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小鼠酪氨酸羟化酶启动子克隆
被引量：
3
1
作者
朱孝荣
高秀先
+3 位作者
朱园园
袁红花
孙怀昌
高殿帅
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期500-507,共8页
为了克隆小鼠酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)启动子,并对其特异性调控能力进行研究,本实验采用重叠延伸PCR高保真扩增出小鼠TH启动子片段,测序正确后,重组构建质粒,并用TH启动子调控EGFP基因的表达。然后分别转染MN-9D细胞(TH+)...
为了克隆小鼠酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)启动子,并对其特异性调控能力进行研究,本实验采用重叠延伸PCR高保真扩增出小鼠TH启动子片段,测序正确后,重组构建质粒,并用TH启动子调控EGFP基因的表达。然后分别转染MN-9D细胞(TH+)和ECV细胞(TH-),观察EGFP基因在细胞内表达情况。结果显示:扩增出小鼠TH启动子序列与GenBank报道一致;单酶切和质粒PCR鉴定证实小鼠TH启动子和EGFP基因已经克隆入重组质粒中;小鼠TH启动子能调控EGFP在MN-9D细胞中表达,不能调控EGFP在ECV细胞内表达。初步确定克隆的小鼠TH启动子具有特异性调控目的基因表达的能力。
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关键词
酪氨酸羟化酶启动子
PCR
重
组构
建
转染
小鼠
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职称材料
质粒拯救型T-DNA标签质粒的构建
被引量：
1
2
作者
张金谌
张学文
戴雄泽
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2007年第34期11016-11018,共3页
[目的]为了高效率地获得转基因植物的旁邻序列。[方法]以pUC18及pWM101为出发质粒,通过用限制性内切酶EcoRⅠ和HindⅢ双酶切质粒pUC18,得到含大肠杆菌复制起点及氨苄青霉素抗性基因的pUC18大片断,并将这段DNA整合到pWM101的T-DNA之中构...
[目的]为了高效率地获得转基因植物的旁邻序列。[方法]以pUC18及pWM101为出发质粒,通过用限制性内切酶EcoRⅠ和HindⅢ双酶切质粒pUC18,得到含大肠杆菌复制起点及氨苄青霉素抗性基因的pUC18大片断,并将这段DNA整合到pWM101的T-DNA之中构建重组质粒。[结果]该质粒利用根癌农杆菌转化植物后,可利用潮霉素筛选转化细胞,拯救质粒则可转化大肠杆菌后,以氨苄青霉素进行筛选。[结论]该研究为以后的用T-DNA标签研究植物功能奠定了基础。
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关键词
PUC18
pWM101
T-DNA标签
重
组构
建
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职称材料
丙型肝炎病毒抗原表位基因在新的抗原呈递系统中的重组构建及高效表达
被引量：
1
3
作者
彭梅
陈元鼎
+1 位作者
刘名英
戴长柏
《中华传染病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第4期219-223,T001,共6页
目的 将人工合成的丙型肝炎病毒 (HCV)E1区的抗原表位基因 ,构建到一种新的抗原表位呈递系统的高效表达载体pET RNA2中进行高效表达。方法 运用基因工程技术将人工合成的HCVE1区的抗原表位基因 ,构建到一种新的抗原表位呈递系统的高...
