质含量和蛋白质种类上都高于人工冬虫夏草。结论:野生条件下环境因子可能对冬虫夏草内在蛋白质的表达具有正向的影响,且野生冬虫夏草无论在蛋白质含量还是蛋白质种类上均优于人工冬虫夏草。 展开更多

关键词 野生冬虫夏草 人工冬虫夏草 蛋白组 差异研究

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