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荧光定量RT-PCR和RT-LAMP检测BVDV方法的建立及应用比较 被引量：6
1
作者 段进刚 樊新丽 +5 位作者 葛婷 卞赛赛 高窦 代婧 阿热阿依.海依拉提 雷程红 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第10期170-174,179,共6页
为建立一种快速、灵敏诊断牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)的方法,试验采用RT-LAMP和荧光定量RT-PCR两种检测方法,与通用RT-PCR方法在特异性、灵敏性、样品检出率、试验设计复杂程度、扩增反应效率、使用仪器简单... 为建立一种快速、灵敏诊断牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)的方法,试验采用RT-LAMP和荧光定量RT-PCR两种检测方法,与通用RT-PCR方法在特异性、灵敏性、样品检出率、试验设计复杂程度、扩增反应效率、使用仪器简单程度和检测成本高低七个方面对BVDV进行了综合性比较分析。结果表明:试验建立的RT-LAMP方法与荧光定量RT-PCR、通用RTPCR方法相比具有特异性强、灵敏度高、样品检出率和扩增反应效率高、操作简便快速、低成本等特点。说明RT-LAMP方法对快速、灵敏诊断牛病毒性腹泻病、防止疫情的扩散具有重要意义。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral DIARRHEA virus BVDV) 牛病毒性腹泻病 荧光定量rt-pcr rt-LAMP 通用rt-pcr 快速检测
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非洲马瘟病毒VP7和NS2双重荧光RT-PCR检测技术的建立与应用 被引量：3
2
作者 高志强 张鹤晓 +6 位作者 乔彩霞 蒲静 张伟 谷强 刘环 张利峰 马贵平 《中国动物检疫》 CAS 2013年第4期34-38,共5页
利用DNAMAN软件对非洲马瘟病毒不同基因型代表株的序列进行分析,选择其高度保守的VP7和NS2基因设计合成引物和探针。人工分别合成包含有扩增区域的VP7和NS2核苷酸片段进行双向(T7和SP6)体外转录制备双链RNA(dsRNA)。使用制备的dsRNA在... 利用DNAMAN软件对非洲马瘟病毒不同基因型代表株的序列进行分析,选择其高度保守的VP7和NS2基因设计合成引物和探针。人工分别合成包含有扩增区域的VP7和NS2核苷酸片段进行双向(T7和SP6)体外转录制备双链RNA(dsRNA)。使用制备的dsRNA在对荧光定量RT-PCR的反应条件优化的基础上,建立了适用于非洲马瘟病毒检测的双重通用荧光定量RT-PCR检测技术。应用建立的方法对非洲马瘟病毒核酸,马流感病毒核酸,马流产沙门氏菌核酸,马链球菌兽疫亚种核酸,东、西部马脑脊髓炎病毒核酸进行检测,结果显示该检测技术可以有效检测非洲马瘟病毒核酸,而对其它病原核酸检测结果为阴性,证实本技术的特异性强、可靠性好。对已知拷贝数的dsRNA检测结果表明,所建立的TaqMan荧光定量RT-PCR灵敏度可达1.0×102拷贝/反应,相比于基于凝胶电泳常规RT-PCR方法,其灵敏度高10倍;而且双基因的检测设计思路更能保证病毒核酸的有效检测,防止漏检。在对248份临床样品的检测中,进一步证实了该方法快速、灵敏且重复性好,可满足非洲马瘟病毒快速诊断的需要。 展开更多
关键词 非洲马瘟病毒 VP7和NS2 双重通用荧光rt-pcr
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国家标准委发布禽流感检测防治8项新国家标准
3
《深圳质量》 2004年第3期10-10,共1页
关键词 国家标准 检测工作 防治工作 《禽流感病毒通用荧光rt-pcr检测方法.pdf》 《禽流感病毒NASBA检测方法.pdf》
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