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一株产酸性α-淀粉酶菌株的筛选、纯化及酶学性质 被引量：12
1
作者 谢建华 师永生 +2 位作者 杜丽琴 黄日波 韦宇拓 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期95-99,共5页
从南宁酒厂附近土壤中筛选到一株产淀粉酶的野生菌株GXBA-4,经革兰氏染色、芽孢染色以及16SrDNA鉴定,初步确定为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefacien）.将该菌株发酵液经过硫酸铵沉淀和凝胶过滤纯化出一种α-淀粉酶,该酶相对分... 从南宁酒厂附近土壤中筛选到一株产淀粉酶的野生菌株GXBA-4,经革兰氏染色、芽孢染色以及16SrDNA鉴定,初步确定为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefacien）.将该菌株发酵液经过硫酸铵沉淀和凝胶过滤纯化出一种α-淀粉酶,该酶相对分子质量约为57×103;反应最适温度为40~45℃,适应温度范围广,30℃时仍具有80%以上的相对活力;最适pH为5.0,为低温酸性淀粉酶.该酶水解可溶性淀粉的产物,经HPLC检测主要是以葡萄糖,麦芽糖以及麦芽三糖为主的低聚糖,分别以α-环糊精、β-环糊精、可溶性淀粉、玉米生淀粉为底物,还原糖产物比为0：0：99：3.4,表明该酶为典型的α-淀粉酶. 展开更多
关键词 芽孢杆菌 酸性淀粉酶 纯化 酶学性质
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一株耐酸性α-淀粉酶产生菌的分离鉴定及发酵条件研究 被引量：7
2
作者 李翠香 胡元森 +2 位作者 潘涛 刘娜 宋威 《河南工业大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2009年第2期51-54,88,共5页
应用锥虫蓝法从淀粉厂、饴糖厂等取来的土样中筛选得到一株产耐酸性α-淀粉酶的菌株.经生理生化及16S rDNA测序鉴定该菌株为枯草芽胞杆菌,命名为xm-1.该菌株最适产酶温度为37℃,最适产酶时间为发酵后第13小时,装液量对该菌株产酶影响不... 应用锥虫蓝法从淀粉厂、饴糖厂等取来的土样中筛选得到一株产耐酸性α-淀粉酶的菌株.经生理生化及16S rDNA测序鉴定该菌株为枯草芽胞杆菌,命名为xm-1.该菌株最适产酶温度为37℃,最适产酶时间为发酵后第13小时,装液量对该菌株产酶影响不明显.在最优产酶条件下,最高酶活性高达242 U/mL. 展开更多
关键词 酸性淀粉酶 筛选 鉴定 发酵条件
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一株酸性淀粉酶产生菌的分离鉴定及其酶学性质研究 被引量：7
3
作者 刘洋 王一琰 +3 位作者 白黎婧 相宏宇 朱洪亮 谢秋宏 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期174-178,共5页
用含有淀粉的选择培养基,通过透明圈法筛选到一株产酸性淀粉酶的菌株,其发酵液酶活力达到123U/mL。通过形态观察。生理生化实验和16S rDNA序列分析等方法初步鉴定该菌株为地衣芽孢杆菌,命名为Bacillus lincheniformis BW-2。对其产生的... 用含有淀粉的选择培养基,通过透明圈法筛选到一株产酸性淀粉酶的菌株,其发酵液酶活力达到123U/mL。通过形态观察。生理生化实验和16S rDNA序列分析等方法初步鉴定该菌株为地衣芽孢杆菌,命名为Bacillus lincheniformis BW-2。对其产生的淀粉酶的酶学性质进行分析发现,该菌株产生的淀粉酶最适反应温度为70℃;最适反应pH为4.5,同时具有较好的热稳定性和pH稳定性;Ca2+和Mg2+对该酶有激活作用,Mn2+和Cu2+对该酶有抑制作用,抑制剂PMSF(苯甲基磺酰氟)及DTT(二硫苏糖醇)对该酶活力影响较小。通过PAGE分析发现BW-2产生的淀粉酶与已知热稳定淀粉酶分子量或结构可能存在差异。Bacillus lincheniformis BW-2是一株具有研究开发潜力的产酸性淀粉酶的菌株。 展开更多
