苯酚降解菌红球菌PNAN5菌株(Rhodococcussp.strain PNAN5)的分离鉴定、降解特性及其开环双加氧酶性质研究 被引量：62

1

作者 沈锡辉 刘志培 +1 位作者 王保军 刘双江 《环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期482-486,共5页

分离到一株能以苯酚、苯甲酸、对甲酚、萘为唯一碳源和能源生长、具有同时降解单环和双环芳烃能力的细菌菌株,经生理生化、16SrRNA基因序列分析等鉴定为红球菌PNAN5菌株(Rhodococcussp.strainPNAN5).在实验条件下和在温度为20～40℃、pH... 分离到一株能以苯酚、苯甲酸、对甲酚、萘为唯一碳源和能源生长、具有同时降解单环和双环芳烃能力的细菌菌株,经生理生化、16SrRNA基因序列分析等鉴定为红球菌PNAN5菌株(Rhodococcussp.strainPNAN5).在实验条件下和在温度为20～40℃、pH7 0～9 0范围内菌株PNAN5降解苯酚的效率保持在80%～100%之间,苯酚浓度在2～10mmol·L-1范围内变化对降解效率没有明显的影响.该菌株通过邻苯二酚1,2 双加氧酶催化的开环途径降解芳烃,不同于已知的浑浊红球菌(R.opacus)是通过邻苯二酚2,3 双加氧酶催化芳烃降解.以细胞裂解液测定该酶的酶促反应动力学常数Km值为35 94μmol·L-1,Vmax为0 84μmol·L-1·min-1·mg-1. 展开更多

关键词 苯酚 PNAN5 菌株 红球菌属 萘 邻苯二酚1 2-双加氧酶 细胞裂解液 污泥 污水处理工艺

下载PDF 职称材料

一株苯酚降解菌的筛选鉴定及响应面法优化其降解 被引量：24

2

作者 贺强礼 刘文斌 +3 位作者 杨海君 彭晓霞 关向杰 黄水娥 《环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期112-123,共12页

从某化工厂污水处理车间活性污泥中分离、筛选到一株能以苯酚为唯一碳源和能源生长的菌株YH8.基于形态特征、生理生化特性、BIOLOG细菌自动鉴定系统、16S rDNA和gyrB基因序列同源性分析鉴定菌株YH8,鉴定菌株YH8为Acinetobacter guilloui... 从某化工厂污水处理车间活性污泥中分离、筛选到一株能以苯酚为唯一碳源和能源生长的菌株YH8.基于形态特征、生理生化特性、BIOLOG细菌自动鉴定系统、16S rDNA和gyrB基因序列同源性分析鉴定菌株YH8,鉴定菌株YH8为Acinetobacter guillouiae.在苯酚浓度低于1200 mg·L-1,温度为26~34℃,pH为7.0~10.0时,菌株YH8培养60 h对苯酚的降解率达70%以上.运用单因素实验初步确定苯酚降解的最适外加碳源和氮源分别为山梨醇和NaNO3,最适温度为30℃,最适初始pH为9.0,最适接种量为5%.为了提高菌株YH8的降解率,首先利用Plackett-Burman实验设计评估并筛选出影响苯酚降解的3个关键因素为初始pH、苯酚浓度、山梨醇浓度.用最陡爬坡实验逼近以上3个因子的最大响应区域,采用Box-Behnken实验设计及响应面法分析,确定其最优降解条件为初始pH 9.26、苯酚浓度1163.63 mg·L-1、山梨醇浓度7.81%、接种量5%、NaNO3浓度2%、温度30℃、培养时间96 h,在此条件下苯酚降解率可达98.95%.苯酚降解酶活性及酶定域实验表明,菌株YH8相关降解酶为胞内酶,且苯酚可诱导苯酚羟化酶（LmPH）和邻苯二酚1,2-双加氧酶（C（12）O）的合成.通过降解酶特异性引物从菌株YH8扩增得到LmPH和C12O基因片段,经质粒检测和消除实验发现菌株YH8相关降解基因位于质粒上.此外,菌株YH8能耐受高浓度NaCl和多种重金属离子,对多种抗生素具有抗性. 展开更多

关键词 苯酚 ACINETOBACTER guillouiaeYH8 响应面法 GYRB 邻苯二酚1 2-双加氧酶 质粒

原文传递

一株苯胺降解菌的分离鉴定及其降解特性 被引量：16

3

作者 张逸飞 顾挺 +1 位作者 王国祥 钟文辉 《环境污染与防治》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期12-15,36,共5页

