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刺桐胰蛋白酶抑制剂亲和层析填料的制备及应用 被引量：4
1
作者 陈嫚 任启生 +1 位作者 宋新荣 冯长根 《北京理工大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第2期172-175,共4页
研究用交联琼脂糖为载体 ,三聚氯氰为活化剂 ,刺桐胰蛋白酶抑制剂为配基 ,制备亲和填料的方法 .通过紫外和红外光谱分析 ,对制备的填料进行表征 .用制备的亲和填料吸附重组人组织型纤溶酶原激活剂突变体(reteplase,r- PA) ,研究吸附与... 研究用交联琼脂糖为载体 ,三聚氯氰为活化剂 ,刺桐胰蛋白酶抑制剂为配基 ,制备亲和填料的方法 .通过紫外和红外光谱分析 ,对制备的填料进行表征 .用制备的亲和填料吸附重组人组织型纤溶酶原激活剂突变体(reteplase,r- PA) ,研究吸附与解吸附条件 .结果表明 ,用该方法制备的亲和填料 ,制备工艺简单 ,吸附性能良好 ,对r- PA的吸附量为 8.76 mg· g- 1 .解吸附完全 ,不影响活性 ,可以用来分离纯化 r- PA. 展开更多
关键词 三聚氯氰 刺桐胰蛋白酶抑制剂 重组人组织型纤溶酶原激活剂突变体 亲和色谱
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重组人组织型纤溶酶原激活剂突变体基因的克隆、表达与生物活性鉴定 被引量：4
2
作者 任启生 陈嫚 +1 位作者 宋新荣 冯长根 《生物技术》 CAS CSCD 2004年第5期6-8,共3页
目的 :研究重组人组织型纤溶酶原激剂突变体 (reteplase,r -PA)基因的克隆和表达 ,并对表达产物进行活性鉴定。方法 :通过PCR的方法从t-PA基因上扩增得到r-PA基因的编码序列 ,并克隆到pUC19载体中 ,经DNA测序正确后 ,将该基因克隆到含... 目的 :研究重组人组织型纤溶酶原激剂突变体 (reteplase,r -PA)基因的克隆和表达 ,并对表达产物进行活性鉴定。方法 :通过PCR的方法从t-PA基因上扩增得到r-PA基因的编码序列 ,并克隆到pUC19载体中 ,经DNA测序正确后 ,将该基因克隆到含有T7启动子的高效表达质粒pJZ - 10 0中 ,转化E .coliBL2 1(DE3) ,得到含有r-PA基因的工程菌。工程菌经IPTG诱导表达 ,SDS -PAGE检测表达情况。提取包涵体 ,经过体外稀释法复性 ,亲和色谱层析纯化 ,测定产物的活性。结果 :表达的重组蛋白约占可溶性总蛋白的 2 0 % ,复性并纯化后测定活性为 5 80 0 0IU mg。结论 :成功构建了重组r-PA的表达质粒 ,表达产物具有良好的生物活性。 展开更多
关键词 重组人组织型纤溶酶原激活剂突变体 克隆 表达 生物活性
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重组人组织型纤溶酶原激活剂TNK突变体在中国健康人体的耐受性及药代动力学研究 被引量：10
3
作者 许莉 黄一玲 +4 位作者 华潞 田蕾 李飞鸥 况扶华 李一石 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期734-737,共4页
目的研究注射用重组人组织型纤溶酶原激活剂TNK突变体(rhTNK-tPA)在中国健康人体的耐受性和药代动力学特征。方法 26例健康男性受试者分为5个剂量组:0.1 mg·kg-12例,0.2 mg·kg-18例,0.4mg·kg-18例,0.6 mg·kg-12例,... 目的研究注射用重组人组织型纤溶酶原激活剂TNK突变体(rhTNK-tPA)在中国健康人体的耐受性和药代动力学特征。方法 26例健康男性受试者分为5个剂量组:0.1 mg·kg-12例,0.2 mg·kg-18例,0.4mg·kg-18例,0.6 mg·kg-12例,每次20 mg 6例,分别单次静脉注射相应剂量的rhTNK-tPA。0.2,0.4,0.6 mg·kg-1,每次20 mg组,受试者在进行耐受性试验的同时完成药代动力学试验。用酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定血浆rhTNK-tPA浓度。结果健康男性受试者静脉注射rhTNK-tPA 0.2,0.4,0.6mg·kg-1和每次20 mg后,Cmax分别为(16.44±2.64),(33.38±6.55),(41.45±11.00),(28.88±6.82)ng·L-1,t1/2分别为(147.00±47.00),(197.00±40.00),(190.00±19.00)和(224.00±60.00)min,AUC0-t分别为(15.79±4.36),(36.93±9.35),(37.54±5.89),(29.35±3.63)ng·L-1·h,Vd分别为(2.97±1.04),(3.23±0.75),(4.59±1.17)和(3.71±1.18)L。与试验药物相关不良事件发生率为23%,程度均为轻度,未经处理均自行消失。结论在研究剂量范围内,rhTNK-tPA呈线性动力学特征。每次15 mg到每次20 mg作为中国人溶栓治疗Ⅱ期临床试验的剂量可能是安全有效的剂量。 展开更多
关键词 注射用重组人组织型纤溶酶原激活剂TNK突变体 酶联免疫吸附实验 药代动力学 耐受性 健康受试者
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