肉鸡热应激的防治措施 被引量：1

1

作者 马雪云 张仰民 +2 位作者 陈无瑕 徐毅 侯宗良 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2002年第4期61-62,共2页

关键词 肉鸡 热应激 防治措施 饲喂方式 日粮营养水平 重复免疫

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单克隆抗体研究新进展 被引量：3

2

作者 杨唐斌 曲丽娜 《航天医学与医学工程》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期460-464,共5页

单克隆抗体技术是现代生命科学研究的重要工具 ,在基因和蛋白质的结构和功能研究方面有着不可或缺的作用。本文全面综述了单克隆抗体研究最新进展。通过构建真核表达载体 ,采用DNA免疫、细胞免疫、消减免疫和多位点重复免疫等现代分子... 单克隆抗体技术是现代生命科学研究的重要工具 ,在基因和蛋白质的结构和功能研究方面有着不可或缺的作用。本文全面综述了单克隆抗体研究最新进展。通过构建真核表达载体 ,采用DNA免疫、细胞免疫、消减免疫和多位点重复免疫等现代分子免疫学方法 ,快速制备高亲合力的单克隆抗体 ,改进常规方法制备单抗费时费力且亲合力低的弱点 ,对后基因时代蛋白质组学等基础研究领域的研究具有巨大的推动作用 ;同时在生物芯片。 展开更多

关键词 单克隆抗体 DNA免疫 细胞免疫 消减免疫 多位点重复免疫

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鸡免疫接种新方法

3

作者 陈德华 《农村新技术》 1996年第1期25-25,共1页

关键词 免疫接种 法氏囊炎 鸡新城疫 传染性支气管炎 新方法 饮水免疫法 肉用仔鸡 免疫效果 免疫应答反应 重复免疫

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富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1在垂体瘤中的表达及其预后意义 被引量：8

4

作者 张焱 祝新根 +2 位作者 程祖珏 沈晓黎 肖爵贤 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期639-640,F0004,共3页

目的 探讨富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1（LRIGl）在垂体瘤中的表达及意义.方法 应用免疫组织化学链菌素抗生物素蛋白-过氧化物酶（SP）法检测74例垂体瘤、20例正常脑组织中LRIG1的表达,分析其表达与患者预后的关系.结果 LRIG1... 目的 探讨富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1（LRIGl）在垂体瘤中的表达及意义.方法 应用免疫组织化学链菌素抗生物素蛋白-过氧化物酶（SP）法检测74例垂体瘤、20例正常脑组织中LRIG1的表达,分析其表达与患者预后的关系.结果 LRIG1在正常脑组织中的阳性表达率为100.0％,明显高于垂体瘤中的表达（54.1％）,差异有统计学意义（P＜0.05）.同时,LRIG1在非侵袭性垂体瘤中的阳性表达率为66.7％,明显高于在侵袭性垂体瘤中的表达（20.0％）.Kaplan-Meier生存分析表明LRIG1及垂体瘤类型与患者的预后明显相关（P＜0.05）.Cox多因素生存分析表明LRIGI可作为患者预后评估的独立因素.结论 LRIG1参与了垂体瘤的发生及发展,低表达患者预后较差. 展开更多

关键词 富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1 垂体瘤 预后

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LRIG1过表达对顺铂诱导的胶质瘤细胞凋亡的影响及其机制 被引量：7

5

作者 肖群根 张涛 +5 位作者 毛峰 王莹 谢蕊繁 王宝峰 郭东生 雷霆 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期656-659,664,共5页

目的研究过表达富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1(leucine-rich repeats and immunoglobulin-like do-mains-1,LRIG1)对顺铂(cisplatin,CDDP)诱导的胶质瘤细胞U251凋亡的影响及其机制。方法应用脂质体介导的基因转染技术将对照质粒(... 目的研究过表达富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1(leucine-rich repeats and immunoglobulin-like do-mains-1,LRIG1)对顺铂(cisplatin,CDDP)诱导的胶质瘤细胞U251凋亡的影响及其机制。方法应用脂质体介导的基因转染技术将对照质粒(EGFP-N1)及LRIG1质粒(EGFP-N1-LRIG1)分别转染胶质瘤细胞系U251,设为对照组和LRIG1过表达组,用Real-time PCR检测转染后LRIG1表达水平;用AnnexinⅤ/7AAD双标流式细胞术检测细胞凋亡;用Western blot检测各目的蛋白表达水平。结果 LRIG1过表达组LRIG1mRNA及蛋白均较对照组明显增高;0、10、20μg/mL CDDP作用下,LRIG1过表达组细胞凋亡率均明显高于对照组(P<0.01);随着CDDP浓度增加,胶质瘤细胞U251磷酸化表皮生长因子受体(P-EGFR)表达增加;不同浓度CDDP作用下,LRIG1过表达组P-EGFR水平均较对照组明显降低,促凋亡蛋白Bax,Caspase-3表达增加,抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低。结论 LRIG1通过下调P-EGFR水平而促进顺铂诱导的胶质瘤细胞凋亡,增强胶质瘤细胞对顺铂的敏感性。 展开更多