为研究苯胺污染的生物控制,通过驯化培养,从南京化工厂污水处理厂的活性污泥中分离出一株高效苯胺降解菌——菌株AN4。生理生化试验鉴定菌株AN4为金黄杆菌属(Chryseobacterium sp.)。菌株AN4利用苯胺生长和降解苯胺的最适温度为30℃、pH... 为研究苯胺污染的生物控制,通过驯化培养,从南京化工厂污水处理厂的活性污泥中分离出一株高效苯胺降解菌——菌株AN4。生理生化试验鉴定菌株AN4为金黄杆菌属(Chryseobacterium sp.)。菌株AN4利用苯胺生长和降解苯胺的最适温度为30℃、pH为7.0,它可在苯胺质量浓度低于3000mg/L的无机盐固体培养基上生长。菌株AN4除可降解苯胺外,还可以苯酚、苯甲酸、硝基苯、甲苯、萘、氯苯、二甲苯作为唯一碳源生长,蛋白胨可加速其对苯胺的代谢。代谢机制研究证实,菌株AN4在邻苯二酚1,2-双加氧酶作用下经邻位裂解途径降解苯胺。 展开更多

关键词 苯胺 代谢 邻苯二酚1 2-双加氧酶 金黄杆菌属

下载PDF 职称材料

苯酚降解菌株GXY-1分离鉴定、降解及其粗酶特性研究 被引量：14

4

作者 周集体 关晓燕 +3 位作者 曲媛媛 李昂 苟敏 艾芳芳 《大连理工大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第3期340-345,共6页

从处理石化废水的活性污泥样品中分离得到一株能以苯酚为唯一碳源生长的菌株GXY-1.通过形态特征、生理生化及16S rDNA序列分析,初步鉴定菌株GXY-1属于布鲁氏杆菌属(Brucella sp.).实验结果表明,菌株GXY-1对土霉素和四环素不敏感,其降解... 从处理石化废水的活性污泥样品中分离得到一株能以苯酚为唯一碳源生长的菌株GXY-1.通过形态特征、生理生化及16S rDNA序列分析,初步鉴定菌株GXY-1属于布鲁氏杆菌属(Brucella sp.).实验结果表明,菌株GXY-1对土霉素和四环素不敏感,其降解苯酚的最佳条件为温度30℃,pH7.0.在最佳条件下,GXY-1对600mg/L苯酚的降解率在60h时达99%以上.同时GXY-1还可以利用苯胺、萘、氯苯等芳香化合物为唯一碳源生长.测定了降解途径中相关酶的活性,表明菌株GXY-1是通过邻苯二酚1,2双加氧酶催化开环来降解苯酚.该菌株粗酶的最适反应pH为7.8,最适反应温度为40℃. 展开更多

关键词 苯酚 生物降解 布鲁氏杆菌 邻苯二酚1 2双加氧酶

下载PDF 职称材料

1株对叔丁基邻苯二酚降解菌的筛选鉴定及响应面法优化其降解 被引量：12

5

作者 贺强礼 刘文斌 +3 位作者 杨海君 彭晓霞 关向杰 黄水娥 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第7期2695-2706,共12页

从某化工厂污水处理车间活性污泥中分离、筛选到1株能以对叔丁基邻苯二酚(p-tert-Butylcatechol,TBC)为唯一碳源和能源生长的菌株YH1.经形态特征、生理生化、BIOLOG细菌自动鉴定系统和16S r DNA序列分析,鉴定菌株YH1为皱纹假单胞菌(Pseu... 从某化工厂污水处理车间活性污泥中分离、筛选到1株能以对叔丁基邻苯二酚(p-tert-Butylcatechol,TBC)为唯一碳源和能源生长的菌株YH1.经形态特征、生理生化、BIOLOG细菌自动鉴定系统和16S r DNA序列分析,鉴定菌株YH1为皱纹假单胞菌(Pseudomonas corrugate).在温度为24~36℃,p H为7.0~10.0的条件下,菌株YH1可使浓度低于500 mg·L-1的TBC降解率达到82%以上.运用单因素实验初步确定TBC降解的最适外加碳源和氮源分别为蔗糖和胰蛋白胨,最适温度为30℃,最适初始p H为7.0,最适接种量为2%.为了提高降解率,首先利用Plackett-Burman实验设计评估并筛选出影响TBC降解的3个关键因素:蔗糖、胰蛋白胨、初始p H.用最陡爬坡实验逼近以上3个因子的最大响应区域,采用Box-Behnken实验设计及响应面法分析,确定其最优降解条件为蔗糖浓度3%(ρ)、胰蛋白胨浓度1.44%(ρ)、TBC浓度400 mg·L-1、初始p H值8.12、接种量2.97%(φ)、温度30℃、培养时间96 h,在此条件下TBC降解率可达98.21%.TBC降解酶活性及酶定域实验表明,菌株YH1相关降解酶为胞内酶,且TBC可诱导邻苯二酚1,2双加氧酶(C12O)的合成.通过降解酶特异性引物从菌株YH1扩增得到C12O基因片段,经质粒检测和消除实验发现菌株YH1相关降解基因位于质粒上.此外,菌株YH1能耐受高浓度Na Cl和多种重金属离子,对多种抗生素具有抗性.研究结果为有效处理复杂工业废水提供了理论基础. 展开更多

