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导入LPAAT和KCS基因对油菜种子芥酸含量的影响 被引量：13
1
作者 陈柳 毛善婧 +3 位作者 陆莉 储成才 SONNTAG Karin 王幼平 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期1174-1178,共5页
采用农杆菌介导法,以下胚轴为转化受体,将溶血性磷脂酸酰基转移酶(LPAAT)和酮脂酰辅酶A合成酶(KCS)基因导入2种不同基因型(“Drakkar”和“Maplus”)的甘蓝型油菜,共获得247株再生植株,其再生频率分别为15.1%和2.0%。PCR检测和Southern... 采用农杆菌介导法,以下胚轴为转化受体,将溶血性磷脂酸酰基转移酶(LPAAT)和酮脂酰辅酶A合成酶(KCS)基因导入2种不同基因型(“Drakkar”和“Maplus”)的甘蓝型油菜,共获得247株再生植株,其再生频率分别为15.1%和2.0%。PCR检测和Southern杂交分析证实,外源基因已整合到油菜基因组中,转化频率分别为3.6%和0.7%。种子中芥酸含量因外源基因的导入使零芥酸油菜“Drakkar”提高到10.5%,高芥酸品种“Maplus”提高了5.0%,最高达62.8%。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 溶血性磷脂酸酰基转移酶 酮脂酰辅酶a合成酶 芥酸
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红麻酮脂酰辅酶A合成酶(KCS)酵母双杂交诱饵载体构建及自激活检测 被引量：2
2
作者 张高阳 邓接楼 +1 位作者 黄思齐 李德芳 《中国麻业科学》 2018年第2期75-78,共4页
酮脂酰辅酶A合成酶(KCS)是超长链脂肪酸合成过程中的限速酶,参与超长链脂肪酸和蜡质的合成,在植物抗旱和应对生物胁迫反应中发挥重要调控作用。研究采用PCR方法从红麻中(茎皮)分离KCS基因片段,将该基因按正确方式插入酵母双杂交表达质粒... 酮脂酰辅酶A合成酶(KCS)是超长链脂肪酸合成过程中的限速酶,参与超长链脂肪酸和蜡质的合成,在植物抗旱和应对生物胁迫反应中发挥重要调控作用。研究采用PCR方法从红麻中(茎皮)分离KCS基因片段,将该基因按正确方式插入酵母双杂交表达质粒pGBKT7中,酶切鉴定正确后,用PEG/Li Ac方法转化酵母MaV203,经抗性筛选后,用X-Gal对转化酵母进行自激活检测。结果表明,KCS基因的DNA结合结构域与酵母GAL4转录因子的上游激活位点(UAS)结合,可激活报告基因半乳糖苷酶的表达。经删除KCS基因DNA binding区域后重新转化酵母,结果表明,不携带KCS基因DNA binding区域的截短蛋白可以作为诱饵蛋白来研究与之相互作用的蛋白。 展开更多
关键词 酮脂酰辅酶a合成酶 酵母双杂交 自激活 红麻
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拟南芥KCS12基因的克隆及其对长链脂肪酸代谢调控功能的初步分析
3
作者 靳远航 余春娥 郑育声 《南方农业》 2016年第21期183-185,共3页
本课题从拟南芥中克隆了超长链脂肪酸代谢相关的功能基因At KCS12,转入酵母(INVSC1)表达系统中表达,检测酵母细胞中脂肪酸组成。脂肪酸组成结果分析表明,At KCS12使酵母中棕榈酸(16∶0)和硬脂酸(18∶0)的相对含量显著增加了,十八烯酸(18... 本课题从拟南芥中克隆了超长链脂肪酸代谢相关的功能基因At KCS12,转入酵母(INVSC1)表达系统中表达,检测酵母细胞中脂肪酸组成。脂肪酸组成结果分析表明,At KCS12使酵母中棕榈酸(16∶0)和硬脂酸(18∶0)的相对含量显著增加了,十八烯酸(18∶1)的相对含量显著减少了。这些结果共同提示,At KCS12表达的蛋白不能利用酵母中的脂肪酸作为催化底物合成超长链脂肪酸,或者At KCS12蛋白无酶活性。 展开更多
关键词 拟南芥 β-酮脂酰辅酶a合成酶 超长链脂肪酸 表达载体
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阳春砂二酮辅酶A合成酶的基因克隆及序列分析 被引量：1
4
作者 杨恩泽 高辉 +1 位作者 吴秋红 王峰 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第21期3037-3041,共5页
目的对阳春砂姜黄素生物合成途径的关键酶二酮辅酶A合成酶（diketideCoAsynthase，DCS）基因的编码cDNA序列进行克隆，为研究阳春砂姜黄素生物合成与基因调控奠定基础。方法结合阳春砂的转录组注释，根据编码区序列设计引物，通过PCR方... 目的对阳春砂姜黄素生物合成途径的关键酶二酮辅酶A合成酶（diketideCoAsynthase，DCS）基因的编码cDNA序列进行克隆，为研究阳春砂姜黄素生物合成与基因调控奠定基础。方法结合阳春砂的转录组注释，根据编码区序列设计引物，通过PCR方法克隆阳春砂DCS基因的编码区cDNA。结果PCR扩增了一个长1170bp的基因片段，该片段编码由389个氨基酸组成的DCS。同源性比对结果显示基因编码蛋白与姜黄的DCS具有氨基酸一致性达96％，与水仙等植物的查耳酮合酶（chalconesynthase，CHS）氨基酸一致性达66％-69％。进化树分析结果显示，与姜黄CurcumaeLongae具有较近的亲缘关系。结论首次从阳春砂中克隆DCS基因获得其编码区序列，为分析基因表达特性及其在姜黄素生物合成中的功能奠定基础。 展开更多
关键词 二酮辅酶A合成酶 阳春砂 基因克隆 序列分析 姜黄素
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