关键词 富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1 顺铂 胶质瘤 细胞凋亡

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胃癌组织中Lrig1与EGFR基因表达 被引量：6

6

作者 董晨 李红 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期819-822,共4页

目的探讨富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1(Lrig1)和表皮生长因子受体(EGFR)在人体胃癌组织中的表达情况和临床意义。方法采用免疫组化二步法检测Lrig1和EGFR蛋白在67例胃癌组织和相应癌旁正常胃组织中的表达情况,分析其与临床病理... 目的探讨富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1(Lrig1)和表皮生长因子受体(EGFR)在人体胃癌组织中的表达情况和临床意义。方法采用免疫组化二步法检测Lrig1和EGFR蛋白在67例胃癌组织和相应癌旁正常胃组织中的表达情况,分析其与临床病理参数的相关性;通过RT-PCR检测Lrig1和EGFR mRNA在67例胃癌组织中和相应癌旁正常胃组织的相对表达量。结果 Lrig1在胃癌组织中的阳性表达率(35.8%,24/67)低于正常胃组织(91.0%,61/67),而EGFR在胃癌组织中的阳性表达(58.2%,39/67)明显高于正常胃组织(7.5%,5/67),差异具有统计学意义(P<0.05)。Lrig1和EGFR的表达均与患者年龄、性别及肿瘤大小无关(P>0.05),而与肿瘤的分化程度、TNM分期、淋巴结转移均呈显著相关(P<0.05);胃癌组织中Lrig1 mRNA表达水平(0.43±0.16)较相应癌旁正常组织(1.06±0.21)降低,而EGFR mRNA表达水平(3.27±0.67)高于相应癌旁正常组织(1.33±0.28),P<0.05。Lrig1和EGFR mRNA在胃癌组织中的表达水平呈明显负相关(r=-0.874,P<0.01)。结论 Lrig1在胃癌组织中存在低表达,提示Lrig1在参与胃癌的发生发展过程中可能起着抑癌基因的作用,EGFR在胃癌组织中的高表达提示EGFR可能在胃癌的发病机制中和生长增殖中发挥关键作用;胃癌组织中Lrig1与EGFR的表达呈负相关,提示Lrig1可能存在对EGFR的负反馈调节,二者在正常情况下保持一定的平衡。 展开更多

关键词 胃癌 富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1(Lrig1) 表皮生长因子受体(EGFR) 免疫组织化学逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)

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LRIG3基因对脑胶质瘤细胞系U87和U251的细胞周期、侵袭性和凋亡的影响 被引量：4

7

作者 杨洪宽 毛峰 +4 位作者 万锋 张华楸 王宝峰 郭东生 雷霆 《中国临床神经外科杂志》 2011年第4期220-223,共4页

目的探讨过表达的富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白3(LRIG3)基因对脑胶质瘤细胞系U251和U87的细胞周期、侵袭能力和凋亡的影响。方法将过表达的LRIG3质粒(实验组)和空白质粒(对照组)经慢病毒法感染胶质瘤细胞系U251和U87,筛选稳定细... 目的探讨过表达的富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白3(LRIG3)基因对脑胶质瘤细胞系U251和U87的细胞周期、侵袭能力和凋亡的影响。方法将过表达的LRIG3质粒(实验组)和空白质粒(对照组)经慢病毒法感染胶质瘤细胞系U251和U87,筛选稳定细胞株,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Westernblot检测LRIG3表达的变化,碘化丙啶染色后用流式细胞仪测定细胞周期的变化,TransWell小室法检测细胞的侵袭能力,用免疫组化原位末端标记法(TUNEL)检测各组凋亡细胞。结果与对照组相比,实验组U251与U87细胞中LRIG3mRNA水平分别上升67.6%和79.9%,蛋白表达水平分别升高62.3%和91.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组U251细胞中S期与G2/M期细胞数之和低于对照组,有统计学意义(P<0.05);但U87细胞与对照组比无明显差异。实验组U251细胞中穿出细胞数量均明显少于对照组(P<0.05),TUNEL染色结果显示对照组U251细胞凋亡率为23.4%,实验组为35.7%;对照组U87细胞凋亡率为20.2%,实验组为39.5%;对照组与实验组间凋亡率均有明显差异(P<0.05)。结论 LRIG3基因过表达能阻断细胞周期于S期和G2/M期,降低胶质瘤细胞的侵袭能力,加速细胞凋亡。 展开更多

关键词 胶质瘤 细胞周期 富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白3 免疫组化

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食管鳞状细胞癌组织中LRIG3和EGFR蛋白的表达 被引量：4