关键词 对叔丁基邻苯二酚(TBC) PSEUDOMONAS corrugate YH1 响应面法 邻苯二酚1

原文传递

几种生物学指标与生物强化系统降解效率的关系 被引量：4

6

作者 郝纯 李旭东 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1853-1857,共5页

针对炼油废水生物强化处理系统中有时存在的不稳定造成排水超标的问题,研究了SBR反应器中采用生物强化技术,其细菌数量、脱氢酶、邻苯二酚1,2-双加氧酶(C12O)和邻苯二酚2,3-双加氧酶(C23O)等关键生物学指标与污染物去除效率的综合对应关... 针对炼油废水生物强化处理系统中有时存在的不稳定造成排水超标的问题,研究了SBR反应器中采用生物强化技术,其细菌数量、脱氢酶、邻苯二酚1,2-双加氧酶(C12O)和邻苯二酚2,3-双加氧酶(C23O)等关键生物学指标与污染物去除效率的综合对应关系,并运用ERIC-PCR技术研究了运行前后处理系统内微生物群落的变化.结果表明,投加菌剂的生物强化处理系统提高了细菌数量和酶活,使处理效率明显提高.生物强化系统中细菌数量及C23O酶活与污染物去除效率呈正相关关系,且微生物群落结构十分稳定.C12O为一种诱导酶,其酶活随污染物去除效率升高而降低. 展开更多

关键词 菌剂 炼油废水 细菌数量 脱氢酶 邻苯二酚1 2-双加氧酶(C12O) 邻苯二酚2 3-双加氧酶(C23O) ERIC—PCR

下载PDF 职称材料

一株苯酚降解菌株的筛选鉴定及特性研究 被引量：6

7

作者 任瑞凡 刘永阳 +4 位作者 曲文浩 孔令腾 李潇潇 薛智权 吕建华 《天津农业科学》 CAS 2018年第11期11-16,50,共7页

为了从焦化废水活性污泥中筛选出高效降酚的细菌,以对废水中苯酚进行生物处理。以苯酚为唯一碳源,从太谷县某焦化厂活性污泥中筛选苯酚降解菌,同时通过Plackett-Burman试验设计,结合正交试验分析,确定该菌株降解苯酚的最佳条件,通过酶... 为了从焦化废水活性污泥中筛选出高效降酚的细菌,以对废水中苯酚进行生物处理。以苯酚为唯一碳源,从太谷县某焦化厂活性污泥中筛选苯酚降解菌,同时通过Plackett-Burman试验设计,结合正交试验分析,确定该菌株降解苯酚的最佳条件,通过酶活性测定推测菌株降解途径。结果从活性污泥中分离得到1株苯酚降解菌株B10,经分析16S rDNA序列和构建系统进化树,初步鉴定该菌株为芽孢杆菌属细菌。通过利用Plackett-Burman试验设计,结合正交试验分析,确定该菌株降解苯酚的最佳条件为:酵母膏10 g·L^(-1),乙醇4 g·L^(-1),初始接菌量2.5%,培养温度30℃,硫酸镁1 g·L^(-1)。当以苯酚为唯一碳源时,菌株B10中仅有邻苯二酚1, 2-双加氧酶活性被检测到,因此推测,该菌株通过邻位途径降解苯酚。结果表明,B10菌具有降解苯酚能力,对于治理含酚废水具有应用潜力。 展开更多

关键词 苯酚 芽孢杆菌属B10 Plackett-Burman试验设计 邻苯二酚1 2-双加氧酶活性

下载PDF 职称材料

Burkholderia sp.IDO3对粪臭素的响应及下游代谢基因

8

作者 李玉洁 张佳鑫 +1 位作者 王彩红 马桥 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期579-585,共7页