关键词 酸性淀粉酶 菌株筛选 分离鉴定 酶学性质
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酸性淀粉酶菌株的诱变选育及酶学性质研究 被引量：5
4
作者 钱萍 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期183-186,共4页
为了筛选酶活力较高的酸性酶淀粉酶菌株,多次采用紫外(UV)、化学诱变剂硫酸二乙酯(DES),对黑曲霉(ATCC-1602)进行处理,通过淀粉透明圈的大小快速检测出酶活力较高的菌株,再经固态发酵测定酶活,筛选出一株酶活力较高的菌株(ATCC-1694),... 为了筛选酶活力较高的酸性酶淀粉酶菌株,多次采用紫外(UV)、化学诱变剂硫酸二乙酯(DES),对黑曲霉(ATCC-1602)进行处理,通过淀粉透明圈的大小快速检测出酶活力较高的菌株,再经固态发酵测定酶活,筛选出一株酶活力较高的菌株(ATCC-1694),酶活力为394.1u/g,比原始菌株酶活力提高10倍。该酶最适温度为75℃、最适pH为4.0。在50℃、pH4.0条件下酶活力相当稳定,在酿造工业有良好的应用前景。 展开更多
关键词 黑曲霉 硫酸二乙酯诱变 紫外诱变 淀粉透明圈 酸性淀粉酶
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白曲霉Asp-amy1固体发酵生产酸性淀粉酶的初步研究 被引量：2
5
作者 贺胜英 杨云娟 +2 位作者 许波 黄遵锡 唐湘华 《酿酒科技》 2009年第8期41-46,共6页
利用白曲霉菌株Asp-amy1进行固体发酵生产酸性淀粉酶,对白曲霉固体发酵条件进行了优化,初步确定菌株产酶的优化培养基为:7.5%的玉米粉,1.5%的蛋白胨,发酵曲含水量为50%,发酵起始pH5.5。菌株的最佳接种量为40%(干基计),发酵时间由72h缩短... 利用白曲霉菌株Asp-amy1进行固体发酵生产酸性淀粉酶,对白曲霉固体发酵条件进行了优化,初步确定菌株产酶的优化培养基为:7.5%的玉米粉,1.5%的蛋白胨,发酵曲含水量为50%,发酵起始pH5.5。菌株的最佳接种量为40%(干基计),发酵时间由72h缩短到48h,菌体生长迅速,产酶能力强,酶活达1000U/g干曲。薄层层析生成的液化产物,主要以G2-G7为主,淀粉液化后都生成了小分子的糊精和寡糖类;产物薄层分析可初步确定所产酶为液化型酶。 展开更多
关键词 酸性淀粉酶 固体发酵 优化 薄层 液化
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一种不依赖钙离子的酸性α淀粉酶基因的克隆表达 被引量：1
6
作者 杨键 王青艳 +3 位作者 金辉 秦艳 王成华 黄日波 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1427-1431,共5页
以产酸性淀粉酶菌株Bacillus sp.CN7的基因组DNA为模板,PCR扩增到α淀粉酶成熟肽基因,将该基因插入表达质粒pSE380中,构建重组质粒pSE380-cn7a。将重组质粒导入到Escherichia coli JM109中,IPTG诱导表达。重组酶经Sephacryl S300、Ni-NT... 以产酸性淀粉酶菌株Bacillus sp.CN7的基因组DNA为模板,PCR扩增到α淀粉酶成熟肽基因,将该基因插入表达质粒pSE380中,构建重组质粒pSE380-cn7a。将重组质粒导入到Escherichia coli JM109中,IPTG诱导表达。重组酶经Sephacryl S300、Ni-NTA纯化后测定其酶学性质。重组酶CN7A的最适温度为65°C,最适pH为5.5?6.0,对可溶性淀粉的Km值为3.784g/L,最大反应速度为101.2mg/(L·min),该酶的热稳定性不依赖钙离子。 展开更多
