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重组融合饰胶蛋白拮抗转化生长因子β_1刺激增生性瘢痕成纤维细胞增殖的作用 被引量：9
1
作者 胡大海 陈璧 +2 位作者 曹茂开 朱雄翔 徐明达 《中华创伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期330-333,共4页
目的　观察重组谷胱甘肽S -转移酶与饰胶蛋白的融合蛋白 (GST -Decorin)对转化生长因子 β1 刺激增生性瘢痕成纤维细胞的作用 ,探索瘢痕治疗的新方法。　方法　采用RT -PCR技术克隆饰胶蛋白 (Decorin)cDNA并连接到pGEX - 4T - 1载体上 ... 目的　观察重组谷胱甘肽S -转移酶与饰胶蛋白的融合蛋白 (GST -Decorin)对转化生长因子 β1 刺激增生性瘢痕成纤维细胞的作用 ,探索瘢痕治疗的新方法。　方法　采用RT -PCR技术克隆饰胶蛋白 (Decorin)cDNA并连接到pGEX - 4T - 1载体上 ,大肠杆菌内表达GST -Decorin ;体外分离培养增生性瘢痕成纤维细胞 ,加入 1∶6 .2 5 ,1∶12 .5 0 ,1∶2 5 .0 0 ,1∶5 0 .0 0 ,1∶10 0 .0 0稀释度的GST -Decorin ,经四唑盐 (MTT)比色法测定细胞增殖速度 ;进一步将 2mg L的TGF - β1 或同时与 1∶12 .5 0的GST -Decorin加入培养基内 ,比较细胞增殖速度的变化 ,并应用原位杂交及图像分析观察细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达。　结果　稀释度为 1∶6 .2 5～ 1∶2 5的GST -Decorin可有效地抑制瘢痕成纤维细胞的增殖速度 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 ) ;1∶12 .5 0的GST -Decorin能完全拮抗 2mg L的TGF - β1 刺激细胞增殖及Ⅰ、Ⅲ型前胶原的mRNA表达。　结论　GST -Decorin可抑制体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞增殖并拮抗TGF - β1 。 展开更多
关键词 增生瘢痕 成纤维细胞增殖 重组融合蛋白质 饰胶蛋白 转化生长因子Β1
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淋病奈瑟菌外膜Porin I蛋白基因的构建、表达和鉴定 被引量：8
2
作者 岑建萍 程浩 +5 位作者 曾凤英 方永明 周强 叶俊 高锦程 王琦 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期432-434,共3页
目的构建、克隆淋病奈瑟菌外膜PorinI(PI)蛋白基因,并进行表达、纯化和鉴定。方法用PCR法克隆淋病奈瑟菌外膜PI蛋白基因,再与pGEX-4T-2载体连接成表达重组体pGEX-4T-2/PI;经大肠杆菌P2392表达后,用SDS-PAGE、切胶、电洗脱回收等方法纯化... 目的构建、克隆淋病奈瑟菌外膜PorinI(PI)蛋白基因,并进行表达、纯化和鉴定。方法用PCR法克隆淋病奈瑟菌外膜PI蛋白基因,再与pGEX-4T-2载体连接成表达重组体pGEX-4T-2/PI;经大肠杆菌P2392表达后,用SDS-PAGE、切胶、电洗脱回收等方法纯化GST-PI融合蛋白;然后用特异性淋球菌外膜PI蛋白的单克隆抗体进行斑点免疫层析试验鉴定该蛋白。结果成功地获取了pGEX-4T-2/PI表达重组体,经诱导表达后能获得高表达的GST-PI融合蛋白,其相对分子质量为60000;斑点免疫层析试验显示其为淋病奈瑟菌外膜PI蛋白特异性的。结论本研究将有利于进一步研究淋病奈瑟菌外膜PI蛋白的功能。 展开更多
关键词 淋病奈瑟菌 细菌外膜蛋白质 斑点免疫层析试验 重组融合蛋白质 基因构建 基因表达 淋病 诊断 鉴定
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卵巢癌抗独特型抗体6B11scFv和人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子融合蛋白的构建和表达 被引量：7
3
作者 杨飞雪 钱和年 +2 位作者 黄华梁 冯捷 崔恒 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第7期417-419,共3页
目的构建和表达模拟人卵巢癌抗原的抗独特型单链抗体６Ｂ１１ｓｃＦｖ和人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ｈＧＭＣＳＦ）的融合蛋白，以提高抗独特型抗体的免疫原性，为进一步用于卵巢癌的免疫治疗提供基础。方法采用基因工程技术，... 目的构建和表达模拟人卵巢癌抗原的抗独特型单链抗体６Ｂ１１ｓｃＦｖ和人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ｈＧＭＣＳＦ）的融合蛋白，以提高抗独特型抗体的免疫原性，为进一步用于卵巢癌的免疫治疗提供基础。方法采用基因工程技术，用编码连接肽的ＤＮＡ连接６Ｂ１１ｓｃＦｖ和ｈＧＭＣＳＦｃＤＮＡ，并对大肠杆菌用温度进行诱导表达；采用蛋白免疫吸附印迹法，对表达的蛋白进行活性测定。结果表达的蛋白能分别与６Ｂ１１的初始抗体和小鼠抗ｈＧＭＣＳＦ单克隆抗体特异结合。结论表达的融合蛋白保留了６Ｂ１１ｓｃＦｖ和ｈＧＭＣＳＦ两种成分的活性，增强了６Ｂ１１ｓｃＦｖ的免疫原性。 展开更多