粪臭素是一种具有强烈粪臭味的氮杂环芳烃污染物,广泛存在于动物肠道、粪便、垃圾填埋场和海洋等环境介质中,较为稳定且难以降解.以Burkholderia sp.IDO3为研究对象,系统研究菌株在粪臭素压力下的生理生化响应,并利用RT-qPCR和异源表达... 粪臭素是一种具有强烈粪臭味的氮杂环芳烃污染物,广泛存在于动物肠道、粪便、垃圾填埋场和海洋等环境介质中,较为稳定且难以降解.以Burkholderia sp.IDO3为研究对象,系统研究菌株在粪臭素压力下的生理生化响应,并利用RT-qPCR和异源表达技术探究下游降解功能基因.结果显示,粪臭素对Burkholderia sp.IDO3最小抑制浓度为1.5mmol/L;粪臭素促进菌膜形成和提高菌株表面疏水性,且呈剂量依赖性.氧化应激实验表明粪臭素提高Burkholderia sp.IDO3的超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性,抑制菌株脂质过氧化(丙二醛)以及还原型谷胱甘肽含量.结合前期组学分析推测邻苯二酚1,2-双加氧酶基因(DCN14_04105)可能为下游代谢关键基因,RT-qPCR实验表明该基因在粪臭素压力下上调3.70倍.将该基因在大肠杆菌中表达并获得纯酶,结果表明该酶最适pH为8.5,最适温度为30℃,Zn^(2+)、Co^(2+)、Cd^(2+)、Se4+、Sn^(2+)、Ca^(2+)对其具有抑制作用,Km值为25.98μmol/L,kcat值为10.70 s-1.本研究表明粪臭素影响了Burkholderia sp.IDO3菌株的生理生化性能,菌株代谢粪臭素中心代谢途径为邻苯二酚1,2-双加氧酶途径.该结果可为粪臭素的高效降解提供新的微生物资源,也为粪臭素的功能研究提供参考.(图7表1参30) 展开更多

关键词 粪臭素 伯克霍尔德菌 功能响应 生物降解 邻苯二酚1 2-双加氧酶

原文传递

邻单胞菌邻苯二酚1,2-双加氧酶基因(tfdC)在拟南芥中表达的初步研究 被引量：1

9

作者 王文东 陈文峻 +1 位作者 罗如新 蒯本科 《复旦学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期16-21,26,共7页

将从一株邻单胞菌中克隆到的一个新的邻苯二酚 1,2 双加氧酶基因 (tfdC)的起始密码子由GTG突变成ATG ,并克隆到农杆菌双元载体 pPZPY12 2中 ,利用农杆菌介导转化模式植物拟南芥 ,获得了转化植株 .经过PCR ,PCR Southern和Southerndotb... 将从一株邻单胞菌中克隆到的一个新的邻苯二酚 1,2 双加氧酶基因 (tfdC)的起始密码子由GTG突变成ATG ,并克隆到农杆菌双元载体 pPZPY12 2中 ,利用农杆菌介导转化模式植物拟南芥 ,获得了转化植株 .经过PCR ,PCR Southern和Southerndotblot方法检测证实 ,tfdC基因已经整合到拟南芥基因组中 .邻苯二酚 1,2 双加氧酶酶活性检测表明 ,转基因植株具有一定的酶活性 。 展开更多

关键词 邻苯二酚1 2-双加氧酶基因(tfd C) 遗传转化 外源基因表达 植物修复

原文传递

三氯卡班降解菌株Sphingomonas sp.YL-JM2C中多个邻苯二酚双加氧酶的功能 被引量：1

10

作者 李朔 许楹 周宁一 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1513-1524,共12页

【目的】研究Sphingomonas sp.YL-JM2C菌株的生长特性,确定以三氯卡班作为碳源的生长情况。挖掘菌株YL-JM2C潜在的邻苯二酚1,2-双加氧酶及邻苯二酚2,3-双加氧酶基因,在大肠杆菌(Escherichia coli)中异源表达邻苯二酚双加氧酶基因并研究... 【目的】研究Sphingomonas sp.YL-JM2C菌株的生长特性,确定以三氯卡班作为碳源的生长情况。挖掘菌株YL-JM2C潜在的邻苯二酚1,2-双加氧酶及邻苯二酚2,3-双加氧酶基因,在大肠杆菌(Escherichia coli)中异源表达邻苯二酚双加氧酶基因并研究其酶学性质。【方法】优化S.sp.YL-JM2C菌株以三氯卡班作为碳源时的培养条件,并利用全自动生长曲线测定仪测定菌株生长情况,绘制生长曲线。通过生物信息学方法挖掘潜在的邻苯二酚双加氧酶基因,并分别在Escherichia coli BL21(DE3)中进行异源表达,通过AKTA快速纯化系统纯化蛋白,分别以邻苯二酚、3-和4-氯邻苯二酚为底物检测重组蛋白的酶学特性。【结果】菌株在pH为7.0-7.5时生长最优。在以浓度为4-8 mg/L的三氯卡班做为底物时,菌株适宜生长。当R2A培养基仅含有0.01%酵母提取物和无机盐时,加入终浓度为4 mg/L的三氯卡班可促进菌株生长。挖掘到6个潜在的邻苯二酚双加氧酶基因stcA1、stcA2、stcA3、stcE1、stcE2和stcE3,表达并通过粗酶液分析证明其中5个基因stcA1、stcA2、stcA3、stcE1和stcE2编码的酶均具有邻苯二酚双加氧酶和氯邻苯二酚双加氧酶的活性;纯化酶的底物范围研究揭示了StcA1、StcA2和StcA3均属于Ⅱ型邻苯二酚1,2-双加氧酶,StcE1和StcE2为两个新型邻苯二酚2,3-双加氧酶;它们酶动力学分析研究证明了5个酶对邻苯二酚的亲和力和催化效率最高,4-氯邻苯二酚次之。【结论】在同一菌株中发现了5个具有功能的邻苯二酚双加氧酶基因,stcA1、stcA2和stcA3编码的酶均属于Ⅱ型邻苯二酚1,2-双加氧酶,stcE1和stcE2为两个新型邻苯二酚2,3-双加氧酶编码基因。5个酶均具有催化邻苯二酚和氯邻苯二酚开环反应的功能,这为更好地理解微生物基因组内代谢邻苯二酚及其衍生物氯代邻苯二酚基因的多样性奠定了基础。 展开更多

