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甜菜坏死黄脉病毒75kDa通读蛋白基因构建与表达 被引量:8
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作者 于嘉林 李大伟 刘仪 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第1期6-12,共7页
利用DNA重组技术,将甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)内蒙分离物的CP基因和54kDa通读区片段拼接,构建了BNYVV75kDa通读蛋白基因。序列分析表明,构建的75kDa通读蛋白基因与野生型相比,只有4个核苷酸发生了改变(包括将CP基因的终止密码子TAG改造为... 利用DNA重组技术,将甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)内蒙分离物的CP基因和54kDa通读区片段拼接,构建了BNYVV75kDa通读蛋白基因。序列分析表明,构建的75kDa通读蛋白基因与野生型相比,只有4个核苷酸发生了改变(包括将CP基因的终止密码子TAG改造为ATG),相应地2个氨基酸也发生了改变。将75kDa通读蛋白基因及其54kD。片段分别克隆到pJW2上,构建了这两个基因的原核表达载体。SDS-PAGE和Western blotting检测结果表明,75kDa通读蛋白基因在E.coli BL21(DE3)中经温度(42℃)诱导后除可特异地表达75kDa。蛋白外,还产生两种小蛋白。75kDa通读蛋白基因的54kDa片段只表达出37kDa的蛋白。 展开更多
关键词 甜菜 坏死 黄脉病毒 75kDa 通读蛋白基因
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