关键词 重组融合蛋白质 单链抗体 HGM-CSF 卵巢肿瘤
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抗癌胚抗原单链抗体与核心链霉亲和素融合蛋白在荷瘤裸鼠体内的预定位显像 被引量：1
4
作者 杨卫东 李彪 +3 位作者 朱承谟 江旭峰 冯国伟 吴祥甫 《中华核医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期328-330,T001,共4页
目的　研究1 53Sm 生物素和抗癌胚抗原单链抗体与核心链霉亲和素融合蛋白 (CEAScFv core streptavidin)在荷人结直肠癌裸鼠体内的两步法预定位显像和体内分布。方法　对 2 3只荷人结直肠癌裸鼠腹腔注射CEAScFv core streptavidin进行预... 目的　研究1 53Sm 生物素和抗癌胚抗原单链抗体与核心链霉亲和素融合蛋白 (CEAScFv core streptavidin)在荷人结直肠癌裸鼠体内的两步法预定位显像和体内分布。方法　对 2 3只荷人结直肠癌裸鼠腹腔注射CEAScFv core streptavidin进行预定位 ,2 4h后腹腔注射1 53Sm 生物素 ,其中2 0只于 1、4、8和 2 4h进行体内分布研究 ,余 3只于 8和 2 4h进行定位显像。结果　在荷人结直肠癌裸鼠腹腔注射CEAScFv core streptavidin预定位后 2 4h ,注射1 53Sm 生物素后 1h ,肿瘤 血比值为 0 .4 9,4和 8h达 1.2 1和 1.5 6 ,2 4h达最高 ,为 3.0 9。裸鼠定位显像示 ,8h肿瘤部位放射性明显浓聚 ,2 4h本底明显降低 ,肿瘤呈放射性“热”区。结论　1 53Sm 生物素和CEAScFv core streptavidin预定位显像能提高靶 非靶比值 ,缩短显像时间 ,改善图像质量。 展开更多
关键词 核心链霉亲和素融合蛋白 抗癌胚抗原单链抗体 结肠直肠肿瘤 重组融合蛋白质 放射免疫检测 动物实验
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人细胞色素P450 2B6的GST融合蛋白及其抗体的制备 被引量：1
5
作者 林筱洁 罗建红 余应年 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期3-7,共5页
目的 :获得纯化抗原用于制备CYP2B6多克隆抗体。方法 :PCR扩增目的基因片段 ,亚克隆入融合蛋白表达载体pGEX - 3b ,构建了重组质粒pGEX/ 2B6。然后将该重组质粒转化大肠杆菌DH5α ,IPTG诱导表达 ,SDS -PAGE分离 ,获纯化融合蛋白GST - 2B... 目的 :获得纯化抗原用于制备CYP2B6多克隆抗体。方法 :PCR扩增目的基因片段 ,亚克隆入融合蛋白表达载体pGEX - 3b ,构建了重组质粒pGEX/ 2B6。然后将该重组质粒转化大肠杆菌DH5α ,IPTG诱导表达 ,SDS -PAGE分离 ,获纯化融合蛋白GST - 2B6。用GST - 2B6免疫BALB/C小鼠 ,自腹水中获取CYP2B6多克隆抗体 (2B6pAb)。结果 :融合蛋白GST - 2B6 (CYP2B6 2 0 2～ 35 2aa) ,并获其特异的多克隆抗体。结论 :通过构建融合蛋白重组表达质粒pGEX/ 2B6 ,用获得的初步纯化融合蛋白GST - 展开更多
关键词 细胞色素P450 重组融合蛋白质 抗体
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重组蛋白质亲和标签的选择与串联亲和纯化的应用进展 被引量：2
6
作者 占艺 张金钟 王丽芬 《现代生物医学进展》 CAS 2009年第9期1757-1760,1738,共5页
重组蛋白质技术作为蛋白质研究的重要手段之一,在生物化学与生物物理学研究领域,扮演着极其重要的角色。亲和纯化作为最为方便与快捷的重组蛋白质纯化手段,日益得到广泛的应用。由于各种亲和标签,纯化介质层出不穷,性质各异。应根据自... 重组蛋白质技术作为蛋白质研究的重要手段之一,在生物化学与生物物理学研究领域,扮演着极其重要的角色。亲和纯化作为最为方便与快捷的重组蛋白质纯化手段,日益得到广泛的应用。由于各种亲和标签,纯化介质层出不穷,性质各异。应根据自身研究对象具体情况选择合适的亲和纯化标签。近年双亲和标签进行串联亲和纯化日益成为蛋白质相互作用研究的重要方法。多种亲和标签的搭配已得到成功应用,部分已进入商业化,并在各种模式生物中得到广泛的应用,本文就重组蛋白质亲和标签的选择与串联亲和纯化作一综述。 展开更多
关键词 重组融合蛋白质 亲和标签 串联亲和纯化