关键词 鞘氨醇单胞菌YL-JM2C 三氯卡班 邻苯二酚 3-氯邻苯二酚 4-氯邻苯二酚 邻苯二酚1 2-双加氧酶 邻苯二酚2 3-双加氧酶

原文传递

粪便微生物宏基因组来源的热稳定性邻苯二酚1,2-双加氧酶异源表达及酶学性质 被引量：5

11

作者 邓梦 杨正凤 +10 位作者 黄遵锡 戴利铭 沈骥冬 李俊俊 唐湘华 慕跃林 周峻沛 丁俊美 韩楠玉 吴倩 许波 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1947-1957,共11页

【目的】克隆倭蜂猴粪便微生物宏基因组的邻苯二酚1,2-双加氧酶基因cat PLCgl,并对该酶进行异源表达及酶学特性研究。【方法】利用宏基因组高通量测序技术获得cat PLCgl,并对其氨基酸序列进行分析。将cat PLCgl重组到载体p EASY-E2中并... 【目的】克隆倭蜂猴粪便微生物宏基因组的邻苯二酚1,2-双加氧酶基因cat PLCgl,并对该酶进行异源表达及酶学特性研究。【方法】利用宏基因组高通量测序技术获得cat PLCgl,并对其氨基酸序列进行分析。将cat PLCgl重组到载体p EASY-E2中并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中异源表达,研究其酶学性质。【结果】cat PLCgl全长852 bp,G+C含量48%,编码283个氨基酸,理论分子量为33.56 k D。重组Cat PLCgl酶学性质分析显示最适作用p H为7.0,其中在p H 7.0–10.0范围内处理1 h后,酶活剩余90%以上;最适作用温度为40°C,在25°C和40°C条件下稳定性较好,耐受210 h酶活性几乎不变。重组酶在最适条件下的动力学参数K_m、V_(max)和k_(cat)分别为24.9μmol/L、8.3 mmol/(min·g)和13.7 s^(-1);Fe^(2+)、Hg^(2+)、Cu^(2+)、Triton X-100、SDS、Ag+强烈抑制该酶活性,而其它金属离子及有机试剂影响较小。【结论】从倭蜂猴粪便微生物宏基因组中克隆得到邻苯二酚1,2-双加氧酶基因cat PLCgl,并对重组Cat PLCgl酶学性质进行研究,该酶具有较好的热稳定性和耐碱性,在降解环境中的邻苯二酚和生产顺,顺-己二烯二酸方面具有应用潜力。 展开更多

