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沉默轴突导向蛋白4D对胃癌细胞SGC-7901生长、自噬及上皮-间质转化的影响 被引量：4
1
作者 陶正贵 杜静虎 +3 位作者 田葵 王东华 龚伟 陈满宇 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期11-17,共7页
目的探讨沉默轴突导向蛋白4D(Sema4D)对胃癌细胞SGC-7901生长、自噬及上皮-间质转化的影响。方法将SGC-7901细胞随机分为对照组、shRNA-NC组、Sema4D-shRNA1组、Sema4D-shRNA2组与Sema4D-shRNA3组,构建shRNA Sema4D载体转染至SGC-7901... 目的探讨沉默轴突导向蛋白4D(Sema4D)对胃癌细胞SGC-7901生长、自噬及上皮-间质转化的影响。方法将SGC-7901细胞随机分为对照组、shRNA-NC组、Sema4D-shRNA1组、Sema4D-shRNA2组与Sema4D-shRNA3组,构建shRNA Sema4D载体转染至SGC-7901细胞。采用RT-PCR检测各组Sema4D mRNA表达水平;采用克隆形成实验检测细胞克隆形成率;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;显微镜观察上皮-间质转化形态学变化;Western blotting检测Ki-67、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bax、Bcl-2、caspase-3、cleaved caspase-3、Beclin1、p62、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、E-cadherin、N-cadherin、波形蛋白表达水平。结果 RT-PCR检测结果显示,与对照组比较,Sema4D-shRNA1组、Sema4D-shRNA2组和Sema4D-shRNA3组Sema4D mRNA表达水平均明显降低,且Sema4D-shRNA3组明显低于Sema4D-shRNA1组和Sema4D-shRNA2组(P<0.05),选择Sema4D-shRNA3进行后续试验。克隆形成实验结果显示,与对照组比较,Sema4D-shRNA3组克隆形成率明显降低(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示,与对照组比较,Sema4D-shRNA3组细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。Western blotting检测结果显示,与对照组比较,Sema4D-shRNA3组Ki-67、PCNA、p62、N-cadherin、波形蛋白表达水平明显降低,Beclin1、E-cadherin蛋白表达水平明显升高,Bax/Bcl-2、cleaved caspase-3/caspase-3、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值明显升高(P<0.05)。显微镜观察可见Sema4D-shRNA3组细胞上皮-间质转化受到抑制。结论 shRNA Sema4D可抑制SGC-7901细胞的增殖、自噬、上皮-间质转化,促进其凋亡。 展开更多
关键词 胃癌 轴突导向蛋白4D 自噬 上皮-间质转化
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Sema4D在心血管疾病中的研究进展
2
作者 陈建(综述) 夏豪(审校) 《疑难病杂志》 CAS 2022年第4期419-422,431,共5页
Sema4D又称CD100,是轴突导向蛋白家族的重要一员,最早在神经系统中作为神经元轴突生长导向因子被发现,研究表明,其在血管新生、神经系统发育、免疫应答中均具有重要作用。近年来,轴突导向蛋白家族成员由于具备广泛的生物学作用而受到越... Sema4D又称CD100,是轴突导向蛋白家族的重要一员,最早在神经系统中作为神经元轴突生长导向因子被发现,研究表明,其在血管新生、神经系统发育、免疫应答中均具有重要作用。近年来,轴突导向蛋白家族成员由于具备广泛的生物学作用而受到越来越多的关注,然而关于Sema4D在心血管疾病中的研究却较为有限。文章总结Sema4D及其受体的生物学特性,并对其在动脉粥样硬化、心力衰竭、心房颤动和血管功能调节方面的研究作一综述,以期为临床相关疾病提供一个潜在的研究方向。 展开更多
关键词 轴突导向蛋白4D 心血管疾病 作用机制
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香菇多糖抑制肝癌细胞HepG2增殖的作用及其可能机制 被引量：4
3
作者 李永格 《光明中医》 2021年第9期1431-1432,共2页
目的探讨香菇多糖(Lentinan,LNT)对肝癌细胞Hep G2增殖的影响及机制。方法体外培养肝癌细胞系Hep G2分别给予不同浓度LNT处理,MTT法检测肝癌细胞增殖抑制率的变化,western-blot检测轴突导向蛋白4C(Sema4C)和G蛋白偶联受体激酶相互作用蛋... 目的探讨香菇多糖(Lentinan,LNT)对肝癌细胞Hep G2增殖的影响及机制。方法体外培养肝癌细胞系Hep G2分别给予不同浓度LNT处理,MTT法检测肝癌细胞增殖抑制率的变化,western-blot检测轴突导向蛋白4C(Sema4C)和G蛋白偶联受体激酶相互作用蛋白1(GIT1)表达。结果不同浓度LNT作用肝癌细胞24、48、72 h后,肝癌细胞增殖的抑制率呈现浓度和时间依赖性;western-blot检测发现100μg/ml香菇多糖处理肝癌细胞48 h后,Sema4C和GIT1表达明显低于对照组(P<0.05)。结论LNT能够抑制肝癌细胞增殖,其机制可能是通过下调Sema4C和GIT1蛋白表达。 展开更多