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重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对类风湿关节炎患者自身抗体的影响 被引量：2
7
作者 刘冬舟 赵岩 +6 位作者 谭艳红 洪小平 孙保东 肖学吕 冯小欣 蔡文虹 黄勤 《实用医学杂志》 CAS 2008年第15期2673-2675,共3页
目的:了解重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(益赛普)对类风湿关节炎(RA)患者血清自身抗体的影响。方法:选取24例处于活动期的RA患者,年龄28～56岁,其中女19例,男5例,病程0.5～3年。益赛普25mg皮下注射,每周2次,共治疗12周。在... 目的:了解重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(益赛普)对类风湿关节炎(RA)患者血清自身抗体的影响。方法:选取24例处于活动期的RA患者,年龄28～56岁,其中女19例,男5例,病程0.5～3年。益赛普25mg皮下注射,每周2次,共治疗12周。在益赛普治疗前、后抽取患者血清,分别检测血清中类风湿因子(RF)、抗核抗体(ANA)、抗ENA抗体、抗双链DNA(ds-DNA)抗体、抗组蛋白抗体、抗心磷脂抗体(aCL)、抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)等自身抗体。结果:益赛普治疗12周后,RF水平较治疗前明显下降(P<0.01);治疗后ANA、抗dsDNA抗体及抗组蛋白抗体阳性率较治疗前明显升高(P<0.05);而治疗前、后抗ENA抗体、aCL、ANCA的阳性率变化无显著性,24例RA患者中无一例出现系统性红斑狼疮样综合征。结论:RA患者使用益赛普治疗后可以出现自身抗体的变化,但没有发现患者出现系统性红斑狼疮样综合征。 展开更多
关键词 关节炎 类风湿肿瘤坏死因子 重组融合蛋白质 自身抗体
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半胱氨酸对原核表达的pS2融合蛋白复性的影响
8
作者 刘彩云 杨蔚 +1 位作者 孙素莲 丁桂凤 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期411-414,共4页
目的 :分析半胱氨酸对变性pS2融合蛋白复性的影响。方法 :经半胱氨酸处理与不处理的纯化pS2融合蛋白与抗 pS2多抗血清及进口 pS2单抗于 37℃孵育 1h后 ,再进行酶联免疫吸附试验 (ELISA)和免疫组织化学试验 (IHC)。此二种pS2融合蛋白经 1... 目的 :分析半胱氨酸对变性pS2融合蛋白复性的影响。方法 :经半胱氨酸处理与不处理的纯化pS2融合蛋白与抗 pS2多抗血清及进口 pS2单抗于 37℃孵育 1h后 ,再进行酶联免疫吸附试验 (ELISA)和免疫组织化学试验 (IHC)。此二种pS2融合蛋白经 15 % (质量比 )SDS PAGE后进行Westernblotting分析。 结果 :ELISA、IHC、Westernblotting结果显示 ,用半胱氨酸处理pS2融合蛋白后 ,其抗原性明显提高 ,提示 pS2融合蛋白经剧烈变性复性后 ,pS2三叶草结构域二硫键绝大部分发生错配而导致其抗原性丧失。 结论 :在变性 展开更多
关键词 pS2融合蛋白 半胱氨酸 药理学 原核细胞 重组融合蛋白质 乳腺癌
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细胞穿透肽CCL融合蛋白的构建与表达
9
作者 刘勇 安艳芳 +2 位作者 王仲霞 杨建业 吴君 《中国感染控制杂志》 CAS 北大核心 2016年第6期361-366,共6页
目的评估细胞穿透肽CCL融合蛋白构建的可能性。方法将CCL6-PEP-6XHis构建至pABP质粒,然后提取pABP-CCL6-PEP质粒进行人胚肾HEK293细胞转染表达,以及CCL6-PEP-6XHis蛋白层析纯化和检测。结果成功构建并纯化细胞穿透肽CCL融合蛋白。将CCL6... 目的评估细胞穿透肽CCL融合蛋白构建的可能性。方法将CCL6-PEP-6XHis构建至pABP质粒,然后提取pABP-CCL6-PEP质粒进行人胚肾HEK293细胞转染表达,以及CCL6-PEP-6XHis蛋白层析纯化和检测。结果成功构建并纯化细胞穿透肽CCL融合蛋白。将CCL6-PEP-6XHis Tag基因经PCR扩增、接入T载体、克隆、培养,并提取质粒进行测序鉴定,所得序列与目的基因一致。成功将CCL6-PEP-6XHis基因构建至哺乳动物细胞表达载体pABP中,经质粒提取和酶切鉴定,电泳结果显示,HindⅢ+XbaⅠ切出约430 bp的条带,符合预期,酶切鉴定正确。蛋白质印迹法(Western Blot)检测结果阳性,表明纯化得到的目标蛋白带有hisx6标签。结论细胞穿透肽CCL融合蛋白能够人工构建,并通过真核细胞进行表达。 展开更多
关键词 细胞穿透肽 CCL 基因表达 重组融合蛋白质