8

作者 尤超 温洪涛 关冰 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2012年第2期147-150,共4页

目的:探讨LRIG3和EGFR蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及其意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测60例食管鳞状细胞癌、60例食管正常组织中LRIG3及EGFR的表达水平。结果:LRIG3蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的阳性表达率低于食管正常组织(χ2=... 目的:探讨LRIG3和EGFR蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及其意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测60例食管鳞状细胞癌、60例食管正常组织中LRIG3及EGFR的表达水平。结果:LRIG3蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的阳性表达率低于食管正常组织(χ2=60.480,P<0.001),EGFR蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的阳性表达率高于食管正常组织(χ2=32.976,P<0.05)。LRIG3和EGFR的表达与食管鳞状细胞癌的分化程度、淋巴结转移、肿瘤分期有关(χ2=3.939和4.318、4.374和5.910、5.293和5.884,P<0.05),与性别、年龄无关。LRIG3和EGFR蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的表达呈负关联(rP=0.264,P=0.034)。结论:LRIG3表达下降和EGFR表达升高可能在食管鳞状细胞癌的发生发展中起重要作用。 展开更多

关键词 富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白3 表皮生长因子受体 食管 鳞状细胞癌

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信号转导和转录激活因子3信号通路在多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1诱导U251细胞凋亡中的作用 被引量：4

9

作者 邓钢 郭振涛 +6 位作者 田道锋 刘宝辉 朱晓楠 冀保卫 易伟 吴立权 陈谦学 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期722-724,共3页

目的探讨信号转导和转录激活因子3 （STAT3）信号通路在多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白l（LRIGl）诱导人脑胶质瘤细胞株U251细胞凋亡中的作用及机制。方法传代培养U251细胞，随机分为对照组、空载体组及实验组，应用脂质体介导的基因... 目的探讨信号转导和转录激活因子3 （STAT3）信号通路在多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白l（LRIGl）诱导人脑胶质瘤细胞株U251细胞凋亡中的作用及机制。方法传代培养U251细胞，随机分为对照组、空载体组及实验组，应用脂质体介导的基因转染技术分别将磷酸盐缓冲液（PBS）、PEGFP-N1质粒体、PEGFP-LRIG1质粒体转染入各组细胞，应用细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测细胞体外生长活性，膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素（Annexin V-FITC）/碘化丙锭（PI）法经流式检测各组细胞凋亡率，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法测定各组细胞中STAT3的mRNA表达，Westernblot法测定各组细胞中STAT3、磷酸化STAT3（p-STAT3）、B淋巴细胞/白血病-2（ bcl-2）、bax的蛋白表达。结果成功转染LRIG1，实验组细胞中LRIG1基因表达明显上调（P〈0.05）;实验组细胞增殖显著受抑，48 h抑制率为（45. 12 ±0. 68）%，72h抑制率为（52. 24 ± 1. 77）%，总凋亡率由（2. 54 土0. 43）%增高至（22. 51 ±2. 12）%（P〈0. 05） ； RT-PCR检测显示实验组细胞中STAT3 mRNA表达明显降低;Western blot检测显示实验组细胞中STAT3蛋白表达及磷酸化水平明显降低，bcl-2表达明显降低，bax表达明显升高。结论LRIG1可促进U251细胞凋亡，其机制可能是通过下调STAT3信号通路，进而抑制STAT3激活的抗凋亡途径。 展开更多

关键词 胶质瘤 多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1 信号转导和转录激活因子3 脱噬作用

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眼睑基底细胞癌组织中LRIG1、EGFR及GLI1的表达及其相关性研究