关键词 酸性淀粉酶 不依赖钙离子 克隆表达 PKA
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固体发酵酸性淀粉酶高效产酶实验的研究
7
作者 贺胜英 王玉双 +2 位作者 杨云娟 黄遵锡 唐湘华 《中国酿造》 CAS 北大核心 2011年第3期97-101,共5页
通过对白曲霉固体发酵条件进行优化,寻找阻遏固体发酵高酶活限制机理,从而利于白曲霉发酵的工艺生产,获得高强度发酵酸性淀粉酶,并可做到废物利用。通过对固体发酵产物进行薄层层析发现,在发酵过程中白曲霉产生α-酸性淀粉酶的同时分解... 通过对白曲霉固体发酵条件进行优化,寻找阻遏固体发酵高酶活限制机理,从而利于白曲霉发酵的工艺生产,获得高强度发酵酸性淀粉酶,并可做到废物利用。通过对固体发酵产物进行薄层层析发现,在发酵过程中白曲霉产生α-酸性淀粉酶的同时分解掉了培养基中的偶数单糖组分,留下了大量的奇数单糖组分,从而造成培养过程的偶数单糖组分限制了产酶,当在培养基中补加一定量的麦芽糖时将大大提高白曲霉的酶活,酶活可由2513U/g上升为3618U/g,可以提高白曲霉62%的产酶能力。 展开更多
关键词 固体发酵 酸性淀粉酶 偶数单糖 还原糖
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芽胞杆菌XM-1产酸性淀粉酶发酵条件研究
8
作者 胡元森 李翠香 潘涛 《中国酿造》 CAS 北大核心 2011年第7期100-104,共5页
通过单因素试验及响应面分析,对基础发酵培养基配方进行了优化,确定了枯草芽孢杆菌XM-1产酸性α-淀粉酶液体发酵培养基的最佳配方为:可溶性淀粉8.1g/L,花生饼34.3g/L,NH4NO3 6g/L,KH2PO4 3g/L,CaCl2.2H2O 2.94g/L,培养基起始pH值为5.0... 通过单因素试验及响应面分析,对基础发酵培养基配方进行了优化,确定了枯草芽孢杆菌XM-1产酸性α-淀粉酶液体发酵培养基的最佳配方为:可溶性淀粉8.1g/L,花生饼34.3g/L,NH4NO3 6g/L,KH2PO4 3g/L,CaCl2.2H2O 2.94g/L,培养基起始pH值为5.0。菌株XM-1在优化后的培养基中发酵产酶达最高为534.2U/mL,约是优化前的2.2倍。 展开更多
关键词 酸性淀粉酶 发酵培养基 响应面分析
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白曲霉产中温酸性α-淀粉酶组成成分分析及酶学性质的研究
9
作者 贺胜英 杨云娟 +2 位作者 谢振荣 黄遵锡 唐湘华 《酿酒科技》 2009年第11期35-39,共5页
对高产白曲霉菌株产生中温酸性α-淀粉酶进行了酶学性质研究,试验表明该酶最适作用温度为60℃,最适作用pH为5.0,该酶在pH4.5～7.0范围内酶活较稳定,金属离子对此酶几乎没有激活作用,Hg+、Fe3+对酸性α-淀粉酶有明显的抑制作用。酸性α-... 对高产白曲霉菌株产生中温酸性α-淀粉酶进行了酶学性质研究,试验表明该酶最适作用温度为60℃,最适作用pH为5.0,该酶在pH4.5～7.0范围内酶活较稳定,金属离子对此酶几乎没有激活作用,Hg+、Fe3+对酸性α-淀粉酶有明显的抑制作用。酸性α-淀粉酶的Vmax为311.53mg/(u·min),Km为2.18mg/(u·min)。该酶具有较好的耐热性和耐酸性,能在同一pH条件下进行淀粉的液化和糖化作用,具有较好的应用前景。 展开更多
关键词 微生物 白曲霉 酸性淀粉酶 中温 酶学性质
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酸性α-淀粉酶的研究与应用 被引量：36
10
作者 张丽苹 徐岩 金建中 《酿酒》 CAS 北大核心 2002年第3期19-22,共4页