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基因重组壳质酶融合蛋白抗原用于丝虫病血清学诊断
10
作者 王世海 熊美华 +2 位作者 刘涛 唐丽娜 方仁丽 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期334-336,共3页
目的　应用基因重组壳质酶融合蛋白抗原酶联免疫吸附试验方法检测微丝蚴（Ｍｆ）血症沙鼠、正常沙鼠和班氏丝虫微丝蚴，探讨该方法在丝虫病血清学诊断中的价值及在现场推广前景。方法　用丝虫性单克隆抗体Ｍｆ１ 识别的微丝蚴壳质酶融... 目的　应用基因重组壳质酶融合蛋白抗原酶联免疫吸附试验方法检测微丝蚴（Ｍｆ）血症沙鼠、正常沙鼠和班氏丝虫微丝蚴，探讨该方法在丝虫病血清学诊断中的价值及在现场推广前景。方法　用丝虫性单克隆抗体Ｍｆ１ 识别的微丝蚴壳质酶融合蛋白与祖系克隆的核苷酸系列基础引物合成寡核苷酸并进行ＰＣＲ扩增，以Ｐｍａｌｃ 为载体表达、亲和层析纯化。试验动物分别用壳质酶抗原和布鲁马来丝虫感染期幼虫接种免疫和感染，用ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳，免疫印渍技术分析壳质酶抗原的功能性蛋白分子。以酶联免疫吸附试验方法检测试验血清特异性抗体水平，并与Ｍｆｘｔ 抗原进行比较。结果　壳质酶抗原的特异功能性蛋白相对分子量为６９ ０００ 。壳质酶抗原检测微丝蚴血症长爪沙鼠和微丝蚴血症患者血清抗体阳性率为１００％ 。Ｍｆｘｔ 抗原检测的血清抗体阳性率为８０％ 。壳质酶抗原检测的正常沙鼠和正常人血清标本结果均为阴性，Ｍｆｘｔ 抗原在正常人血清中出现５％ 假阳性。流行区非微丝蚴血症者壳质酶抗原和Ｍｆｘｔ 抗原的假阳性率分别为５％ 和２０％ 。结论　基因重组壳质酶抗原酶联免疫吸附试验方法用于丝虫病血清学诊断敏感性高，特异性强，操作简便易行，具有实用价值和推广前景。 展开更多
关键词 丝虫病 重组融合蛋白质 壳多糖酶 血清学诊断
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纯化标签不同融合端的选择对蝎毒肽色谱行为的影响
11
作者 惠长野 邵建华 +3 位作者 郭妍 张希 杨学琴 王佃鹏 《中国医药生物技术》 CSCD 2012年第6期436-440,共5页
目的考察组氨酸标签置于抗癫痫肽AEP肽链不同末端对重组肽亲合层析的影响。方法同源建模构建AEP三维结构,预测空间构象对纯化标签的屏蔽效应;构建组氨酸标签不同末端融合表达载体;对比两者相同色谱条件下的层析行为及生物活性。结果 AE... 目的考察组氨酸标签置于抗癫痫肽AEP肽链不同末端对重组肽亲合层析的影响。方法同源建模构建AEP三维结构,预测空间构象对纯化标签的屏蔽效应;构建组氨酸标签不同末端融合表达载体;对比两者相同色谱条件下的层析行为及生物活性。结果 AEP构象分析显示,肽链C末端空间屏蔽效应小;在两者表达量相当的前提下,经亲和层析纯化,每升发酵液可获色谱纯样品,AEP-His6为3.3mg,Met-Gly-His6-AEP为0.8mg;HistagC端融合对rAEP活性影响较N端融合小。结论对于蝎毒这类空间结构简单的小分子活性肽,组氨酸标签融合端的选择对重组肽色谱行为及活性有显著影响。 展开更多
关键词 蝎毒素 重组融合蛋白质 分子构象 色谱行为 生物活性
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HIV-1 SF2株env基因C1与C3区的嵌合表达
12
作者 朱元祺 姜岩 +1 位作者 王斌 钱冬萌 《青岛大学医学院学报》 CAS 2003年第4期421-423,共3页
①目的　构建HIV 1SF2株env基因C1与C3区嵌合片段的克隆并在大肠杆菌中表达。②方法用DNAstar软件辅助设计引物 ,以含有HIV 1SF2株前病毒基因组的 9B1R6质粒为模板 ,PCR法分别扩增出env基因C1和C3段 ;两个片段经KpnⅠ酶切、T4连接酶连... ①目的　构建HIV 1SF2株env基因C1与C3区嵌合片段的克隆并在大肠杆菌中表达。②方法用DNAstar软件辅助设计引物 ,以含有HIV 1SF2株前病毒基因组的 9B1R6质粒为模板 ,PCR法分别扩增出env基因C1和C3段 ;两个片段经KpnⅠ酶切、T4连接酶连接和扩增后 ,再将经EcoRⅠ、SalⅠ双酶切的嵌合片段插入表达载体 pGEX 4T 2中 ,构建重组表达质粒 pGEX 4T 2 /C1C3;重组质粒经酶切、测序鉴定后 ,以TSS法转入大肠杆菌DH5α,IPTG诱导表达融合蛋白和SDS PAGE电泳分析表达蛋白图谱。③结果　经酶切和测序分析 ,插入片段大小、方向和读码框架正确 ,无碱基错配 ,表明成功构建 pGEX 4T 2 /C1C3克隆 ;重组克隆在大肠杆菌DH5α中经IPTG诱导 ,高效表达出相对分子质量为 4 .3万的融合蛋白。④结论　重组质粒 pGEX 4T 2 /C1C3的构建和表达成功 ,为进一步研究该表达蛋白的活性和HIV疫苗的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 HIV—1 SF2株 ENV基因 C1区 C3区 基因表达 质粒 重组融合蛋白质
