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3株嗜(耐)盐菌株不同组合对盐碱土壤不同粒径团聚体含量的影响 被引量:4
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作者 曹力毅 毕江涛 肖国举 《河南农业科学》 北大核心 2019年第8期74-80,共7页
为揭示微生物改良盐碱地的机制,通过培养皿和盆钵试验,利用湿筛和干筛法分析测定3株嗜(耐)盐菌对盐碱土壤不同粒径团聚体含量的影响。结果表明,培养皿试验培养45d后,测定不同粒径土壤团聚体含量,盐单胞细菌+枯草芽孢杆菌处理对于提高粒... 为揭示微生物改良盐碱地的机制,通过培养皿和盆钵试验,利用湿筛和干筛法分析测定3株嗜(耐)盐菌对盐碱土壤不同粒径团聚体含量的影响。结果表明,培养皿试验培养45d后,测定不同粒径土壤团聚体含量,盐单胞细菌+枯草芽孢杆菌处理对于提高粒径≥2.00mm的土壤团聚体含量效果显著(P<0.05);培养90d后,达板喜盐芽孢杆菌+盐单胞细菌+枯草芽孢杆菌处理对于提高粒径≥2.00mm的土壤团聚体含量效果显著(P<0.05);培养45d后,达板喜盐芽孢杆菌+盐单胞细菌+枯草芽孢杆菌处理对于提高粒径0.25~2.00mm的土壤团聚体含量效果显著(P<0.05);培养90d后,达板喜盐芽孢杆菌+盐单胞细菌+枯草芽孢杆菌处理显著降低了粒径0.25~2.00mm的土壤团聚体含量(P<0.05);培养90d后,除达板喜盐芽孢杆菌+盐单胞细菌+枯草芽孢杆菌处理外,其他处理对于降低粒径<0.25mm的土壤团聚体含量效果均不显著(P>0.05)。盆钵试验干筛法测定不同粒径土壤团聚体含量,培养45、90d后,达板喜盐芽孢杆菌+盐单胞细菌+枯草芽孢杆菌处理对于提高粒径≥2.00mm的土壤团聚体含量效果显著(P<0.05);培养45d后,达板喜盐芽孢杆菌+盐单胞细菌+枯草芽孢杆菌处理对于提高粒径0.25~2.00mm的土壤团聚体含量效果显著(P<0.05);培养90d后,达板喜盐芽孢杆菌+盐单胞细菌+枯草芽孢杆菌处理降低了粒径0.25~2.00mm的土壤团聚体含量,但差异不显著(P>0.05);培养45、90d后,达板喜盐芽孢杆菌+盐单胞细菌+枯草芽孢杆菌处理均降低了粒径<0.25mm的土壤团聚体含量,且差异显著(P<0.05)。盆钵试验湿筛法测定土壤团聚体含量,培养45d后,各处理对于提升粒径≥2.00mm和0.25~2.00mm土壤团聚体含量以及降低粒径<0.25mm的土壤团聚体含量效果均不显著(P>0.05);培养90d后,达板喜盐芽孢杆菌+盐单胞细菌+枯草芽孢杆菌处理对于提升粒径0.25~2.00mm的土壤团聚体含量效果显著(P<0.05)。由此� 展开更多
关键词 芽孢杆菌 单胞细菌 枯草芽孢杆菌 碱地 土壤团聚体
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一株中度嗜盐细菌whb45的鉴定及其抗菌与抗肿瘤活性筛选 被引量:10
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作者 陈雷 王光玉 +4 位作者 卜同 张允斌 刘明 张军 林秀坤 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期85-90,共6页
从盐场中分离鉴定中度嗜盐细菌并对其潜在的抗菌和抗肿瘤活性进行评价。从山东威海的鹿道口盐场分离嗜盐细菌,对菌株whb45进行形态学和生理生化特性研究,测定其16SrRNA序列并通过同源性比对进行系统发育分析,采用抗菌和细胞毒模型进行... 从盐场中分离鉴定中度嗜盐细菌并对其潜在的抗菌和抗肿瘤活性进行评价。从山东威海的鹿道口盐场分离嗜盐细菌,对菌株whb45进行形态学和生理生化特性研究,测定其16SrRNA序列并通过同源性比对进行系统发育分析,采用抗菌和细胞毒模型进行活性筛选。试验结果表明,菌株whb45为中度嗜盐细菌,whb45与Halobacillus trueperi在形态和生理生化特征方面最接近,16SrRNA序列相似性为99%。whb45的粗提物对多种细菌、真菌和肿瘤细胞的生长都具有较强的抑制作用,可以作为发现生物活性物质的潜在的新来源。 展开更多
关键词 中度嗜细菌 鉴定 芽孢杆菌 抗菌活性 抗肿瘤活性
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一株中性嗜盐菌Halobacillus dabanensis N522的分离鉴定及其抗菌活性研究 被引量:7
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作者 倪志华 张玉明 周艳芬 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期158-164,共7页