随着工业生产的发展 ,一些淀粉原料深加工工艺希望在比现有条件更低的pH条件下进行 ,于是耐酸性α-淀粉酶应运而生。它可广泛应用于青贮饲料、发酵饮料、药物的生产以及工业副产品的加工、废料的处理等等 ,具有极大的应用潜力和开发前... 随着工业生产的发展 ,一些淀粉原料深加工工艺希望在比现有条件更低的pH条件下进行 ,于是耐酸性α-淀粉酶应运而生。它可广泛应用于青贮饲料、发酵饮料、药物的生产以及工业副产品的加工、废料的处理等等 ,具有极大的应用潜力和开发前景。主要介绍了国内外关于耐酸性α -淀粉酶的特性。 展开更多
关键词 淀粉加工 生产 应用 发酵 酸性Α-淀粉酶
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酸性α-淀粉酶生产菌株的选育的初步研究 被引量：22
11
作者 张丽苹 徐岩 《工业微生物》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期11-14,共4页
从淀粉厂的酸性土壤中筛选得到一株生产酸性α 淀粉酶的野生菌 ,YX - 1。此菌株具有较高的产酶能力 ,初步鉴定为Bacillusstearothermophilus。YX - 1能够生产两种α 淀粉酶 ,在其发酵过程中具有两个产酶高峰 ,提取两个产酶期的粗酶EI和E... 从淀粉厂的酸性土壤中筛选得到一株生产酸性α 淀粉酶的野生菌 ,YX - 1。此菌株具有较高的产酶能力 ,初步鉴定为Bacillusstearothermophilus。YX - 1能够生产两种α 淀粉酶 ,在其发酵过程中具有两个产酶高峰 ,提取两个产酶期的粗酶EI和EII ,经特性分析发现两种酶的最适pH值分别为 4 .5和 5 .0 ,最适温度均为 60℃。 展开更多
关键词 酸性Α-淀粉酶 生产菌株 选育 嗜热脂肪芽孢杆菌
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酸性α-淀粉酶生产菌株的筛选和酶的纯化及酶的性质研究 被引量：25
12
作者 陈波 李大力 杨树林 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第5期119-122,共4页
从土壤中筛选得到一产酸性α-淀粉酶的野生青霉菌株,对其所产酸性α-淀粉酶进行分离纯化,该酶反应的最适pH值为4.4,最适温度为60℃,分子量约为85kD。薄层层析结果表明该酶水解淀粉生成糊精和多种低聚糖。
关键词 青霉 酸性Α-淀粉酶 纯化
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黑曲霉酸性α-淀粉酶基因和糖化酶基因对工业酒精酵母的整合及其共表达 被引量：16
13
作者 王海燕 秦浚川 +1 位作者 王敖全 唐国敏 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期483-486,共4页
用PCR合成的黑曲霉 (Aspergillusniger)酸性α 淀粉酶 (Acidα amylase)的cDNA ,构建了由酵母醇脱氢酶(ADH1 )启动子和终止子引导表达 ,酸性α 淀粉酶自身信号肽序列引导分泌的表达元件 ,与黑曲霉糖化酶cDNA的表达元件同时插入由酵母rDN... 用PCR合成的黑曲霉 (Aspergillusniger)酸性α 淀粉酶 (Acidα amylase)的cDNA ,构建了由酵母醇脱氢酶(ADH1 )启动子和终止子引导表达 ,酸性α 淀粉酶自身信号肽序列引导分泌的表达元件 ,与黑曲霉糖化酶cDNA的表达元件同时插入由酵母rDNA序列引导同源整合的酵母YIp型表达载体pWHY中 ,构成双基因表达分泌质粒pWAG。采用pWAG与酵母YEp型G4 1 8抗性表达质粒的共转化 ,将两个基因表达元件整合到酒精生产酵母菌株AS2 346的染色体rDNA序列中 ,获得同时表达胞外酸性α 展开更多
关键词 黑曲霉 酸性Α-淀粉酶 基因 糖化酶 酒精酵母 表达
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耐酸性α-淀粉酶的开发与应用 被引量：19