10

作者 王爱莲 高含笑 +2 位作者 宋文庆 音林康 孙玉娴 《中华解剖与临床杂志》 2024年第8期546-551,共6页

目的:探讨眼睑基底细胞癌组织中亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样域蛋白-1(LRIG1)、表皮生长因子受体(EGFR)及神经胶质瘤关联癌基因同源物1(GLI1)的表达情况及其相关性。方法:病例系列报告。纳入蚌埠医科大学第一附属医院2016年1月—2020... 目的:探讨眼睑基底细胞癌组织中亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样域蛋白-1(LRIG1)、表皮生长因子受体(EGFR)及神经胶质瘤关联癌基因同源物1(GLI1)的表达情况及其相关性。方法:病例系列报告。纳入蚌埠医科大学第一附属医院2016年1月—2020年11月病理确诊的55例眼睑基底细胞癌患者,其中男26例、女29例,年龄52~89(69.1±9.0)岁。选取55例患者手术切除后保留的癌组织标本,并随机抽取其中22例患者的癌旁正常皮肤组织标本作为对照。观察指标:(1)采用免疫组织化学染色检测并比较LRIG1、EGFR及GLI1在眼睑基底细胞癌组织与癌旁正常皮肤组织中的阳性表达率;(2)比较LRIG1、EGFR及GLI1在不同性别、不同年龄(≥65岁和<65岁)、不同肿块大小(≥2.0 cm和<2.0 cm)患者癌细胞中表达的差异。(3)分析LRIG1、EGFR及GLI1三种蛋白表达水平的相关性。结果:(1)LRIG1在眼睑基底细胞癌组织中阳性表达率为16.4%(9/55),低于在癌旁正常皮肤组织中的阳性表达率72.7%(16/22);而EGFR和GLI1在眼睑基底细胞癌组织中阳性表达率分别为72.7%(40/55)及70.9%(39/55),均高于在癌旁正常皮肤组织中的阳性表达率31.8%(7/22)、27.3%(6/22):差异均有统计学意义(χ^(2)=22.77、11.06、12.32,P值均<0.05)。(2)GLI1、EGFR、LRIG1表达在不同性别、不同年龄及不同肿块大小的患者间差异均无统计学意义(P值均>0.05)。(3)Spearman相关分析表明,55例眼睑基底细胞癌组织中,LRIG1表达分别与EGFR、GLI1表达呈负相关(r=-0.279,P=0.039;r=-0.306,P=0.023);EGFR表达与GLI1表达呈正相关(r=0.499,P<0.001)。结论:EGFR及GLI1在眼睑基底细胞癌组织中均呈高表达,LRIG1呈低表达并分别与两者呈负相关;EGFR及GLI1蛋白可能会导致眼睑基底细胞癌的发生和发展,而LRIG1对癌症的发生发展可能起抑制作用。 展开更多

关键词 眼睑肿瘤 基底细胞癌 亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样域蛋白-1 表皮生长因子受体 神经胶质瘤关联癌基因同源物1

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胶质母细胞瘤病人血清sLRIG3水平检测的临床意义

11

作者 袁少勇 姜玲 潘华 《中国临床神经外科杂志》 2024年第8期469-472,486,共5页

目的探讨血清可溶性人类富含亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样结构域3(sLRIG3)预测胶质母细胞瘤(GBM)预后的价值。方法2019年9月至2022年12月前瞻性收集60例GBM的肿瘤样本和血清样本,另外收集同期健康60例的血清样本作为对照,采用酶联免疫... 目的探讨血清可溶性人类富含亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样结构域3(sLRIG3)预测胶质母细胞瘤(GBM)预后的价值。方法2019年9月至2022年12月前瞻性收集60例GBM的肿瘤样本和血清样本,另外收集同期健康60例的血清样本作为对照,采用酶联免疫吸附法测定血清sLRIG3水平,采用免疫组织化学染色检测肿瘤组织LRIG3的表达。GBM病人随访至死亡或2023年12月31日,记录无进展生存期(PFS)和总生存期(OS)。结果GBM病人血清sLRIG3水平[(2.84±0.89)ng/ml]显著低于对照组[(4.62±2.16)ng/ml;P<0.001]。免疫组化染色显示,LRIG3高表达38例(63.33%),低表达22例。GBM组织LRIG3高表达病人血清sLRIG3水平[(1.98±0.33)ng/ml]明显低于低表达病人[(3.33±0.72)ng/ml;P<0.001]。60例GBM病人随访12~48个月,中位PFS为12.50(IQR:8.78~21.30个月);中位OS为16.40(IQR:10.13~24.70个月)。肿瘤进展GBM病人血清sLRIG3水平[(2.74±0.84)ng/ml]明显低于无肿瘤进展病人[(3.92±0.72)ng/ml;P=0.004]。死亡GBM病人血清sLRIG3水平[(2.42±0.71)ng/ml]明显低于存活病人[(3.47±0.76)ng/ml;P<0.001]。多因素Cox比例回归风险模型分析显示,血清sLRIG3水平降低是GBM病人死亡的独立预测因素。Kaplan-Meier曲线分析显示,血清sLRIG3水平<3.23 ng/ml的GBM病人的中位OS明显缩短(P=0.016)。结论GBM病人血清sLRIG3显著降低,与病人的不良预后密切相关。 展开更多

关键词 胶质母细胞瘤 可溶性人类富含亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样结构域3(sLRIG3) 血清 生存预后

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Survivin和富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白2在人膀胱移行细胞癌组织中的表达及临床意义 被引量：3

12

作者 黄亮 陈志坚 +2 位作者 余剑书 万锋 朱朝辉 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1595-1597,共3页