关键词 邻苯二酚1 2-双加氧酶 粪便微生物宏基因组 异源表达 热稳定性

原文传递

红球菌PB-1对高浓度苯酚及苯系物的降解研究 被引量：4

12

作者 马馨月 魏思洁 +3 位作者 柯檀 叶超然 陶越 陈兰洲 《安全与环境工程》 CAS 北大核心 2020年第2期85-91,共7页

苯酚及一些苯系物是有机合成工业废水中常见的污染物,也是生物处理的难点。从某焦化厂污泥中分离得到一株苯酚高效降解菌,根据生理生化试验和16S rDNA测序,鉴定为红球菌,命名为PB-1,对其降解苯酚的条件进行优化以及该菌株降解底物广谱... 苯酚及一些苯系物是有机合成工业废水中常见的污染物,也是生物处理的难点。从某焦化厂污泥中分离得到一株苯酚高效降解菌,根据生理生化试验和16S rDNA测序,鉴定为红球菌,命名为PB-1,对其降解苯酚的条件进行优化以及该菌株降解底物广谱性进行研究。结果表明:该菌株降解苯酚的最适温度为30~35℃,最适pH值为9.0;当菌体浓度OD600为0.3时,24 h可完全降解1000 mg/L的苯酚;该菌株可耐受2000 mg/L浓度的苯酚,对苯酚72 h的降解率为35.76%;此外,该菌株可适应300 mg/L浓度的喹啉,对1500 mg/L苯胺72 h的降解率达到68.06%;该菌株对苯酚和苯胺的降解均通过邻苯二酚1,2-双加氧酶催化的邻位途径,底物降解彻底,环境友好。红球菌PB-1可降解高浓度苯酚、苯胺,且耐受难降解喹啉类杂环芳香物质,在成分复杂的工业废水处理中具有十分广阔的应用前景。 展开更多

关键词 红球菌PB-1 高浓度苯酚 苯胺 喹啉 邻苯二酚1 2-双加氧酶 微生物修复技术

下载PDF 职称材料

苯酚降解菌DF51的分离鉴定、降解特性及其固定化的研究 被引量：4

13

作者 张谨华 李鹏丽 +2 位作者 王婧人 李彩虹 杨秀清 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2009年第24期410-415,共6页

为了研究焦化废水污染土样中微生物的降解性能,作者特地从太原市郊焦化厂附近的污染土样中采样,以便从中加氧酶催化开环,表明菌株DF51兼有混浊红球菌(Rhodoccocus opacus R7)和红球菌PNAN5(Rhodoccocus sp.strain DF51)降解苯酚的途径... 为了研究焦化废水污染土样中微生物的降解性能,作者特地从太原市郊焦化厂附近的污染土样中采样,以便从中加氧酶催化开环,表明菌株DF51兼有混浊红球菌(Rhodoccocus opacus R7)和红球菌PNAN5(Rhodoccocus sp.strain DF51)降解苯酚的途径。菌株DF51固定化试验表明,该菌的固定化细胞具有降解苯酚的潜在应用价值。 展开更多

关键词 苯酚 红球菌DF51 降解 邻苯二酚1 2-双加氧酶 固定化细胞

下载PDF 职称材料

倭蜂猴粪便微生物苯酚羟化酶和邻苯二酚1,2-双加氧酶基因多样性研究 被引量：4

14

作者 熊彩云 许波 +7 位作者 戴利铭 李俊俊 唐湘华 慕跃林 杨云娟 周峻沛 丁俊美 黄遵锡 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2189-2197,共9页

【目的】分析倭蜂猴粪便微生物中苯酚羟化酶(Phenol hydroxylase,PH)和邻苯二酚1,2-双加氧酶(Catechol 1,2-dioxygenase,C12O)的基因多样性。【方法】利用简并引物,以倭蜂猴粪便微生物宏基因组DNA为模板,通过PCR扩增,分别构建PH和C12O... 【目的】分析倭蜂猴粪便微生物中苯酚羟化酶(Phenol hydroxylase,PH)和邻苯二酚1,2-双加氧酶(Catechol 1,2-dioxygenase,C12O)的基因多样性。【方法】利用简并引物,以倭蜂猴粪便微生物宏基因组DNA为模板,通过PCR扩增,分别构建PH和C12O基因克隆文库,并对克隆进行测序分析。【结果】倭蜂猴粪便微生物来源的PH和C12O基因序列经BLAST比对分析,与Gen Bank中相应酶的序列一致性分别介于92%-100%和87%-100%。系统进化树分析表明PH基因序列与Neisseria、Burkholderia、Alcaligenes、Acinetobacter 4个属来源的PH序列相关;C12O基因序列全部与Acinetobacter来源的C12O序列相关。序列比对结果表明PH序列具有Lm PH(Largest subunit of multicomponent PH)中高保守的两个DEXRH结构域;C12O序列具有能被Ag+和Hg2+抑制的位点(半胱氨酸)。【结论】倭蜂猴粪便微生物来源的PH为多组分PH,其降解苯酚的中间产物邻苯二酚可以被C12O通过邻位开环途径裂解。 展开更多

