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微小RNA 671 5p对人结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响 被引量：3
1
作者 李莹 孙万仆 +1 位作者 安志强 管淑敏 《安徽医药》 CAS 2020年第5期942-946,共5页
目的探讨miR 671 5p对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法培养人正常结肠上皮细胞NCM460和结肠癌细胞SW480、SW620、HT29和LOVO,实时荧光定量PCR(RT qPCR)检测miR 671 5p和染色盒同源物4(CBX4)mRNA水平。转染miR 671 5p ... 目的探讨miR 671 5p对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法培养人正常结肠上皮细胞NCM460和结肠癌细胞SW480、SW620、HT29和LOVO,实时荧光定量PCR(RT qPCR)检测miR 671 5p和染色盒同源物4(CBX4)mRNA水平。转染miR 671 5p mimics(miR 671 5p组)、阴性对照(miR NC组)至SW480细胞,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测细胞增殖,克隆实验检测细胞克隆形成能力,Transwell检测细胞迁移和侵袭,蛋白质印迹法(Western Blot)检测CBX4、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、p21、基质金属蛋白酶9(MMP 9)、基质金属蛋白酶14(MMP 14)及酪氨酸激酶1/信号转导子与转录激活子3(JAK1/STAT3)信号通路相关蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR 671 5p和CBX4之间靶向关系。结果与NCM460细胞比,结肠癌细胞SW480、SW620、HT29和LOVO中miR 671 5p水平显著降低(P<0.05),CBX4 mRNA水平显著升高(P<0.05)。与miR NC组比,miR 671 5p组SW480细胞培养24、48、72 h后的OD值、克隆形成率、迁移和侵袭细胞数及CyclinD1、MMP 9、MMP 14、p JAK1和p STAT3蛋白水平显著降低(P<0.05),p21蛋白水平显著升高(P<0.05)。miR 671 5p负调控CBX4表达,过表达CBX4降低了miR 671 5p过表达对SW480细胞增殖、迁移和侵袭及JAK1/STAT3信号通路的影响。结论miR 671 5p过表达可抑制结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭,其作用机制与下调CBX4表达、抑制JAK1/STAT3信号通路的激活有关。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 微小RNA 671 5p 染色盒同源物4 细胞增殖 迁移 侵袭 酪氨酸激酶1/信号转导子与转录激活子3
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谷氨酰胺酶2对肝内胆管细胞癌细胞增殖和侵袭能力的影响及机制
2
作者 陈大勇 郭宏志 《新乡医学院学报》 CAS 2024年第9期816-821,共6页
目的探讨谷氨酰胺酶2(GLS2)对肝内胆管细胞癌细胞增殖和侵袭能力的影响及其机制。方法将对数生长期人肝内胆管细胞癌RBE细胞随机分为空白对照组(Con组)、GLS2过表达阴性对照组(pcDNA-NC组)、pcDNA-GLS2组和pcDNA-GLS2+磷酸化蛋白酪氨酸... 目的探讨谷氨酰胺酶2(GLS2)对肝内胆管细胞癌细胞增殖和侵袭能力的影响及其机制。方法将对数生长期人肝内胆管细胞癌RBE细胞随机分为空白对照组(Con组)、GLS2过表达阴性对照组(pcDNA-NC组)、pcDNA-GLS2组和pcDNA-GLS2+磷酸化蛋白酪氨酸激酶(p-JAK)组。Con组RBE细胞不转染任何质粒,pcDNA-NC组RBE细胞转染pcDNA-NC质粒,pcDNA-GLS2组RBE细胞转染pcDNA-GLS2质粒,pcDNA-GLS2+p-JAK组RBE细胞转染pcDNA-GLS2质粒并和p-JAK多肽共培养。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组细胞中GLS2 mRNA的相对表达量,细胞计数试剂盒-8检测各组细胞增殖能力,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,Transwell小室实验检测各组细胞侵袭能力,Western blot法检测细胞中蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)、p-JAK2、信号转导子与转录激活子3(STAT3)、磷酸化信号转导子与转录激活子3(p-STAT3)蛋白相对表达量。结果pcDNA-GLS2组细胞中GLS2 mRNA的相对表达量显著高于Con组和pcDNA-NC组(P<0.05);pcDNA-GLS2+p-JAK组细胞中GLS2 mRNA的相对表达量显著低于pcDNA-GLS2组(P<0.05)。pcDNA-GLS2组细胞存活率显著低于Con组(P<0.05);与pcDNA-GLS2组相比,pcDNA-GLS2+p-JAK组细胞存活率显著增加(P<0.05)。与Con组相比,pcDNA-GLS2组细胞凋亡率显著增加(P<0.05);pcDNA-GLS2+p-JAK组细胞凋亡率显著低于pcDNA-GLS2组(P<0.05)。pcDNA-GLS2组细胞迁移数显著低于Con组(P<0.05);与pcDNA-GLS2组相比,pcDNA-GLS2+p-JAK组细胞迁移数显著增加(P<0.05)。与Con组相比,pcDNA-GLS2组细胞中p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值显著降低(P<0.05);pcDNA-GLS2+p-JAK组细胞中p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值显著高于pcDNA-GLS2组(P<0.05)。结论过表达GLS2可通过抑制JAK2/STAT3信号通路调控肝内胆管癌细胞生物学活性,抑制肝内胆管癌RBE细胞增殖、侵袭、迁移能力,诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 谷氨酰胺酶2 蛋白酪氨酸激酶2/信号转导子与转录激活子3 肝内胆管细胞癌 细胞增殖 细胞侵袭
