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金黄色葡萄球菌疫苗候选分子StbA主要抗原表位区的表达及重组蛋白抗血清的制备
被引量：
4
1
作者
刘丽娜
张洁
+4 位作者
周静
钟乃凤
胡祖权
贾义
谭承建
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第4期375-379,共5页
通过生物信息学软件分析金黄色葡萄球菌转铁蛋白结合蛋白(StbA)的主要抗原表位区,PCR扩增StbA主要抗原表位区的编码序列;将该序列插入表达载体pGEX-4T-1中,测序验证后转化大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达。结果表明,重组菌能表达出...
通过生物信息学软件分析金黄色葡萄球菌转铁蛋白结合蛋白(StbA)的主要抗原表位区,PCR扩增StbA主要抗原表位区的编码序列;将该序列插入表达载体pGEX-4T-1中,测序验证后转化大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达。结果表明,重组菌能表达出分子质量约为54 000u的重组融合蛋白。表达产物经亲和层析纯化后可获得较高纯度的目的蛋白。Western-blot检测证实该重组蛋白能与乳腺炎患病奶牛恢复期血清发生阳性反应。ELISA结果显示,重组蛋白免疫新西兰大白兔能产生高效价的抗血清,提示StbA主要抗原表位区能刺激机体产生强大的免疫应答,StbA是一个有潜力的保护性抗原候选分子。
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关键词
金黄色葡萄球菌
转铁蛋白
结合
蛋白
A
蛋白
表达
抗血清制备
原文传递
1株黄牛源多源曼氏杆菌的分离鉴定与转铁结合蛋白B结构预测
2
作者
朱玉红
张疏桐
+6 位作者
李志玲
徐雨蓓
杨雪赢
张贵东
韦国山
甘玲
郭建华
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第4期706-712,共7页
为确定引起肺炎病死黄牛的病原,从牛鼻拭子中分离纯化得到1株细菌,经生化试验和分子生物学方法鉴定为多源曼氏杆菌。利用生物信息学软件MEGA7.0对巴氏杆菌科细菌的16SrDNA和巴氏杆菌科、奈瑟菌科细菌的转铁结合蛋白B(TbpB)进行系统进化...
为确定引起肺炎病死黄牛的病原,从牛鼻拭子中分离纯化得到1株细菌,经生化试验和分子生物学方法鉴定为多源曼氏杆菌。利用生物信息学软件MEGA7.0对巴氏杆菌科细菌的16SrDNA和巴氏杆菌科、奈瑟菌科细菌的转铁结合蛋白B(TbpB)进行系统进化分析,并对TbpB进行了结构预测。结果显示,分离株16SrDNA基因序列与牛曼氏杆菌ZY190616株、肉芽肿曼氏杆菌ATCC49244株、多源曼氏杆菌10299株相似性最高,位于同一簇内,相似性超过97%;分离株TbpB序列与溶血曼氏杆菌、多源曼氏杆菌相似性较高,位于同一簇内,但与其他菌的TbpB序列相似性较低;TbpB结构模拟显示其序列与已经测定结构的溶血曼氏杆菌TbpB序列相似性较高。药敏试验显示该菌氨基糖苷类、β-内酰胺类抗生素有较强的耐药性,对头孢哌酮和氟喹诺酮类药物敏感小鼠致病性试验证实该分离菌株致死量约为2×10^(9) CFU。结果表明,该分离株为多源曼氏杆菌,其TbpB序列与溶血曼氏杆菌和多源曼氏杆菌相似性较高。本研究为后续毒力基因相关研究和疫苗开发提供了理论基础。
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关键词
牛
多源曼氏杆菌
分离和鉴定
转铁蛋白
结合
蛋白
b
结构预测和分析
原文传递
题名
金黄色葡萄球菌疫苗候选分子StbA主要抗原表位区的表达及重组蛋白抗血清的制备
被引量：
4
1
作者
刘丽娜
张洁
周静
钟乃凤
胡祖权
贾义
谭承建
机构
贵阳医学院生物技术教研室
贵州民族大学化学与环境科学学院
出处
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第4期375-379,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(31360084)