从广东省徐闻盐场沉积物中分离嗜盐菌,鉴定目标菌株、考察培养条件,并对发酵液中抗菌活性物质进行理化性质研究。用稀释涂布法分离嗜盐菌,通过生理生化实验和16S r RNA基因序列分析鉴定分离得到的菌株;采用管碟法考察嗜盐菌发酵液的抗... 从广东省徐闻盐场沉积物中分离嗜盐菌,鉴定目标菌株、考察培养条件,并对发酵液中抗菌活性物质进行理化性质研究。用稀释涂布法分离嗜盐菌,通过生理生化实验和16S r RNA基因序列分析鉴定分离得到的菌株;采用管碟法考察嗜盐菌发酵液的抗菌活性,并对其抗菌活性物质进行理化分析。结果显示,分离得到一株嗜盐菌,经生理生化实验和16S r RNA序列分析鉴定后命名为达坂喜盐芽胞杆菌(Halobacillus dabanensis)N522,其最适生长p H值和Na Cl浓度分别为7.0和100 g/L,属于中度嗜盐菌类群。菌株N522的发酵液对多种细菌和真菌具有抑制作用,其中,对金黄色葡萄球菌的抑制能力最强。经硫酸铵盐析和蛋白酶实验分析,初步确定菌株N522所产抗菌活性物质为多肽,分子量在3-5 k D之间,并且该抗菌活性物质对p H和温度稳定性良好。晒盐场沉积物中分离得到的中度嗜盐菌H.dabanensis N522可作为开发抗菌药物的潜在新来源。 展开更多
关键词 中度嗜 鉴定 芽孢杆菌 抗菌活性
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信号分子AI-2合成关键基因luxS对嗜盐喜盐芽孢杆菌盐适应性的影响
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作者 王卓 王传旭 +3 位作者 杨静 李云杰 牛亚洁 李新 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期4517-4534,共18页
【背景】群体感应信号分子AI-2是由S-核糖基高半胱氨酸裂解酶(S-ribosylhomocysteinase,LuxS)和S-腺苷高半胱氨酸核苷酶(S-adenosylhomocysteine nucleosidase,Pfs,也被称为MtnN)催化S-腺苷高半胱氨酸(S-adenosylhomocysteine,SAH)生成... 【背景】群体感应信号分子AI-2是由S-核糖基高半胱氨酸裂解酶(S-ribosylhomocysteinase,LuxS)和S-腺苷高半胱氨酸核苷酶(S-adenosylhomocysteine nucleosidase,Pfs,也被称为MtnN)催化S-腺苷高半胱氨酸(S-adenosylhomocysteine,SAH)生成的4,5-二羟基-2,3-戊二酮(4,5-dihydroxy-2,3-pentanedione,DPD)自发环化形成,在细菌中广泛参与调节多种重要的生理过程,如趋化、生物发光、生物膜形成等;然而该信号分子对嗜盐喜盐芽孢杆菌盐适应性的影响尚未报道。【目的】对嗜盐喜盐芽孢杆菌(Halobacillus halophilus)群体感应信号分子AI-2进行体外合成并揭示AI-2对嗜盐喜盐芽孢杆菌盐适应性的影响。【方法】以嗜盐喜盐芽孢杆菌为研究对象,首先通过实时定量PCR分析luxS转录水平与盐浓度之间的联系;之后对LuxS、MtnN-1、MtnN-2、MtnN-3进行多序列比对分析寻找其关键氨基酸位点并通过异源表达纯化4种蛋白进行AI-2的体外合成;最后使用同源重组方法敲除luxS并通过盐胁迫、胞内相容性溶质含量检测、生物膜形成检测等试验研究luxS对嗜盐喜盐芽孢杆菌盐适应性的影响。【结果】实时定量分析表明嗜盐喜盐芽孢杆菌中luxS的转录水平随盐浓度上升而上调,而且受到Cl离子浓度的正向调控。生长曲线结合生物发光试验表明随着嗜盐喜盐芽孢杆菌的生长,培养液上清中AI-2活性在15 h达到最大,此外随着盐浓度的提高,其AI-2活性也会增强。体外酶促反应试验表明LuxS能够与MtnN-1或MtnN-2共同催化合成AI-2。利用同源重组技术成功构建了嗜盐喜盐芽孢杆菌luxS缺失突变体,在低盐条件下(0.5 mol/L NaCl)野生型、luxS缺失突变体和互补菌株的生长曲线无明显差异,而在高盐条件下(3.5 mol/L NaCl)luxS突变体的生长较为缓慢,互补菌株则能够恢复到与野生型相似的生长状况。此外,luxS的缺失会导致嗜盐喜盐芽孢杆菌在高盐条件下的盐胁迫存活率、� 展开更多
关键词 芽孢杆菌 AI-2 LUXS 适应性 相容性溶质
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喜盐芽孢杆菌D8基因文库的构建及甘氨酸甜菜碱转运蛋白betH基因的筛选 被引量:3
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作者 卢伟东 赵百锁 +2 位作者 冯德芹 王磊 杨苏声 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期451-454,共4页