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人表皮生长因子对脂多糖诱导小肠上皮细胞损伤的保护作用 被引量：4
3
作者 何潜 邵继华 +1 位作者 樊强 陈喆 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第13期1668-1671,共4页
目的研究人表皮生长因子(EGF)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠小肠上皮IEC-6细胞损伤的保护作用和潜在机制。方法用噻唑蓝(MTT)法分别检测脂多糖和人表皮生长因子对IEC-6细胞存活率的影响。将细胞分为对照组(不做任何处理)、模型组(1μg·m... 目的研究人表皮生长因子(EGF)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠小肠上皮IEC-6细胞损伤的保护作用和潜在机制。方法用噻唑蓝(MTT)法分别检测脂多糖和人表皮生长因子对IEC-6细胞存活率的影响。将细胞分为对照组(不做任何处理)、模型组(1μg·mL^(-1)脂多糖处理细胞24 h)和低(先后用1μg·mL^(-1)脂多糖和100 ng·mL^(-1)人表皮生长因子处理24 h)、高浓度实验组(先后用1μg·mL^(-1)脂多糖和150 ng·mL^(-1)人表皮生长因子处理24 h)。用MTT法、流式细胞术和蛋白质印迹法分别检测IEC-6细胞存活率、凋亡率以及酪氨酸激酶1/信号转导与转录激活子3(JAK1/STAT3)通路相关蛋白表达。结果对照组、模型组和低、高浓度实验组细胞的存活率分别为(99.37±0.76)%,(65.52±4.97)%,(87.19±4.35)%和(75.94±3.60)%;凋亡率分别为(4.24±0.61)%,(12.37±2.06)%,(5.98±0.94)%,(8.15±1.13)%,p-JAK1的相对表达量分别为0.42±0.05,0.93±0.04,0.36±0.03,0.39±0.04,p-STAT3的相对表达量分别为0.73±0.06,0.94±0.05,0.32±0.02,0.44±0.03。模型组与对照组比较,差异有统计学意义;低、高浓度实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论一定浓度人表皮生长因子可以修复脂多糖诱导的小肠上皮细胞IEC-6的损伤,人表皮生长因子可能通过JAK1/STAT3信号通路保护肠道上皮细胞。 展开更多
关键词 人表皮生长因子 小肠上皮细胞 细胞凋亡 酪氨酸激酶1/信号转导与转录激活子3信号通路
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JAK2/STAT3通路在雌激素缺乏相关骨髓间充质干细胞衰老中的作用初探 被引量：3
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作者 武文婧 傅稼耀 +2 位作者 魏玉 马鹏飞 吴珺华 《口腔颌面外科杂志》 CAS 2020年第5期288-294,共7页
目的:探究非受体型蛋白酪氨酸激酶2/信号转导与转录激活子3(janus kinase 2/signal transducer and activator of transcription 3,JAK2/STAT3)信号通路在雌激素缺乏所致骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)衰... 目的:探究非受体型蛋白酪氨酸激酶2/信号转导与转录激活子3(janus kinase 2/signal transducer and activator of transcription 3,JAK2/STAT3)信号通路在雌激素缺乏所致骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)衰老中的作用。方法:提取小鼠BMSCs,并用适宜浓度的过氧化氢(H2O2)诱导其衰老。进一步添加雌激素类似物17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)或JAK通路抑制剂(鲁索替尼),用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)、Western印迹法(Western blot)、β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色法检测其衰老指标及JAK2/STAT3信号通路的改变。结果:H2O2诱导的BMSCs衰老可被雌激素抑制,且伴随着JAK2/STAT3信号的下调,而进一步抑制JAK2/STAT3信号通路也可以挽救BMSCs的衰老。结论:JAK2/STAT3信号通路是雌激素调控BMSCs的衰老靶点,且抑制该通路可以挽救BMSCs的衰老。 展开更多
关键词 细胞衰老 酪氨酸激酶2/信号转导与转录激活子3 骨髓间充质干细胞 雌激素
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