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TAT/CT-1及TAT/EGFP融合蛋白的表达与纯化及其在小鼠体内分布的观察
13
作者 李兴鑫 周跃 张正丰 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期648-651,共4页
目的分别构建含蛋白转导域(protein transduction domain,PTD)TAT与小鼠心肌营养素-1(CT-1)及TAT与增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)融合基因片断的原核表达质粒TAT/CT-1及TAT/EGFP,利用大肠杆菌进行表达并纯... 目的分别构建含蛋白转导域(protein transduction domain,PTD)TAT与小鼠心肌营养素-1(CT-1)及TAT与增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)融合基因片断的原核表达质粒TAT/CT-1及TAT/EGFP,利用大肠杆菌进行表达并纯化;观察融合蛋白在小鼠体内的分布。方法采用PCR及克隆技术将CT-1编码区基因以及EGFP基因分别与TAT连接到原核表达载体pGEX-4T3上。用IPTG诱导表达融合蛋白,谷胱甘肽琼脂糖4B纯化融合蛋白。小鼠尾静脉注射融合蛋白,脑、脊髓、肝、心肌等器官冰冻切片,免疫荧光观察融合蛋白的存在。结果目的片断CT-1及EGFP被有效的扩增,构建后质粒测序表明无PCR引起的突变,TAT/CT-1及TAT/EGFP在转化的大肠杆菌中获得高效表达,并成功纯化。脑、脊髓、肝、心肌等组织切片免疫荧光检测呈阳性。结论成功获得了有活性的TAT/CT-1及TAT/EGFP的基因表达产物;TAT可介导CT-1及EGFP由细胞外跨膜转导进入细胞内;为CT-1功能的进一步研究打下了基础。 展开更多
关键词 心肌营养素-1 重组融合蛋白质 蛋白转导域 小鼠
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重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白治疗类风湿关节炎双盲随机多中心对照临床研究 被引量：86
14
作者 胡大伟 鲍春德 +5 位作者 陈顺乐 古洁若 栗占国 孙凌云 韩星海 倪立青 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 2005年第11期664-668,共5页
目的研究注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白[rhTNFR:Fc,益赛普,(etanercept)]对活动性类风湿关节炎(RA)患者的疗效及安全性。方法238例患者随机分为试验组和对照组。试验组每周1次口服空白模拟甲氨蝶呤(MTX),同时接受rhTNF... 目的研究注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白[rhTNFR:Fc,益赛普,(etanercept)]对活动性类风湿关节炎(RA)患者的疗效及安全性。方法238例患者随机分为试验组和对照组。试验组每周1次口服空白模拟甲氨蝶呤(MTX),同时接受rhTNFR:Fc皮下注射治疗,每周2次,每次25mg;对照组每周1次口服定量MTX(每周7.5mg起,8周内增至15mg),同时每周2次皮下注射空白模拟rhTNFR:Fc。疗程24周。疗效评价采用美国风湿病学会(ACR)疗效评定标准。结果治疗2周后,rhTNFR:Fc组ACR20有效率为35.59%,MTX组为22.50%,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗8周后,rhTNFR:Fc组和MTX组的ACR20、ACR50和ACR70组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗12周后,rhTNFR:Fc组ACR20有效率为66.10%,MTX组是51.67%,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗24周后,rhTNFR:Fc组ACR20有效率为75.42%,且ACR70有效率优于MTX组(P<0.05),显示rhTNFR:Fc疗效强于MTX。两组药物之间总的不良反应发生率差异无统计学意义。结论rhTNFR:Fc用于治疗中、重度RA具有良好的安全性和显著的疗效;在前12周治疗期间,rhTNFR:Fc较MTX起效快、效果更明显。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子类 重组融合蛋白质类 甲氨蝶呤 关节炎 类风湿 临床试验 活动性类风湿关节炎 肿瘤坏死因子受体 皮下注射治疗 抗体融合蛋白 双盲随机 对照组 人Ⅱ型 临床研究 重组
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康柏西普治疗湿性年龄相关性黄斑变性的临床疗效观察 被引量：43
15