关键词 倭蜂猴 粪便微生物 苯酚羟化酶 邻苯二酚1 2-双加氧酶 多样性

原文传递

石油烃降解菌对邻苯二酚、苯甲酸钠降解特性的研究 被引量：2

15

作者 刘娜 刘志敏 宋东辉 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期156-164,共9页

邻苯二酚和苯甲酸是苯类化合物代谢过程中两种常见的中间产物,也是工业废水中常见的环境污染物。为了高效去除苯类污染物,考察了高效降解石油中芳香烃组分的菌株 Acinetobacter sp. Tust-DM21 对邻苯二酚和苯甲酸钠的降解,并通过邻苯二... 邻苯二酚和苯甲酸是苯类化合物代谢过程中两种常见的中间产物,也是工业废水中常见的环境污染物。为了高效去除苯类污染物,考察了高效降解石油中芳香烃组分的菌株 Acinetobacter sp. Tust-DM21 对邻苯二酚和苯甲酸钠的降解,并通过邻苯二酚 1, 2-双加氧酶(C12O)的粗酶特性和苯甲酸 1, 2-双加氧酶的酶活初步研究其代谢过程。在不含碳源无机盐培养基中,菌株 Tust-DM21 能够分别以邻苯二酚和苯甲酸钠为唯一碳源进行生长。通过改变接菌量、底物浓度、pH、温度等方面对该菌降解这两类苯类物质的特性进行研究,对 C12O 的最适 pH、温度和动力学参数以及苯甲酸 1, 2-双加氧酶的酶活进行分析。菌株对邻苯二酚的最大耐受浓度为 700 mg/L,菌株降解 600 mg/L 邻苯二酚的最佳条件为:接菌量 5%、pH6.0、温度 35℃,降解率达 92%以上。菌株可耐受 4 500 mg/L 苯甲酸钠,降解浓度为 1 500 mg/L 苯甲酸钠的最佳条件为:接菌量 3%、pH8.0、温度 35℃,降解率达 95%以上。C12O 的最适 pH 为 8.0,温度 35℃,其动力学参数为 Km=25.68 μmol/L,Vmax=0.131 mol/(mL min);苯甲酸 1, 2-双加氧酶的酶活为 3.53 U。该菌对邻苯二酚、苯甲酸钠有良好的降解效果,具有潜在的应用前景。 展开更多

关键词 邻苯二酚 苯甲酸钠 微生物降解 邻苯二酚1 2-双加氧酶 苯甲酸1 2-双加氧酶

下载PDF 职称材料

球形红细菌降解2,4-二硝基甲苯的途径及酶学性质 被引量：2

16

作者 白红娟 王寿艳 +2 位作者 梁芳楠 赵婷婷 康鹏洲 《火炸药学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第5期82-87,共6页

采用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)分析了球形红细菌降解2,4-二硝基甲苯(2,4-DNT)的中间代谢产物,分析了可能的降解途径,讨论了培养基中2,4-DNT的初始质量浓度、溶液pH值及反应温度对3种酶的酶比活力影响。结果表明,当2,4-DNT的初始质量... 采用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)分析了球形红细菌降解2,4-二硝基甲苯(2,4-DNT)的中间代谢产物,分析了可能的降解途径,讨论了培养基中2,4-DNT的初始质量浓度、溶液pH值及反应温度对3种酶的酶比活力影响。结果表明,当2,4-DNT的初始质量浓度为40 mg/L时,培养72h后,可以检测到5种物质:2,4-二硝基甲苯、4-氨基-2硝基甲苯、2-氨基-4硝基甲苯、4-硝基-1,2-二(三甲基硅烷)苯、1,2,4-三(三甲基硅烷)苯,其可能的降解途径为2,4-DNT首先还原为4-氨基-2-硝基甲苯和2-氨基4-硝基甲苯,再进一步转化为4-硝基-1,2-羟基苯,然后氧化为1,2,4-三羟基苯,之后开环生成β-酮己二酸,最终降解为小分子物质。硝基还原酶、邻苯二酚2,3-双加氧酶和邻苯二酚1,2-双加氧酶的酶比活力最适宜温度分别为35、30、35℃,最适宜pH值分别为7.0、8.0、7.0,最适宜培养基初始2,4-DNT质量浓度均为40mg/L。 展开更多

关键词 球形红细菌 2 4-二硝基甲苯 2 4-DNT 硝基还原酶 邻苯二酚1 2-双加氧酶 邻苯二酚2 3-双加氧酶

下载PDF 职称材料

邻苯二酚1,2-双加氧酶的结构、功能及同工酶现象研究进展 被引量：3

17

作者 赵化冰 覃琨 +4 位作者 谭之磊 李华英 李德金 郭锦 刘芳 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期2419-2425,共7页

邻苯二酚是芳香族化合物多条生物降解途径中共有的一种重要的中间产物,根据开环方式的不同,可分为邻位降解途径和间位降解途径,其中邻位降解途径中的关键酶是邻苯二酚1,2-双加氧酶。本文主要综述了邻苯二酚1,2-双加氧酶的结构、酶学性质... 邻苯二酚是芳香族化合物多条生物降解途径中共有的一种重要的中间产物,根据开环方式的不同,可分为邻位降解途径和间位降解途径,其中邻位降解途径中的关键酶是邻苯二酚1,2-双加氧酶。本文主要综述了邻苯二酚1,2-双加氧酶的结构、酶学性质,以及它在芳香烃降解菌中存在的同工酶现象及其功能研究进展。 展开更多

