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逆转录-环介导等温扩增技术检测急性呼吸道感染儿童中的呼吸道合胞病毒 被引量：3
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作者 李凡 赵林清 +4 位作者 钱渊 邓洁 朱汝南 孙宇 刘立颖 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期270-275,共6页
目的利用逆转录一环介导等温扩增技术（reverseloop—mediatedisothermalamplification，RT—LAMP），建立一种快速且敏感、特异的从急性呼吸道感染儿童的呼吸道标本中检测呼吸道合胞病毒（RSV）的方法。方法设计特异性RT—LAMP扩增引... 目的利用逆转录一环介导等温扩增技术（reverseloop—mediatedisothermalamplification，RT—LAMP），建立一种快速且敏感、特异的从急性呼吸道感染儿童的呼吸道标本中检测呼吸道合胞病毒（RSV）的方法。方法设计特异性RT—LAMP扩增引物，对引物进行特异性与灵敏度评估后，应用LA-320C实时浊度仪，对RSV5株分离株及经直接免疫荧光法（DFA）呼吸道病毒多病原检测过的急性呼吸道感染患儿的呼吸道标本101例进行RT—LAMP检测，并以本研究室已建立的RT-巢式PCR为对照方法。结果所建立的RT—LAMP方法敏感度好，60min扩增反应时间内每个反应可检测到1个拷贝的RSV（A或B亚型）RNA；且方法特异性好，与其他病毒间无交叉反应；4株A亚型及1株B亚型RSV分离株RT-LAMP方法检测均为阳性；在101例经DFA检测的呼吸道标本中，所建立的RT—LAMP方法与DFA方法在RSVA、B亚型检测的总符合率为95．0％，且两种方法的相关系数为0．895；与RT-巢式PCR的总符合率为94．1％，两种方法的相关系数为0．871。结论本研究所建立的RT—LAMP方法耗时短、操作简便、灵敏且特异，适用于儿科临床工作中疑似RSV感染的呼吸道标本的快速、特异的病原学检测。 展开更多
关键词 呼吸道合胞病毒 呼吸道感染 儿童 逆转录环介导等温扩增技术(rt LAMP)
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