作者 路航 崔璟琳 +3 位作者 董辉 骆滨江 修巍威 李慧美 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期818-821,共4页
目的 探讨玻璃体腔注射康柏西普治疗湿性年龄相关性黄斑变性性的临床疗效和安全性.方法 回顾性分析.以ETDRS视力表、彩色眼底像、FFA及OCT等检查结果确诊的湿性AMD62只眼,给予玻璃体腔注射10 g/L的康柏西普0.5 mg,随访（9.53±2.16... 目的 探讨玻璃体腔注射康柏西普治疗湿性年龄相关性黄斑变性性的临床疗效和安全性.方法 回顾性分析.以ETDRS视力表、彩色眼底像、FFA及OCT等检查结果确诊的湿性AMD62只眼,给予玻璃体腔注射10 g/L的康柏西普0.5 mg,随访（9.53±2.16）个月,对比分析患者治疗前以及治疗前及治疗后1、3、6、9、12个月的最佳矫正视力、ETDRS视力、黄斑中心视网膜厚度及CNV病灶渗漏变化情况.采用配对t检验对视网膜厚度和ETDRS视力数据进行统计学分析.结果 康柏西普注射治疗次数为1～5次,平均治疗次数为3.05次.62只眼治疗后末次随访检查时,ETDRS视力平均字母数为（50.20±12.87）个,较治疗前平均字母数增加26.20个字母,差异有统计学意义（t=2.936,P＜0.01）.视力增加≥15个字母者33只眼（53.23％）;视力增加≤0个字母者2只眼（3.23％）.OCT检查显示,黄斑中心视网膜厚度平均值为（223±74） μm,与治疗前黄斑中心视网膜厚度平均值比较,差异有统计学意义（t=3.669,P＜0.01）.CNV渗漏停止者34只眼（54.84％）;渗漏减少者23只眼（37.10％）;无明显改变者5只眼（8.06％）.注射后共有2只眼出现轻度眼压升高,均在1周内降至正常.随访期间未见与注射及药物有关的眼部及全身不良反应发生.结论 玻璃体腔内注射康柏西普治疗湿性AMD有较好疗效,可明显提高患眼视力,减轻黄斑水肿,抑制新生血管渗漏,减少再出血风险,临床应用安全性高. 展开更多
关键词 湿性黄斑变性 重组融合蛋白质类 玻璃体内注射 受体 血管内皮生长因子 治疗结果
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重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺功能的影响 被引量：21
16
作者 张程 陈平 +2 位作者 蔡珊 陈剑波 吴杰 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期432-436,共5页
目的探讨重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(rhTNFR:Fc)对大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型肺功能的影响。方法 48只大鼠随机分为正常对照组、COPD 组、rhTNFR:Fc 干预组(简称干预组)及假干预组。单纯吸烟法建立 COPD 模型,干预... 目的探讨重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(rhTNFR:Fc)对大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型肺功能的影响。方法 48只大鼠随机分为正常对照组、COPD 组、rhTNFR:Fc 干预组(简称干预组)及假干预组。单纯吸烟法建立 COPD 模型,干预组皮下注射 rhTNFR:Fc 进行干预,假干预组皮下注射空白模拟制剂。酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度。肺组织切片行苏木精-伊红染色观察形态学改变,定量测定肺平均内衬间隔和平均肺泡数,用小动物肺功能仪测定系统测定肺功能。结果 COPD 组0.3秒用力呼气容积占用力肺活量比值(FEV_(0.3)/FVC)和呼气峰流速(PEF)[(65.1±8.4)%和(18.8±1.6)ml/s]显著低于正常对照组[(85.6±5.9)%和(47.2±7.3)ml/s]和干预组[(77.7±2.7)%和(38.2±3.3)ml/s],假干预组 FEV_(0.3)/FVC 和 PEF[(65.4±9.8)%和(19.0±1.9)ml/s]显著低于干预组。COPD 组血清中TNF-α浓度[(118±34)ng/L]显著高于正常组[(74±16)ng/L]和干预组[(79±14)ng/L],假干预组血清中 TNF-α浓度[(120±39)ng/L]显著高于干预组;COPD 组 BALF 中TNF-α浓度[(155±28)ng/L]显著高于正常对照组[(79±28)ng/L]。COPD 组肺平均内衬间隔[(77±29)×10^(-6)m/个]显著高于正常对照组[(44±7)×10^(-6)m/个],其平均肺泡数[(252±97)×10~6个/m^2]显著低于正常对照组[(393±24)×10~6个/m^2]和干预组[(379±33)×10~6个/m^2]。假干预组平均肺泡数[(213±99)×10~6个/m^2]显著低于干预组[(379±33)×10~6个/m^2]。COPD 组+假干预组血清和 BALF 中 TNF-α浓度与 PEF 和 FEV_(0.3)/FVC 均呈显著负相关。结论 TNF-α与吸烟大鼠的 COPD 形成有关,并影响其肺功能;rhTNFR:Fc 对延缓肺功能损害具有一定的作用。 展开更多
