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蛋白芯片生产用醛基化玻片制备的条件优化及初步检定
被引量:
8
1
作者
丁亚平
倪世明
+7 位作者
陈立炎
张文
曹恒杰
罗予春
周枚芬
梁好
凌志光
王升启
《生物技术通讯》
CAS
2002年第6期445-447,450,共4页
建立一种以玻片为基质的蛋白芯片制备的优化及检定方法。将经过清洗处理的玻片,用不同浓度的氨基硅烷试剂和戊二醛试剂,在不同的时间内,进行氨基化和醛基化处理,通过蛋白结合强度与处理时间及溶剂浓度的动力学相关性分析,确定最佳的优...
建立一种以玻片为基质的蛋白芯片制备的优化及检定方法。将经过清洗处理的玻片,用不同浓度的氨基硅烷试剂和戊二醛试剂,在不同的时间内,进行氨基化和醛基化处理,通过蛋白结合强度与处理时间及溶剂浓度的动力学相关性分析,确定最佳的优化条件,将不同浓度梯度的人IgG抗体结合于该玻片表面,经过洗涤、封闭,再加入Cy3荧光标记的二抗,孵育,洗涤后检测各点的荧光强度,确定其线性范围及其检测灵敏度。氨基硅烷试剂浓度为5%,作用时间为30min;戊二醛试剂浓度为2.5%,作用时间为60min时,蛋白结合强度达到饱和。蛋白芯片在2~2×4-7mg/ml浓度范围内有良好的线性,能够检测出人IgG的最低浓度为2×4-8mg/ml。
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关键词
蛋白芯片
醛
基化
玻片
制备
条件优化
检定
氨基硅烷
戊二
醛
下载PDF
职称材料
蛋白质芯片制作条件的优化
被引量:
6
2
作者
江凌晓
郭兆彪
+4 位作者
陈泽良
王津
王红霞
俞守义
杨瑞馥
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2004年第11期1230-1232,共3页
目的探讨以醛基化玻片为固相载体制备蛋白质芯片的条件.方法蛋白质用含40%甘油的PBS稀释后点加在醛基化玻片上,室温干燥1h,4℃冰箱保存,经封闭剂封闭,PBS漂洗后,依次加入抗体,反应结果用扫描仪进行扫读.结果以醛基化玻片为固相载体时预...
目的探讨以醛基化玻片为固相载体制备蛋白质芯片的条件.方法蛋白质用含40%甘油的PBS稀释后点加在醛基化玻片上,室温干燥1h,4℃冰箱保存,经封闭剂封闭,PBS漂洗后,依次加入抗体,反应结果用扫描仪进行扫读.结果以醛基化玻片为固相载体时预点10~15个点后点样均一性较好;点样后4℃冰箱保存24~48h再进行漂洗和封闭处理,所得结果的荧光测量值较高;3%BSA为封闭剂时所得图像的荧光背景值最低;点样量影响荧光信号的强度.结论以醛基化玻片为固相载体制备蛋白质芯片时要预点15~20个点后再正式点样,点样后应4℃保存24~48h再进行漂洗和3%BSA封闭处理.
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关键词
蛋白质芯片
制作条件
醛
基化
玻片
固相载体
下载PDF
职称材料
题名
蛋白芯片生产用醛基化玻片制备的条件优化及初步检定
被引量:
8
1
作者
丁亚平
倪世明
陈立炎
张文
曹恒杰
罗予春
周枚芬
梁好
凌志光
王升启
机构
深圳益生堂生物企业有限公司
军事医学科学院放射医学研究所
出处
《生物技术通讯》
CAS
2002年第6期445-447,450,共4页
基金
国家自然科学基金重点项目(39889001)
军队杰出人才基金项目
文摘
建立一种以玻片为基质的蛋白芯片制备的优化及检定方法。将经过清洗处理的玻片,用不同浓度的氨基硅烷试剂和戊二醛试剂,在不同的时间内,进行氨基化和醛基化处理,通过蛋白结合强度与处理时间及溶剂浓度的动力学相关性分析,确定最佳的优化条件,将不同浓度梯度的人IgG抗体结合于该玻片表面,经过洗涤、封闭,再加入Cy3荧光标记的二抗,孵育,洗涤后检测各点的荧光强度,确定其线性范围及其检测灵敏度。氨基硅烷试剂浓度为5%,作用时间为30min;戊二醛试剂浓度为2.5%,作用时间为60min时,蛋白结合强度达到饱和。蛋白芯片在2~2×4-7mg/ml浓度范围内有良好的线性,能够检测出人IgG的最低浓度为2×4-8mg/ml。
关键词
蛋白芯片
醛
基化
玻片
制备
条件优化
检定
氨基硅烷
戊二
醛
Keywords
protein-chip
preparation
3-aminopropyltriethoxysilane
glutaraldehyde
分类号
Q81 [生物学—生物工程]
Q503
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职称材料
题名
蛋白质芯片制作条件的优化
被引量:
6
2
作者
江凌晓
郭兆彪
陈泽良
王津
王红霞
俞守义
杨瑞馥
机构
南方医科大学流行病教研室
军事医学科学院微生物流行病研究所
出处
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2004年第11期1230-1232,共3页
基金
国家863计划课题(2001AA223061)~~
文摘
目的探讨以醛基化玻片为固相载体制备蛋白质芯片的条件.方法蛋白质用含40%甘油的PBS稀释后点加在醛基化玻片上,室温干燥1h,4℃冰箱保存,经封闭剂封闭,PBS漂洗后,依次加入抗体,反应结果用扫描仪进行扫读.结果以醛基化玻片为固相载体时预点10~15个点后点样均一性较好;点样后4℃冰箱保存24~48h再进行漂洗和封闭处理,所得结果的荧光测量值较高;3%BSA为封闭剂时所得图像的荧光背景值最低;点样量影响荧光信号的强度.结论以醛基化玻片为固相载体制备蛋白质芯片时要预点15~20个点后再正式点样,点样后应4℃保存24~48h再进行漂洗和3%BSA封闭处理.
关键词
蛋白质芯片
制作条件
醛
基化
玻片
固相载体
Keywords
protein chip
preparation
fluorescence intensity
分类号
Q819 [生物学—生物工程]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
蛋白芯片生产用醛基化玻片制备的条件优化及初步检定
丁亚平
倪世明
陈立炎
张文
曹恒杰
罗予春
周枚芬
梁好
凌志光
王升启
《生物技术通讯》
CAS
2002
8
下载PDF
职称材料
2
蛋白质芯片制作条件的优化
江凌晓
郭兆彪
陈泽良
王津
王红霞
俞守义
杨瑞馥
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2004
6
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
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