目的 将人工合成的丙型肝炎病毒 (HCV)E1区的抗原表位基因 ,构建到一种新的抗原表位呈递系统的高效表达载体pET RNA2中进行高效表达。方法 运用基因工程技术将人工合成的HCVE1区的抗原表位基因 ,构建到一种新的抗原表位呈递系统的高效表达载体 pET RNA2中 ,构成一个嵌合基因进行高效表达。在该载体适当的位置插入外源抗原表位可使其呈现一定的空间构象 ,使抗原表位位于重组蛋白的表面并有望改善其免疫原性。结果 分别在载体的 10 6、15 3、3 0 5位氨基酸处插入外源抗原表位基因 ,成功构建了重组质粒 pET RNA HCV/A1、pET RNA HCV/A2和pET RNA HCV/A3 ,并分别在大肠杆菌中进行高效表达。表达产物相对分子质量约为 4 5 0 0 0。初步研究结果表明 ,在特定条件下不需要异丙基 β D硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导就可使之获得高效表达 ,表达的嵌合蛋白占菌体总蛋白的 4 0 %以上。结论 HCV抗原表位基因成功构建到一种新的抗原呈递系统中并获得高效表达 ,为深入研究HCV抗原表位的免疫学和生物学特性奠定了基础 ,并对今后设计诊断试剂及抗原表位特异性疫苗有一定意义。
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关键词
丙型肝炎病毒
抗原表位
抗原呈递系统
HCV
重
组构
建
基因表达
原文传递
第三代腺病毒载体重组构建的优化
4
作者
宋小星
尤圣武
+1 位作者
彭章龙
于布为
《国际病毒学杂志》
2007年第2期38-41,共4页
第三代腺病毒载体以其高容量、长时间转基因表达及低毒性和低免疫原性的优点已经广泛应用于基因治疗中，目前这种病毒载体的重组构建已经有许多优化和改进。
关键词
第三代腺病毒
重
组构
建
优化
转基因表达
原文传递
高校优质教学资源重组构建共享系统研究
被引量：
1
5
作者
吴安艳
刘敏斯
《软件导刊.教育技术》
2017年第11期37-39,共3页
随着信息技术与多媒体技术的发展,高校教学资源的建设既丰富又复杂,承载教学资源的平台也遍地开花,利用现有的平台和资源重构符合时代要求的优质教学资源,并进行有效的共享利用意义重大。调查当前高校当前的数字化教学资源及共享服务平...
随着信息技术与多媒体技术的发展,高校教学资源的建设既丰富又复杂,承载教学资源的平台也遍地开花,利用现有的平台和资源重构符合时代要求的优质教学资源,并进行有效的共享利用意义重大。调查当前高校当前的数字化教学资源及共享服务平台情况,分析现在流行的课程资源结构,构建既能嵌接现有平台,又能对当前资源进行组合重建的平台架构,以实现教学资源优化与共享目标。
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关键词
优质教学资源
资源
重
组构
建
资源共享
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职称材料
题名
小鼠酪氨酸羟化酶启动子克隆
被引量：
3
1
作者
朱孝荣
高秀先
朱园园
袁红花
孙怀昌
高殿帅
机构
徐州医学院基础学院
扬州大学兽医学院
出处
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期500-507,共8页
基金
江苏省高校自然科学基础研究(07KJD-310221)资助项目
文摘
为了克隆小鼠酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)启动子,并对其特异性调控能力进行研究,本实验采用重叠延伸PCR高保真扩增出小鼠TH启动子片段,测序正确后,重组构建质粒,并用TH启动子调控EGFP基因的表达。然后分别转染MN-9D细胞(TH+)和ECV细胞(TH-),观察EGFP基因在细胞内表达情况。结果显示:扩增出小鼠TH启动子序列与GenBank报道一致;单酶切和质粒PCR鉴定证实小鼠TH启动子和EGFP基因已经克隆入重组质粒中;小鼠TH启动子能调控EGFP在MN-9D细胞中表达,不能调控EGFP在ECV细胞内表达。初步确定克隆的小鼠TH启动子具有特异性调控目的基因表达的能力。
关键词
酪氨酸羟化酶启动子
PCR
重
组构
建
转染
小鼠
Keywords
tyrosine hydroxylase promotor, PCR, recombine and construct, transfect, mice
分类号
R341 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
质粒拯救型T-DNA标签质粒的构建
被引量：
1
2
作者
张金谌
张学文
戴雄泽
机构
湖南农业大学生物科学技术学院
湖南蔬菜工程技术重点实验室
出处
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2007年第34期11016-11018,共3页
基金
湖南蔬菜工程技术重点实验室开放基金资助
文摘
[目的]为了高效率地获得转基因植物的旁邻序列。[方法]以pUC18及pWM101为出发质粒,通过用限制性内切酶EcoRⅠ和HindⅢ双酶切质粒pUC18,得到含大肠杆菌复制起点及氨苄青霉素抗性基因的pUC18大片断,并将这段DNA整合到pWM101的T-DNA之中构建重组质粒。[结果]该质粒利用根癌农杆菌转化植物后,可利用潮霉素筛选转化细胞,拯救质粒则可转化大肠杆菌后,以氨苄青霉素进行筛选。[结论]该研究为以后的用T-DNA标签研究植物功能奠定了基础。