喜盐芽孢杆菌(Halobacillus)D8是一株产生芽孢的革兰氏阳性中度嗜盐菌,能够耐受2 5 %NaCl。以其总DNASau3AI部分酶切的片段为供体、pUC18为载体,构建了该菌株的基因文库,共获得约90 0 0个重组质粒。通过菌落原位杂交、菌落PCR检测及DNA... 喜盐芽孢杆菌(Halobacillus)D8是一株产生芽孢的革兰氏阳性中度嗜盐菌,能够耐受2 5 %NaCl。以其总DNASau3AI部分酶切的片段为供体、pUC18为载体,构建了该菌株的基因文库,共获得约90 0 0个重组质粒。通过菌落原位杂交、菌落PCR检测及DNA序列测定,从该文库中筛选到含有完整的甘氨酸甜菜碱次级转运系统基因的重组质粒,将此基因命名为betH基因。序列分析发现,betH基因的大小为15 15bp ,编码由5 0 5个氨基酸组成的BetH蛋白,分子量为5 6 1kD。经蛋白疏水性分析,推测为含有12个跨膜区的跨膜蛋白,与Oceanobacillusiheyensis甘氨酸甜菜碱转运蛋白、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)OpuD、楚氏喜盐芽孢杆菌(Halobacillustrueperi)BetH、单核细胞增生利斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)BetL、嗜盐海球菌(Marinococcushalophilus)BetM和耐盐芽孢杆菌(Bacillushalodurans)甘氨酸甜菜碱转运蛋白的氨基酸同源性分别为6 4 %、5 1%、4 9%、4 8%、4 3%和4 4 %。 展开更多
关键词 芽孢杆菌(Halobacillus) 基因文库 甘氨酸甜菜碱转运蛋白
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达坂喜盐芽孢杆菌D-8^T在低渗冲击下的双向凝胶电泳分析 被引量:2
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作者 冯德芹 解利石 +1 位作者 李小红 杨苏声 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期740-744,共5页
为了解革兰氏阳性中度嗜盐菌适应低渗冲击的机制,采用双向凝胶电泳技术,研究达坂喜盐芽孢杆菌(Halobacillus dabanensis)D-8^T在低渗冲击下的差异蛋白表达谱。利用Imagemaster^TM 2D Platinum软件分析到大约650个蛋白点,大多数蛋... 为了解革兰氏阳性中度嗜盐菌适应低渗冲击的机制,采用双向凝胶电泳技术,研究达坂喜盐芽孢杆菌(Halobacillus dabanensis)D-8^T在低渗冲击下的差异蛋白表达谱。利用Imagemaster^TM 2D Platinum软件分析到大约650个蛋白点,大多数蛋白分子量分布在17.5~66kDa,等电点为4.0~5.9,偏酸性。在20%盐浓度中生长的D-8菌株受到0%盐浓度的低渗冲击5min及50min后34个蛋白点的表达发生改变,包括20个表达上调的点和14个点表达下调。用MALDI—TOF/MS及MASCOT软件鉴定了4个与低渗胁迫有关的蛋白,分别为热激蛋白DanK、柱状决定蛋白、青霉素结合蛋白和5-莽草酸烯醇式丙酮酸-3-磷酸合成酶。其中,热激蛋白适应低渗胁迫时表达上调为首次报道。 展开更多
关键词 芽孢杆菌 低渗冲击 双向凝胶电泳 蛋白表
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Na^+/H^+逆向转运蛋白NhaH短的C末端亲水域介导盐抗性和pH感应 被引量:1
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作者 杨礼富 张博 +1 位作者 王磊 杨苏声 《科学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第19期2313-2317,共5页
Na+/H+逆向转运蛋白在维持细胞质低的Na+浓度和pH稳态等生命活动过程中扮演重要角色,然而,到目前为止,对原核微生物Na+/H+逆向转运蛋白的C末端亲水域的结构和功能还知之甚少.我们曾从达坂喜盐芽孢杆菌(Halobacillus dabanensis)D-8菌株... Na+/H+逆向转运蛋白在维持细胞质低的Na+浓度和pH稳态等生命活动过程中扮演重要角色,然而,到目前为止,对原核微生物Na+/H+逆向转运蛋白的C末端亲水域的结构和功能还知之甚少.我们曾从达坂喜盐芽孢杆菌(Halobacillus dabanensis)D-8菌株中克隆得到第一个中度嗜盐菌来源的Na+/H+逆向转运蛋白基因nhaH.疏水性分析表明,NhaH的C末端亲水域只包含9个氨基酸残基(395PLIKKLGMI403),大大短于与之高度同源的SynNhaP1和ApNhaP的C末端亲水域.本研究采用PCR方法,构建NhaH蛋白的C末端亲水域缺失突变体nhaH-C.耐盐性实验表明,C末端亲水域的缺失显著地抑制大肠杆菌缺陷株KNabc的互补能力.基于荧光强度的翻转膜活性测定结果显示,NhaH?C的Na+/H+和Li+/H+逆向转运蛋白活性显著低于NhaH,而且前者的Na+/H+逆向转运蛋白活性向酸端偏移,表明Na+/H+逆向转运蛋白NhaH短的C末端亲水域在阳离子结合、转运和pH感应上起重要作用. 展开更多
关键词 芽孢杆菌 NA^+/H^+逆向转运蛋白 C末端亲水域 抗性 pH感应
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