关键词 香菇多糖 肝癌 轴突导向蛋白4C G蛋白偶联受体激酶相互作用蛋白1
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miR-138靶向作用Sema4C对脑胶质瘤细胞侵袭转移的影响 被引量：4
4
作者 李会兵 姚娟 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2018年第3期139-142,共4页
目的研究微小RNA-138（miR-138）对脑胶质瘤细胞侵袭转移的影响及其机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-138在60例脑胶质瘤组织及其癌旁组织中的表达，分析miR-138表达与脑胶质瘤分级的关系；体外对脑胶质瘤细胞株U... 目的研究微小RNA-138（miR-138）对脑胶质瘤细胞侵袭转移的影响及其机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-138在60例脑胶质瘤组织及其癌旁组织中的表达，分析miR-138表达与脑胶质瘤分级的关系；体外对脑胶质瘤细胞株U251和U87分别转染miR-138类似物（miR-138 mimic）及阴性对照（miR-NC）；qRT-PCR检测miR-138表达情况；Transwell实验检测U251和U87细胞侵袭转移能力；Western blotting检测miR-138靶向蛋白轴突导向蛋白4C（Sema4C）的表达。结果脑胶质瘤组织中miR-138表达水平（2.46±1.07）较癌旁正常脑组织（4.83±1.16）明显降低（t=-11.631，P＜0.001），且miR-138表达与肿瘤恶性程度呈负相关（r=-0.563，P=0.001）。转染miR-138 mimic组细胞miR-138表达（U251：3.96±0.16；U87：4.43±0.96）明显高于转染miR-NC组（U251：2.32±0.36；U87：2.58±0.62）（t=7.253，P＜0.001；t=8.872，P＜0.001）。miR-138 mimic组（U251：89±9；U87：95±10）细胞侵袭转移能力明显低于转染miR-NC组（U251：206±15；U87：240±20）（t=36.629，P＜0.001；t=35.521，P＜0.001）。miR-138 mimic组细胞Sema4C表达（U251：0.41±0.06；U87：0.36±0.03）明显低于miR-NC组（U251：1.01±0.08；U87：1.03±0.13）（t=-32.862，P＜0.001；t=-27.512，P＜0.001）。结论上调miR-138表达可抑制脑胶质瘤细胞侵袭转移，可能与负向调节Sema4C表达有关。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 肿瘤浸润 肿瘤转移 微小RNA-138 轴突导向蛋白4C
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轴突导向蛋白4B(SEMA4B)通过增加肿瘤组织巨噬细胞和调节性T细胞促进肺癌细胞生长 被引量：1
5
作者 姜俊 张瑞 +1 位作者 杨安钢 任新玲 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期56-62,共7页
目的探讨轴突导向蛋白4B(SEMA4B)能否调控肺癌细胞的生长。方法构建SEMA4B过表达病毒载体,并建立稳定过表达SEMA4B的Lewis肺癌(LLC)细胞株。采用实时定量PCR检测过表达的LLC细胞SEMA4B的表达水平。采用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)法检测... 目的探讨轴突导向蛋白4B(SEMA4B)能否调控肺癌细胞的生长。方法构建SEMA4B过表达病毒载体,并建立稳定过表达SEMA4B的Lewis肺癌(LLC)细胞株。采用实时定量PCR检测过表达的LLC细胞SEMA4B的表达水平。采用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)法检测SEMA4B对体外培养的LLC细胞增殖的影响。检测LLC细胞移植瘤小鼠模型中SEMA4B对LLC细胞生长的影响。采用流式细胞术检测SEMA4B对肿瘤免疫微环境中CD4^+CD25^+FOXP3^+调节性T细胞(Treg)的百分比。免疫组织化学染色法检测瘤组织CD31、增殖细胞核抗原(PCNA)、 CC趋化因子配体2(CCL2)及F4/80^+巨噬细胞的表达。结果成功建立了SEMA4B过表达细胞株, SEMA4B过表达促进LLC细胞增殖,过表达组的移植瘤瘤块体积明显大于对照组。过表达组瘤组织CD31表达水平升高、巨噬细胞和Treg增加、 CCL2升高。结论 SEMA4B通过增加肿瘤组织巨噬细胞、 Treg数量,促进肿瘤血管形成,从而促进肺癌细胞的增殖和肿瘤生长。 展开更多
关键词 肺癌 轴突导向蛋白4B(SEMA4B) 肿瘤免疫微环境 血管形成
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