目的探讨Survivin和富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白2（LRIG2）基因及其产物在人膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学检测72例膀胱癌组织病理标本中的Smvivin和LRIG2的表达，每例标本均选用癌组织中心、癌旁组织及其... 目的探讨Survivin和富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白2（LRIG2）基因及其产物在人膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学检测72例膀胱癌组织病理标本中的Smvivin和LRIG2的表达，每例标本均选用癌组织中心、癌旁组织及其远端正常黏膜对照。结果免疫组织化学显示Survivin蛋白在正常膀胱黏膜中无表达，在膀胱癌组织中表达明显高于癌旁组织，阳性率分别为90．28％、33．33％，Survivin蛋白在膀胱癌不同病理分级中的阳性表达率分别为Gl组72．22％、G2组90．48％、G3组100．00％；在膀胱癌临床分期Ta～Tis、T1～12的阳性表达率分别81．25％、97．50％；在淋巴结转移组和非淋巴结转移组的阳性表达率为96．00％、85．11％，随着病理分级、临床分期的升高和淋巴结转移的卅现，Survivin蛋白表达水平逐渐升高，各组间差异有统计学意义（P〈0．05）；LRIG2在膀胱移行细胞癌中的阳性表达率显著低于癌旁组织和正常膀胱黏膜组织，并随组织病理分级、分期的增高和淋巴结转移的卅现，LRIG2阳性表达率逐渐下降，差异有统计学意义（P〈0．05）；提示Survivin和LRIG2表达呈负相关（r=-0．487，P〈0．01）。结论Survivin和LRIG2基因表达与膀胱移行细胞癌的分级、分期、淋巴结转移有关，Survivin过表达和LRIG2基因突变或缺失在膀胱移行细胞癌的发生发展中可能起重要作用。 展开更多

关键词 SURVIVIN 富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白2 膀胱移行细胞癌

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LRIG1基因对胶质瘤SHG44的放疗增敏作用 被引量：3

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作者 方园 张仕涛 +5 位作者 屈建强 张世荣 樊欣鑫 朱莽 罗强 王文涛 《中华神经外科疾病研究杂志》 CAS 2018年第4期301-304,共4页

目的研究亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)对人脑胶质瘤细胞系44细胞(SHG44)的放疗增敏作用。方法采用分子克隆技术,将构建的重组质粒p EGFP-C1-LRIG1转染SHG44,并稳定表达后在荧光显微镜下观察;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术... 目的研究亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)对人脑胶质瘤细胞系44细胞(SHG44)的放疗增敏作用。方法采用分子克隆技术,将构建的重组质粒p EGFP-C1-LRIG1转染SHG44,并稳定表达后在荧光显微镜下观察;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术研究放射照射后SHG44中目的基因LRIG1和表皮生长因子受体(EGFR)的信使核糖核酸(mRNA)表达情况;免疫组织化学法分析照射后SHG44中LRIG1和EGFR的蛋白表达差异;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法分析干预后SHG44的细胞增殖能力;细胞侵袭实验(Transwell)分析干预后SHG44的肿瘤侵袭能力。结果重组质粒p EGFP-C1-LRIG1转染SHG44细胞可稳定表达LRIG1;SHG44+p EGFP-C1-LRIG1细胞相对于SHG44、SHG44+p EGFP-C1细胞,LRIG1与EGFR基因的mRNA和蛋白的表达水平有显著差异(P<0.01);且SHG44+p EGFP-C1-LRIG1细胞的细胞活性及侵袭能力较SHG44、SHG44+p EGFP-C1细胞明显下降(P<0.01)。结论在胶质瘤SHG44细胞中过表达LRIG1基因可通过下调EGFR表达,抑制SHG44细胞的恶性生物学行为,增加放疗敏感性。 展开更多

关键词 人脑胶质瘤细胞系44 亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1 表皮生长因子受体 放疗增敏 真核表达质粒

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微小RNA-4295靶向调控多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1对脑胶质瘤细胞增殖、侵袭和上皮-间充质转化的影响 被引量：3

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作者 王剑新 王紫括 王斌 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1603-1606,共4页