14
作者 杨培华 李忠海 +1 位作者 刘永乐 俞健 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2006年第5期132-136,共5页
概述了耐酸性α-淀粉酶的基本性质及在发酵、纺织、饲料、医药等领域中的应用,介绍了国内外对产酸性α-淀粉酶菌株的研究进展,提出了耐酸性α-淀粉酶的开发前景。
关键词 酸性Α-淀粉酶 菌株 研究进展
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白曲耐酸性α-淀粉酶的分离和纯化 被引量：10
15
作者 张文学 杨瑞 +1 位作者 胡承 木田建次 《四川大学学报（工程科学版）》 EI CAS CSCD 2002年第2期51-56,共6页
从白曲霉菌A .Kawachii的米曲粗抽出液中 ,通过乙醇沉淀、离子交换层析、凝胶过滤层析等方式 ,获得了两个耐酸性α -淀粉酶比活性极高的组分 ,经SDS -PAGE分析 ,推断其组分A分子量为 85 ,0 0 0 ,组分B分子量为10 4 ,0 0 0。两组分均为... 从白曲霉菌A .Kawachii的米曲粗抽出液中 ,通过乙醇沉淀、离子交换层析、凝胶过滤层析等方式 ,获得了两个耐酸性α -淀粉酶比活性极高的组分 ,经SDS -PAGE分析 ,推断其组分A分子量为 85 ,0 0 0 ,组分B分子量为10 4 ,0 0 0。两组分均为糖蛋白 ,且能被枯草杆菌蛋白酶 (Subtilisin)适度降解。其N -末端 10 - 12残基的氨基酸序列与黑曲霉A .niger的耐酸性α -淀粉酶N -末端氨基酸序列极为相似。借此推断 ,A .Kawachii的白曲中至少有两种以上的耐酸性α 展开更多
关键词 酸性Α-淀粉酶 米曲 白曲霉菌 氨基酸序列分析 分离 纯化 发酵制备
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酸性α-淀粉酶菌株的诱变及酶的性质研究 被引量：18
16
作者 陈远钊 罗俊成 +2 位作者 胡佳 马莉 胡承 《中国酿造》 CAS 北大核心 2007年第1期10-13,共4页
以醋醅中筛选出产α-淀粉酶的酵母菌为出发菌进行N+离子注入诱变,使产物酶活提高了219%,达到497U/g。对其所产-α淀粉酶进行分离纯化,实验表明,该酶的最适温度为60℃,最适pH值为4.0,分子量约为81kDa,Ca2+对该酶的激活作用不明显。薄层... 以醋醅中筛选出产α-淀粉酶的酵母菌为出发菌进行N+离子注入诱变,使产物酶活提高了219%,达到497U/g。对其所产-α淀粉酶进行分离纯化,实验表明,该酶的最适温度为60℃,最适pH值为4.0,分子量约为81kDa,Ca2+对该酶的激活作用不明显。薄层层析结果表明,该酶水解淀粉产物为糊精和多种低聚糖。 展开更多
关键词 离子注入诱变 水生假丝酵母 酸性Α-淀粉酶 纯化
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酸性生淀粉酶产生菌的筛选及酶学性质研究 被引量：10
17
作者 谢慧玲 阮森林 +1 位作者 刘亮伟 陈红歌 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期85-87,共3页
酸性生淀粉酶在淀粉制糖中具有重要的开发价值。本实验从醋厂醋渣、淀粉厂排污口泥土分离到酸性条件下α-淀粉酶活力较高的三株菌,其中B-5所产α-淀粉酶最适pH为5.0,为酸性α-淀粉酶。对三株菌粗酶液降解生淀粉的能力进行比较,可知B-5、... 酸性生淀粉酶在淀粉制糖中具有重要的开发价值。本实验从醋厂醋渣、淀粉厂排污口泥土分离到酸性条件下α-淀粉酶活力较高的三株菌,其中B-5所产α-淀粉酶最适pH为5.0,为酸性α-淀粉酶。对三株菌粗酶液降解生淀粉的能力进行比较,可知B-5、B-1降解生淀粉能力较强,而B-6虽然有较高的α-淀粉酶活力,但其生淀粉降解能力却较低,粗酶液降解后的生淀粉电镜图片也说明了此结果。 展开更多
关键词 生淀粉酶 酸性Α-淀粉酶