关键词
PUC18
pWM101
T-DNA标签
重
组构
建
Keywords
pUC18
pWM101
T-DNA tag
Recombination construction
分类号
Q782 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
丙型肝炎病毒抗原表位基因在新的抗原呈递系统中的重组构建及高效表达
被引量：
1
3
作者
彭梅
陈元鼎
刘名英
戴长柏
机构
中国医学科学院/中国协和医科大学医学生物学研究所
出处
《中华传染病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第4期219-223,T001,共6页
文摘
目的 将人工合成的丙型肝炎病毒 (HCV)E1区的抗原表位基因 ,构建到一种新的抗原表位呈递系统的高效表达载体pET RNA2中进行高效表达。方法 运用基因工程技术将人工合成的HCVE1区的抗原表位基因 ,构建到一种新的抗原表位呈递系统的高效表达载体 pET RNA2中 ,构成一个嵌合基因进行高效表达。在该载体适当的位置插入外源抗原表位可使其呈现一定的空间构象 ,使抗原表位位于重组蛋白的表面并有望改善其免疫原性。结果 分别在载体的 10 6、15 3、3 0 5位氨基酸处插入外源抗原表位基因 ,成功构建了重组质粒 pET RNA HCV/A1、pET RNA HCV/A2和pET RNA HCV/A3 ,并分别在大肠杆菌中进行高效表达。表达产物相对分子质量约为 4 5 0 0 0。初步研究结果表明 ,在特定条件下不需要异丙基 β D硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导就可使之获得高效表达 ,表达的嵌合蛋白占菌体总蛋白的 4 0 %以上。结论 HCV抗原表位基因成功构建到一种新的抗原呈递系统中并获得高效表达 ,为深入研究HCV抗原表位的免疫学和生物学特性奠定了基础 ,并对今后设计诊断试剂及抗原表位特异性疫苗有一定意义。
关键词
丙型肝炎病毒
抗原表位
抗原呈递系统
HCV
重
组构
建
基因表达
Keywords
Hepatitis C virus
Epitope,antigen
Presenting vector
Overexpression
分类号
R373.21 [医药卫生—病原生物学]
原文传递
题名
第三代腺病毒载体重组构建的优化
4
作者
宋小星
尤圣武
彭章龙
于布为
机构
上海交通大学医学院附属瑞金医院
出处
《国际病毒学杂志》
2007年第2期38-41,共4页
基金
国家自然科学基金资助,项目批号：30500479
文摘
第三代腺病毒载体以其高容量、长时间转基因表达及低毒性和低免疫原性的优点已经广泛应用于基因治疗中，目前这种病毒载体的重组构建已经有许多优化和改进。
关键词
第三代腺病毒
重
组构
建
优化
转基因表达
分类号
Q [生物学]
R [医药卫生]
原文传递
题名
高校优质教学资源重组构建共享系统研究
被引量：
1
5
作者
吴安艳
刘敏斯
机构
韶关学院网络与教育技术中心
出处
《软件导刊.教育技术》
2017年第11期37-39,共3页
基金
韶关学院第十五批校级教育教学改革立项项目(SYJY20141555)
文摘
随着信息技术与多媒体技术的发展,高校教学资源的建设既丰富又复杂,承载教学资源的平台也遍地开花,利用现有的平台和资源重构符合时代要求的优质教学资源,并进行有效的共享利用意义重大。调查当前高校当前的数字化教学资源及共享服务平台情况,分析现在流行的课程资源结构,构建既能嵌接现有平台,又能对当前资源进行组合重建的平台架构,以实现教学资源优化与共享目标。
关键词
优质教学资源
资源
重
组构
建
资源共享
分类号
G436 [文化科学—教育学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
小鼠酪氨酸羟化酶启动子克隆
朱孝荣
高秀先
朱园园
袁红花
孙怀昌
高殿帅
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008
3
下载PDF
职称材料
2
质粒拯救型T-DNA标签质粒的构建
张金谌
张学文
戴雄泽
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2007
1
下载PDF
职称材料
3
丙型肝炎病毒抗原表位基因在新的抗原呈递系统中的重组构建及高效表达
彭梅
陈元鼎
刘名英
戴长柏
《中华传染病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001
1
原文传递
4
第三代腺病毒载体重组构建的优化
宋小星
尤圣武
彭章龙
于布为
《国际病毒学杂志》
2007
0
原文传递
5
高校优质教学资源重组构建共享系统研究
吴安艳
刘敏斯
《软件导刊.教育技术》
2017
1
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职称材料
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