目的观察微小RNA(miRNA,miR)-4295靶向调控多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)对脑胶质瘤细胞增殖、侵袭和上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法选取2018年6月到2020年4月经手术切除的120例脑胶质瘤及癌旁组织作为研究对象,采用荧光... 目的观察微小RNA(miRNA,miR)-4295靶向调控多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)对脑胶质瘤细胞增殖、侵袭和上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法选取2018年6月到2020年4月经手术切除的120例脑胶质瘤及癌旁组织作为研究对象,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析胶质瘤组织和癌旁组织中miR-4295表达水平。采用慢病毒在脑胶质瘤细胞系U251建立miR-4295沉默细胞系(实验组)和对照细胞系(对照组)。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)分析两组细胞增殖能力;采用Transwell分析细胞侵袭能力;采用蛋白质印迹法(Western blot)分析对照组和实验组EMT标志物表达变化。生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-4295基因,并分析对照组和实验组细胞靶蛋白表达水平。组间数据比较采用t检验。结果与癌旁组织(1.29±0.20)比较,脑胶质瘤组织中miR-4295表达水平(2.81±0.19)显著增加,差异有统计学意义(t=2.809,P<0.05)。与对照组(1.07±0.15)比较,实验组细胞miR-4295表达水平(0.38±0.11)显著下调,差异有统计学意义(t=2.441,P<0.05)。与对照组细胞48 h吸光度(A)值(1.61±0.25)比较,实验组细胞48 h A值(1.22±0.18)显著下降,差异有统计学意义(t=2.091,P<0.05)。与对照组细胞[(89.27±9.10)个]比较,实验组侵袭细胞数量[(32.49±5.94)个]显著下降,差异有统计学意义(t=4.109,P<0.05)。与对照组细胞N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)蛋白表达水平(1.13±0.13、1.20±0.19)比较,实验组细胞N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平(0.30±0.11、0.37±0.12)显著下调,差异有统计学意义(t=3.091、2.861,P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶报告基因显示LRIG1是miR-4295靶基因。癌旁组织中LRIG1相对表达水平(1.05±0.22)比较,肿瘤组织LRIG1相对表达水平(0.23±0.11)显著下调,差异有统计学意义(t=3.021,P<0.05)。与对照组细胞LRIG1相对表达水平(0.35±0.13)比较,实验组细胞LRIG1相对表达水平(0.89±0.17) 展开更多

关键词 微小RNA-4295 多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1 脑胶质瘤 增殖 侵袭 上皮-间充质转化

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LRIG1相关功能片段对EGFR活性和胶质瘤细胞增殖的影响 被引量：3

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作者 丁昊 周志伟 +3 位作者 易伟 雷霆 简志宏 刘仁忠 《中国临床神经外科杂志》 2015年第9期544-546,575,共4页

目的探讨人多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)相关功能片段对表皮生长因子受体(EGFR)下游信号通路的影响及对人脑胶质瘤细胞增殖活性的影响。方法构建缺失LRIG1胞内段(LRIG1-ET)的和缺失LRIG1胞外段(LRIG1-TC)的真核表达质粒,将... 目的探讨人多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)相关功能片段对表皮生长因子受体(EGFR)下游信号通路的影响及对人脑胶质瘤细胞增殖活性的影响。方法构建缺失LRIG1胞内段(LRIG1-ET)的和缺失LRIG1胞外段(LRIG1-TC)的真核表达质粒,将这两个质粒及LRIG1全长(LRIG1-FL)质粒分别转染脑胶质瘤U251细胞系和原代星形胶质细胞瘤细胞,用蛋白质印迹技术检测EGFR下游信号蛋白有丝分裂原活化蛋白激酶激酶(MAPKK/MEK)的磷酸化水平,用MTT法检测转染细胞的增殖活性。结果全长LRIG1、LRIG1胞外段、LRIG1胞内段对人脑U251细胞和原代胶质瘤细胞的增殖活性均有抑制作用;全长LRIG1蛋白的抑制作用最强,其次为胞内段,再次为胞外段。全长LRIG1、LRIG1胞外段、LRIG1胞内段均使原代星形胶质细胞瘤细胞的MEK蛋白磷酸化水平下降。结论 LRIG1全长、胞外段、胞内段均能通过抑制EGFR下游信号抑制U251细胞和原代星形胶质瘤细胞的细胞增殖;LRIG1胞外段和胞内段具有独立的功能,均有可能对人脑胶质瘤的治疗发挥重要作用。 展开更多

关键词 胶质瘤 多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1 表皮细胞生长因子受体 细胞增殖

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LRIG1抑制人脑胶质瘤细胞增殖的研究 被引量：3

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作者 郭振涛 刘宝辉 +3 位作者 邓钢 田道锋 张申起 陈谦学 《中国临床神经外科杂志》 2013年第10期606-609,共4页

目的探讨多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)对人脑胶质瘤细胞增殖的影响。方法分别构建携带LRIG1、LRIG1小干扰RNA、Bcl2和胶质细胞源性生长因子(BDMF)的质粒,将它们分别转染到人脑胶质瘤细胞系U251细胞内,应用细胞计数试剂盒8法... 目的探讨多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)对人脑胶质瘤细胞增殖的影响。方法分别构建携带LRIG1、LRIG1小干扰RNA、Bcl2和胶质细胞源性生长因子(BDMF)的质粒,将它们分别转染到人脑胶质瘤细胞系U251细胞内,应用细胞计数试剂盒8法检测细胞活性的变化,蛋白印迹法检测LRIG1、Bcl2、拓扑异构酶Ⅱ(topoⅡ)、GDNF的表达变化。结果成功构建携带LRIG1、LRIG1小干扰RNA、Bcl2、GDNF的质粒,并成功转入U251细胞株。过表达LRIG1显著抑制U251细胞增殖。蛋白印迹法结果显示LRIG1的表达和Bcl2、topoⅡ和GDNF的表达呈显著负相关。结论LRIG1通过负性调节Bcl2、topoⅡ和GDNF的表达抑制人脑胶质瘤细胞系U251细胞的增殖。 展开更多