贵州省科技厅社发项目(黔科合[2010]3144)
+2 种基金
贵州省卫生厅科学技术基金项目(gzwkj2011-1-018)
贵阳医学院博士启动基金项目(K2010-32)
贵州省科技厅科学技术基金项目(黔科J字[2010]2273)
文摘
通过生物信息学软件分析金黄色葡萄球菌转铁蛋白结合蛋白(StbA)的主要抗原表位区,PCR扩增StbA主要抗原表位区的编码序列;将该序列插入表达载体pGEX-4T-1中,测序验证后转化大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达。结果表明,重组菌能表达出分子质量约为54 000u的重组融合蛋白。表达产物经亲和层析纯化后可获得较高纯度的目的蛋白。Western-blot检测证实该重组蛋白能与乳腺炎患病奶牛恢复期血清发生阳性反应。ELISA结果显示,重组蛋白免疫新西兰大白兔能产生高效价的抗血清,提示StbA主要抗原表位区能刺激机体产生强大的免疫应答,StbA是一个有潜力的保护性抗原候选分子。
关键词
金黄色葡萄球菌
转铁蛋白
结合
蛋白
A
蛋白
表达
抗血清制备
Keywords
Staphylococcus aureus
transferrin-
b
inding protein A
protein expression
preparation of antiserum
分类号
S852.611 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
1株黄牛源多源曼氏杆菌的分离鉴定与转铁结合蛋白B结构预测
2
作者
朱玉红
张疏桐
李志玲
徐雨蓓
杨雪赢
张贵东
韦国山
甘玲
郭建华
机构
西南大学动物医学学院
西南大学医学研究院免疫学研究中心
出处
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第4期706-712,共7页
文摘
为确定引起肺炎病死黄牛的病原,从牛鼻拭子中分离纯化得到1株细菌,经生化试验和分子生物学方法鉴定为多源曼氏杆菌。利用生物信息学软件MEGA7.0对巴氏杆菌科细菌的16SrDNA和巴氏杆菌科、奈瑟菌科细菌的转铁结合蛋白B(TbpB)进行系统进化分析,并对TbpB进行了结构预测。结果显示,分离株16SrDNA基因序列与牛曼氏杆菌ZY190616株、肉芽肿曼氏杆菌ATCC49244株、多源曼氏杆菌10299株相似性最高,位于同一簇内,相似性超过97%;分离株TbpB序列与溶血曼氏杆菌、多源曼氏杆菌相似性较高,位于同一簇内,但与其他菌的TbpB序列相似性较低;TbpB结构模拟显示其序列与已经测定结构的溶血曼氏杆菌TbpB序列相似性较高。药敏试验显示该菌氨基糖苷类、β-内酰胺类抗生素有较强的耐药性,对头孢哌酮和氟喹诺酮类药物敏感小鼠致病性试验证实该分离菌株致死量约为2×10^(9) CFU。结果表明,该分离株为多源曼氏杆菌,其TbpB序列与溶血曼氏杆菌和多源曼氏杆菌相似性较高。本研究为后续毒力基因相关研究和疫苗开发提供了理论基础。
关键词
牛
多源曼氏杆菌
分离和鉴定
转铁蛋白
结合
蛋白
b
结构预测和分析
Keywords
b
ovis
Mannheimia varigena
isolation and identification
transferrin
b
inding protein
b
structural prediction and analysis
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
金黄色葡萄球菌疫苗候选分子StbA主要抗原表位区的表达及重组蛋白抗血清的制备
刘丽娜
张洁
周静
钟乃凤
胡祖权
贾义
谭承建
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2015
4
原文传递
2
1株黄牛源多源曼氏杆菌的分离鉴定与转铁结合蛋白B结构预测
朱玉红
张疏桐
李志玲
徐雨蓓
杨雪赢
张贵东
韦国山
甘玲
郭建华
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
原文传递
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