关键词 肺疾病 阻塞性 肿瘤坏死因子 呼吸功能试验 重组融合蛋白质类
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益赛普联合甲氨蝶呤治疗中重度活动性类风湿关节炎的疗效和安全性评价 被引量：17
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作者 黄源 《医学临床研究》 CAS 2017年第8期1480-1482,共3页
【目的】探讨益赛普联合甲氨蝶呤治疗中重度活动性类风湿关节炎（RA）患者的疗效及安全性。【方法]84例中重度RA患者，随机分为试验组（益赛普＋甲氨蝶呤）和对照组（激素＋甲氨蝶呤），各42例；比较连续治疗24周后两组患者的临床疗效... 【目的】探讨益赛普联合甲氨蝶呤治疗中重度活动性类风湿关节炎（RA）患者的疗效及安全性。【方法]84例中重度RA患者，随机分为试验组（益赛普＋甲氨蝶呤）和对照组（激素＋甲氨蝶呤），各42例；比较连续治疗24周后两组患者的临床疗效及不良反应。【结果】治疗24周后，两组血沉（ESR）、C反应蛋白（CRP）、类风湿因子（RF）、疾病活动性评分（DAS28）及腕关节（WJ）、第2及第3掌指关节（MCP2、3，）、第2及第3近端指间关节（PIP2、3）、膝关节（Kne）的滑膜厚度均较治疗前降低（P〈0．05），且试验组较对照组降低更为显著（P〈0．05）；试验组按美国风湿病学会（ACR）疗效标准，ACR20、ACR50、ACR70疗效分别为83．33％（35／42）、61．90％（26／42）、42．86％（18／42），对照组分别为76．19％（32／42）、47．62％（20／42）、21．43％（9／42），试验组的ACR70疗效率高于对照组（PG0．05）；试验组的不良反应发生率为26．19％，高于对照组19．05％（PG0．05）。【结论】益赛普联合甲氨蝶呤治疗中重度活动性RA患者的，临床效果较好，但不良发应发生率较高。 展开更多
关键词 受体 肿瘤坏死因子 重组融合蛋白质类/治疗应用 甲氨蝶呤/治疗应用 关节炎 类风湿/药物疗法 重组融合蛋白质类/副作用
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结核分枝杆菌Ag85B-ESAT6融合蛋白在小鼠体内诱导的免疫应答及其保护力 被引量：11
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作者 师长宏 范雄林 +3 位作者 柏银兰 薛莹 张海 徐志凯 《第四军医大学学报》 北大核心 2004年第18期1633-1636,共4页
目的 :研究Ag85B与ESAT6融合蛋白在小鼠体内诱导的体液和细胞免疫应答以及对MTB感染小鼠的保护力 .方法 :采用皮下包埋的方法 ,将预先转移到硝酸纤维素膜上的表达蛋白免疫小鼠 3次 ,每次间隔 2wk,用MTB培养上清滤液蛋白 (culturefiltrat... 目的 :研究Ag85B与ESAT6融合蛋白在小鼠体内诱导的体液和细胞免疫应答以及对MTB感染小鼠的保护力 .方法 :采用皮下包埋的方法 ,将预先转移到硝酸纤维素膜上的表达蛋白免疫小鼠 3次 ,每次间隔 2wk,用MTB培养上清滤液蛋白 (culturefiltrateproteins,CFP)作为抗原 ,ELASA测定免疫小鼠血清特异性抗体的滴度 .为了检测融合蛋白免疫小鼠引起的细胞免疫应答 ,最后一次免疫完成后 4wk ,取一部分免疫小鼠分离脾淋巴细胞 ,体外用抗原刺激 ,MTT法检测淋巴细胞刺激反应 ,ELISA检测悬液中IFN γ水平 .另一部分免疫的BALB/c小鼠经尾静脉感染MTB毒株H37Rv ,4wk后计数脾脏细菌负荷数 .结果 :Ag85B ESAT6蛋白免疫小鼠血清特异性抗体滴度为 1∶10 0 0 ,ESAT6 Ag85B蛋白免疫小鼠血清特异性抗体滴度为 1∶5 0 0 0 .融合蛋白Ag85B ESAT6和ESAT6 Ag85B免疫组淋巴细胞刺增殖指数分别为 2 .4 0± 0 .17和 2 .6 0± 0 .2 5 ,而生理盐水组只有 0 .90± 0 .2 1;相对应的IFN γ含量分别为 (3.5 1± 0 .30 ) μg/L和 (4 .0 5± 0 .4 1) μg/L ,显著高与生理盐水对照组 (0 .5 0± 0 .2 5 ) μg/L ,P <0 .0 5 ,但不及BCG免疫组 (5 .5 5±0 .31) μg/L .与生理盐水免疫组 (细菌负荷6 .31± 0 .13)相比较 ,融合蛋白免疫的BALB/c小鼠 。 展开更多
关键词 分支杆菌 结核 疫苗 抗原85B ESAT6 重组融合蛋白质类
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VEGF抑制剂联合577 nm微脉冲激光治疗非缺血性视网膜中央静脉阻塞黄斑水肿患者的疗效 被引量：14