关键词 胶质瘤 U251细胞 多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1 细胞增殖

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下调微小RNA-19a对胶质瘤细胞侵袭能力的影响及机制 被引量：3

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作者 邵灵敏 陈谦学 +3 位作者 吴庭枫 李云涛 李继强 刘骏辉 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期336-339,共4页

目的 探讨下调微小RNA（miR）-19a的表达对人脑胶质瘤细胞株U87侵袭能力的影响及其机制.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测转染miR-19a抑制物的效率.转染后48 h,采用Western blot法检测U87细胞中多亮氨酸重复区免疫球蛋... 目的 探讨下调微小RNA（miR）-19a的表达对人脑胶质瘤细胞株U87侵袭能力的影响及其机制.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测转染miR-19a抑制物的效率.转染后48 h,采用Western blot法检测U87细胞中多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1（LRIG1）的表达,并通过Transwell实验检测U87细胞的侵袭能力.构建报告质粒,于转染后72 h用荧光素酶报告实验验证miR-19a和LRIG1的相互作用.结果 FQ-PCR结果显示转染miR-19a抑制物后,U87中miR-19a的表达量较对照组降低了（78.2±5.1）％,差异有统计学意义（P＜0.01）.转染miR-19a抑制物后,U87穿膜细胞数较对照组明显减少,分别为（25.9±3.9）个和（85.3±6.1）个（P＜0.01）.荧光素酶报告实验结果显示,下调miR-19a后野生型报告质粒的荧光素酶活性较对照组升高（4.89±0.26）倍（P＜0.01）,而突变型质粒的荧光素酶活性较对照组无明显变化.Transwell实验结果表明在下调miR-19a后,LRIG1沉默组的穿膜细胞数较对照组明显增加,分别为（47.8±3.1）个和（22.7±4.2）个（P＜0.05）.结论 下调miR-19a可以抑制U87细胞的侵袭力,其机制可能是上调LRIG1的表达. 展开更多

关键词 胶质瘤 微小RNA-19a 多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1 侵袭

原文传递

微小RNA-183对胃癌细胞增殖和迁移的影响及其分子机制 被引量：3

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作者 程勇 韩广森 +3 位作者 顾焱晖 张世甲 王振雷 翟科伟 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期405-407,共3页

目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-183对胃癌细胞增殖和迁移的影响及其分子机制。方法选取2016年6月到2019年6月在郑州大学附属肿瘤医院收集的胃癌和癌旁组织作为研究对象,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析胃癌和癌旁组织中miR-183表达水平... 目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-183对胃癌细胞增殖和迁移的影响及其分子机制。方法选取2016年6月到2019年6月在郑州大学附属肿瘤医院收集的胃癌和癌旁组织作为研究对象,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析胃癌和癌旁组织中miR-183表达水平;在胃癌细胞株MKN-28中采用慢病毒建立对照miRNA和miR-183过表达细胞株(miR-NC组和miR-183组),采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和Tranwell分析两组细胞增殖和迁移能力;异体移植瘤模型分析两组细胞在体内的增殖能力;采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-183靶基因,并分析靶基因对胃癌细胞增殖和迁移的影响。采用t检验分析两组的数值的统计学意义,组间比较采用t检验。结果与癌旁组织miR-183表达水平(1.02±0.16)比较,胃癌组织中miR-183表达水平(2.74±0.24)显著增加,差异有统计学意义(t=2.891,P<0.05)。体外和体内细胞增殖实验证实,与miR-NC组细胞(1.18±0.15)、(1028.34±129.38)mm3比较,miR-183组细胞肿瘤体积增殖(1.82±0.23)、(1927.34±209.38)mm3显著增加,差异均有统计学意义(F=3.711,P<0.05;F=2.981,P<0.05)。与miR-NC组细胞迁移数[(74.44±8.43)个]比较,miR-183组细胞迁移数量[(171.34±12.78)个]显著增加,差异有统计学意义(t=3.910,P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶基因证实多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)是miR-183的靶基因。与miR-NC组细胞LRIG1蛋白表达水平(1.25±0.17)比较,miR-183组细胞LRIG1蛋白表达水平(0.48±0.17)显著下调,差异有统计学意义(t=3.719,P<0.05)。结论miR-183在胃癌中呈高表达,通过调控LRIG1蛋白表达调控着胃癌的增殖和迁移。 展开更多

关键词 微小RNA-183 胃癌 增殖 迁移 多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1

原文传递

LRIG1在卵巢浆液性囊腺癌细胞对依托泊苷敏感性中的作用研究 被引量：3

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作者 阳华 叶元 +2 位作者 肖胜军 雷小妹 罗小红 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第11期1-7,共7页