关键词 邻苯二酚1 2-双加氧酶 结构 酶学性质 同工酶

原文传递

制备邻苯二酚的镍-钠/硅藻土催化剂研究 被引量：3

18

作者 李林鹏 裴松鹏 +1 位作者 林陵 曾崇余 《精细石油化工》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期52-56,共5页

实验分别以分步浸渍法和均相沉淀法制备Ni-Na/硅藻土催化剂。考察了不同Na助剂的Ni-Na/硅藻土催化剂在1,2-环己二醇脱氢制邻苯二酚的催化反应中的催化性能,以Na_2SO_4为助剂,强化了催化剂表面的强酸中心及弱碱中心,有效抑制了氢解产物... 实验分别以分步浸渍法和均相沉淀法制备Ni-Na/硅藻土催化剂。考察了不同Na助剂的Ni-Na/硅藻土催化剂在1,2-环己二醇脱氢制邻苯二酚的催化反应中的催化性能,以Na_2SO_4为助剂,强化了催化剂表面的强酸中心及弱碱中心,有效抑制了氢解产物苯酚的生成。在320℃、LHSV 4.0 h^(-1)、30 mL/min N_2反应条件下,邻苯二酚的选择性达81.98%,邻苯二酚收率达80.01%。 展开更多

关键词 邻苯二酚1 2-环己二醇 脱氢 镍-钠/硅藻土 Na助剂

下载PDF 职称材料

红球菌35R1中邻苯二酚1,2-双加氧酶的表达及纯化

19

作者 何航航 姚霓红 +2 位作者 吴菁 闫达中 晁红军 《武汉轻工大学学报》 2021年第3期20-23,72,共5页

3,5-二甲基苯酚(3,5-DMP)是一种重要的精细化工原料以及有机合成中间体,在工农业生产领域广泛应用并大量排放到环境中,对人类和环境造成了巨大的危害。Rhodococcus sp.35R1是一株以3,5-二甲基苯酚为唯一碳源和能源的高效降解菌。为验证... 3,5-二甲基苯酚(3,5-DMP)是一种重要的精细化工原料以及有机合成中间体,在工农业生产领域广泛应用并大量排放到环境中,对人类和环境造成了巨大的危害。Rhodococcus sp.35R1是一株以3,5-二甲基苯酚为唯一碳源和能源的高效降解菌。为验证菌株35R1中3,5-二甲基苯酚是通过邻苯二酚途径开环代谢的,通过生物信息学分析,寻找到35R1基因组上的邻苯二酚1,2-双加氧酶编码基因catA,通过一步克隆法将其连接到表达载体pET28a(+)上,然后,将其转化至表达宿主E.coli BL21(DE3)中,从而进行该基因的异源表达。结果成功在35R1基因组上扩增到catA基因,构建了重组质粒pET28a-catA,采用自诱导的方法诱导表达了邻苯二酚1,2-双加氧酶,纯化酶可催化邻苯二酚生成顺式粘糠酸。 展开更多

关键词 3 5-二甲基苯酚 邻苯二酚 邻苯二酚1 2-双加氧酶 基因克隆 异源表达

下载PDF 职称材料

降解1,2,4-三氯苯的硝基还原假单胞菌J5-1的分离鉴定和邻苯二酚1,2-双加氧酶基因的克隆 被引量：7

20

作者 宋蕾 王慧 +2 位作者 姜健 高静思 施汉昌 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第8期1878-1881,共4页

从受氯苯污染的土壤中分离到1株以1,2,4-三氯苯为唯一碳源生长的细菌,命名为J5-1.根据其生理生化特征和16SrDNA(GenBank Accession No.EF107515)序列相似性分析,将该菌株初步鉴定为硝基还原假单胞菌(Pseudomonas nitroreducens).当1,2,4... 从受氯苯污染的土壤中分离到1株以1,2,4-三氯苯为唯一碳源生长的细菌,命名为J5-1.根据其生理生化特征和16SrDNA(GenBank Accession No.EF107515)序列相似性分析,将该菌株初步鉴定为硝基还原假单胞菌(Pseudomonas nitroreducens).当1,2,4-三氯苯初始浓度为400 mg/L时,J5-1对其最大降解率接近90%;当1,2,4-三氯苯浓度初始为20 mg/L时,降解效果最好.J5-1对1,2,4-TCB的降解服从一级反应动力学.从J5-1的基因组DNA中克隆到CC12O的全长序列. 展开更多

关键词 硝基还原假单胞菌J5-1 1 2 4-三氯苯 生物降解 降解动力学 氯代邻苯二酚1 2-双加氧酶

下载PDF 职称材料