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作者 邹强性 何春梅 +1 位作者 曹奎 乔岗 《中国医师杂志》 CAS 2019年第8期1259-1262,共4页
目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)抑制剂联合577 nm微脉冲激光治疗非缺血性视网膜中央静脉阻塞黄斑水肿的效果。方法选取本院2015年10月至2017年8月收治的非缺血性视网膜中央静脉阻塞黄斑水肿患者92例,随机数字表法分为对照组(n=46)与研... 目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)抑制剂联合577 nm微脉冲激光治疗非缺血性视网膜中央静脉阻塞黄斑水肿的效果。方法选取本院2015年10月至2017年8月收治的非缺血性视网膜中央静脉阻塞黄斑水肿患者92例,随机数字表法分为对照组(n=46)与研究组(n=46)。对照组采取577 nm微脉冲激光治疗,研究组于对照组基础上加用VEGF抑制剂康柏西普。统计两组临床疗效,治疗前及治疗后不同时间段(1、2、3个月)最佳矫正视力及黄斑中心凹视网膜厚度,治疗前及治疗后6个月外核层厚度及光感受器细胞层厚度,治疗前后血清白细胞介素-6(IL-6)、VEGF、转化生长因子β1(TGF-β1)水平、并发症发生率。结果⑴临床疗效:研究组总有效率93.48%(43/46)高于对照组78.26%(36/46,P<0.05);⑵最佳矫正视力:治疗后1、2、3个月两组最佳矫正视力水平较治疗前提高,且研究组高于对照组(P<0.05);⑶黄斑中心凹视网膜厚度:治疗后1、2、3个月两组黄斑中心凹视网膜厚度较治疗前减小,且研究组小于对照组(P<0.05);⑷外核层厚度及光感受器细胞层厚度:治疗后6个月两组光感受器细胞层厚度较治疗前增大,外核层厚度较治疗前减小,且研究组光感受器细胞层厚度大于对照组,外核层厚度小于对照组(P<0.05);⑸血清因子:治疗3 d后两组血清IL-6、VEGF、TGF-β1水平较治疗前降低,且研究组低于对照组(P<0.05);⑹并发症:研究组并发症发生率(4.35%)低于对照组(10.87%),但差异无统计学意义(P>0.05)。结论采取577 nm微脉冲激光联合VEGF抑制剂治疗非缺血性视网膜中央静脉阻塞黄斑水肿,可有效改善最佳矫正视力及黄斑中心凹视网膜厚度,提高治疗效果,改善外核层厚度及光感受器细胞层厚度,降低血清IL-6、VEGF、TGF-β1水平,且并发症少。 展开更多
关键词 视网膜静脉闭塞 黄斑水肿 重组融合蛋白质类 激光疗法
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重组结核分枝杆菌ESAT6-CFP10蛋白对不同分枝杆菌致敏豚鼠的皮试反应研究 被引量：12
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作者 蒲江 陶立峰 +1 位作者 邓海清 王德海 《中国防痨杂志》 CAS 2012年第10期676-680,共5页
目的研究重组结核分枝杆菌ESAT6-CFP10蛋白对临床常见致病分枝杆菌及常见环境分枝杆菌致敏豚鼠的皮试反应。方法以鸟分枝杆菌、胞内分枝杆菌、蟾蜍分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、海分枝杆菌、瘰疠分枝杆菌、戈登分枝杆菌、苏加分枝杆菌、... 目的研究重组结核分枝杆菌ESAT6-CFP10蛋白对临床常见致病分枝杆菌及常见环境分枝杆菌致敏豚鼠的皮试反应。方法以鸟分枝杆菌、胞内分枝杆菌、蟾蜍分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、海分枝杆菌、瘰疠分枝杆菌、戈登分枝杆菌、苏加分枝杆菌、龟分枝杆菌脓肿亚种、偶发分枝杆菌、草分枝杆菌、微黄分枝杆菌、非洲分枝杆菌、牛分枝杆菌、结核分枝杆菌与卡介菌等16株菌株的活菌菌液分别经腹股沟皮下攻击豚鼠,每组5只,3～4周后,分别皮内注射TB-PPD、PPD-B和重组结核分枝杆菌ESAT6-CFP10蛋白各0.1ml,于注射后24、48h观察局部硬结的纵径与横径,根据48h的反应结果进行判定。结果PPD-B对16种分枝杆菌活菌致敏豚鼠的皮试硬结直径均≥5mm,呈阳性,阳性比例均为5/5;TB-PPD对结核、牛、非洲分枝杆菌和卡介菌等活菌致敏豚鼠的皮试硬结直径均≥5mm,呈阳性,阳性比例均为5/5;重组结核分枝杆菌ESAT6-CFP10蛋白对结核、牛和非洲分枝杆菌活菌致敏豚鼠的皮试硬结直径均≥5mm,呈阳性,阳性比例均为5/5;而对鸟、胞内、蟾蜍、堪萨斯、海、瘰疠、戈登、苏加、龟脓、偶发、草、微黄和卡介菌等分枝杆菌活菌、结核分枝杆菌死菌致敏豚鼠的皮试反应均呈阴性,阳性比例均为0/5。结论重组结核分枝杆菌ESAT6-CFP10蛋白能提高结核分枝杆菌感染诊断的特异度并能区别结核分枝杆菌是否存活、卡介菌致敏导致的皮试超敏反应。 展开更多
关键词 分枝杆菌属 皮肤试验 重组融合蛋白质类 细菌蛋白质类
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