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酸性α-淀粉酶的分离纯化与酶学性质研究 被引量：8
18
作者 胡元森 潘涛 李翠香 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期199-202,共4页
纯化了枯草芽胞杆菌xm-1菌株酸性α-淀粉酶,并对其酶学性质进行了研究。通过硫酸铵沉淀和Sephadex G-75凝胶层析将酸性α-淀粉酶粗酶液纯化了32.5倍,活力回收率为10.0%。酶性质测定结果表明,该酸性α-淀粉酶分子量约为60kD,最适反应温度... 纯化了枯草芽胞杆菌xm-1菌株酸性α-淀粉酶,并对其酶学性质进行了研究。通过硫酸铵沉淀和Sephadex G-75凝胶层析将酸性α-淀粉酶粗酶液纯化了32.5倍,活力回收率为10.0%。酶性质测定结果表明,该酸性α-淀粉酶分子量约为60kD,最适反应温度为45℃、最适作用pH5.0,该酶在pH3.4-6.0下稳定,高温耐受性差。Cu2+、Zn2+、EDTA对酶有不同程度的抑制作用,Ca2+和Mn2+对酶具有较强的激活作用。 展开更多
关键词 酸性Α-淀粉酶 蛋白纯化 酶学性质
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1株产酸性α-淀粉酶黑曲霉原生质体制备和再生条件优化 被引量：8
19
作者 王发祥 俞健 +3 位作者 王建辉 李向红 何纪华 刘永乐 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第1期155-158,共4页
通过单因素试验、Plackett-Burman(PB)试验和响应面优化获得产酸性α-淀粉酶黑曲霉孢子原生质体制备和再生的最佳工艺参数:黑曲霉种龄72 h、孢子浓度7.5×106CFU/mL、渗透压稳定剂甘露醇浓度0.85 mol/L,以10 g/L蜗牛酶+10 g/L纤维素... 通过单因素试验、Plackett-Burman(PB)试验和响应面优化获得产酸性α-淀粉酶黑曲霉孢子原生质体制备和再生的最佳工艺参数:黑曲霉种龄72 h、孢子浓度7.5×106CFU/mL、渗透压稳定剂甘露醇浓度0.85 mol/L,以10 g/L蜗牛酶+10 g/L纤维素酶+10 g/L溶菌酶为破壁酶、pH 6.8、酶解温度37℃、酶解2 h。在此条件下,原生质体制备率可达86.92%,再生率可达42.67%。 展开更多
关键词 原生质体 酸性Α-淀粉酶 黑曲霉 响应面法 制备 再生
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一株酸性淀粉酶产生菌的分离、鉴定及酶学特性初步研究 被引量：8
20
作者 张丽靖 沈江锋 +1 位作者 金庆超 杨郁 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期142-145,共4页
从富含淀粉的土样中筛选到一株酸性α-淀粉酶产生菌,经生理生化分析和16S rDNA序列测定,鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),命名为B.subtilis B6。这株菌产生的酸性淀粉酶的最适作用pH为5.0,最适作用温度为55℃,酶活性对Ca2+没有... 从富含淀粉的土样中筛选到一株酸性α-淀粉酶产生菌,经生理生化分析和16S rDNA序列测定,鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),命名为B.subtilis B6。这株菌产生的酸性淀粉酶的最适作用pH为5.0,最适作用温度为55℃,酶活性对Ca2+没有依赖性,Fe2+,Mn2+等对酶活性没有明显地抑制作用,Mg2+有较明显的促进作用。 展开更多
关键词 酸性Α-淀粉酶 枯草芽孢杆菌 分离鉴定 酶学特性
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