目的探讨亮氨酸重复序列免疫球蛋白样结构域基因-1(LRIG1)在卵巢浆液性囊腺癌(SKOV3)细胞株中对依托泊苷敏感性的可能机制。方法噻唑蓝比色法(MMT)检测不同浓度VP16干预下48 h的SKOV3细胞组、siRNA LRIG1转染SKOV3细胞组、SKOV3/VP16细... 目的探讨亮氨酸重复序列免疫球蛋白样结构域基因-1(LRIG1)在卵巢浆液性囊腺癌(SKOV3)细胞株中对依托泊苷敏感性的可能机制。方法噻唑蓝比色法(MMT)检测不同浓度VP16干预下48 h的SKOV3细胞组、siRNA LRIG1转染SKOV3细胞组、SKOV3/VP16细胞组和siRNA LRIG1转染SKOV3/VP16细胞组的增殖。平板克隆检测细胞增殖,流式检测细胞凋亡情况,实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测LRIG1mRNA表达。结果半抑制浓度(IC50)分别为62.90、115.49、156.50和195.42μg/L,siRNA LRIG1转染SKOV3、SKOV3/VP16和siRNA LRIG1转染SKOV3/VP16的耐药指数分别为1.8、2.5和3.1。SKOV3、siRNA LRIG1转染SKOV3、SKOV3/VP16和siRNA LRIG1转染SKOV3/VP16细胞组的克隆率(F=39.338,P=0.000),细胞的LRIG1 mRNA(F=63.095,P=0.000)和凋亡细胞(F=230.046,P=0.000)明显不同,与SKOV3比较,siRNA LRIG1转染SKOV3、SKOV3/VP16和siRNA LRIG1转染SKOV3/VP16细胞的克隆率增加(t=0.026、0.0710和0.125,P=0.042、0.000和0.000),细胞的LRIG1 mRNA降低(t=0.130、0.525和0.825,均P=0.000),凋亡细胞减少(t=12.350、35.506和44.412,均P=0.000),与siRNA LRIG1转染SKOV3比较,SKOV3/VP16和siRNA LRIG1转染SKOV3/VP16细胞的克隆率增加(t=0.044和0.099,P=0.001和0.000),LRIG1 mRNA降低(t=0.395和0.695,均P=0.000),凋亡细胞减少(t=23.156和32063,均P<0.05),与SKOV3/VP16比较,siRNA LRIG1转染SKOV3/VP16细胞的克隆率增加(t=0.055,P=0.000),细胞的LRIG1 mRNA降低(t=0.300,P=0.000),凋亡细胞减少(t=8.906,P=0.000)。结论 LRIG1 mRNA影响SKOV3细胞对药物的敏感性,沉默LRIG1的耐药细胞可抑制SKOV3细胞凋亡。 展开更多

关键词 卵巢癌 耐药 亮氨酸重复序列免疫球蛋白样结构域基因-1

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应用T7噬菌体展示技术筛选与sLRIG1亲和结合蛋白 被引量：3

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作者 朱锡群 易伟 《医学研究杂志》 2018年第11期49-51,共3页

目的用T7噬菌体展示技术(phage-displayed technique,PDT)筛选与可溶性多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1(soluble leucine-rich repeats and immunoglobulin-like domains 1,s LRIG1)相互作用的蛋白,为进一步研究sLRIG1作用于人脑胶质... 目的用T7噬菌体展示技术(phage-displayed technique,PDT)筛选与可溶性多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1(soluble leucine-rich repeats and immunoglobulin-like domains 1,s LRIG1)相互作用的蛋白,为进一步研究sLRIG1作用于人脑胶质瘤的机制找到突破点。方法利用BacPAK6杆状病毒蛋白表达系统(baculovirus expression system,BEVS)获得人sLRIG1重组蛋白,以该蛋白为靶标,采用亲和淘洗方法经6轮筛选人肝细胞cDNA T7噬菌体展示文库;随机挑选96个筛选到的噬菌体行PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳回收DNA片段并送测序。结果经过6轮筛选,噬菌体投入和产出量比达1. 85×10~6PFU,趋于稳定。回收的DNA片段多在250～750bp,纯化回收后得到35个克隆样本,送测序后得到35条有效表达序列标签,对其行同源性搜索及功能预测等生物信息学分析,最终获得12个可能与sLRIG1蛋白有相互作用的蛋白或多肽,这些蛋白大多与肿瘤相关。结论通过PDT可获得与sLRIG1蛋白相互结合的蛋白,这些结果为下一步研究sLRIG1的生物功能及其对人脑胶质瘤的作用及机制奠定了基础。 展开更多

关键词 T7噬菌体 可溶性多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1 胶质瘤 相互作用蛋白

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