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梅REMAP分子标记技术体系的优化及其应用 被引量：6
1
作者 沈玉英 高志红 +4 位作者 王飞 佟兆国 张计育 房伟民 章镇 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期848-855,共8页
通过分析构成梅REMAP分子标记技术体系的主要成分适宜浓度、SSR引物选择性碱基的添加以及RE-MAP-PCR扩增产物检测的非变性PAGE最佳浓度,建立了适合梅REMAP分子标记的技术体系,并对24个梅品种的遗传多样性进行了分析。结果表明:(1)适宜梅... 通过分析构成梅REMAP分子标记技术体系的主要成分适宜浓度、SSR引物选择性碱基的添加以及RE-MAP-PCR扩增产物检测的非变性PAGE最佳浓度,建立了适合梅REMAP分子标记的技术体系,并对24个梅品种的遗传多样性进行了分析。结果表明:(1)适宜梅REMAP-PCR的反应体系为:25.0μL总体积中,基因组DNA40.0 ng2、.5 mmol/L MgCl21.5μL、2.5 mmol/L dNTPs 2.0μL、10×PCR Buffer(TaKaRa)2.5μL、TaqDNA聚合酶1.5 U、10μmol/L LTR引物1.0μL、10μmol/L SSR引物1.0μL,且SSR引物的3′端加碱基可明显提高RE-MAP的扩增效果,但碱基数量无明显影响。(2)5.0%非变性PAGE电泳条带数量多,扩增范围广(300～2 000bp),且各品种扩增产物均可显示,能够清晰地反映品种间的多态性。(3)24个梅品种的遗传多样性分析显示,花梅的绿萼型及朱砂型分别聚在一起,这与形态学分类的结果一致,证明建立的REMAP技术体系的有效性和可行性。 展开更多
关键词 梅 REMAP 技术体系 选择性碱基 PAGE浓度 应用
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