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转基因玉米BT11品系环介导等温扩增(LAMP)检测方法的建立 被引量：5
1
作者 王清华 徐君怡 +2 位作者 曹冬梅 刘宇 曹际娟 《食品安全质量检测学报》 CAS 2013年第3期868-872,共5页
目的建立转基因玉米BT 11品系的环介导等温扩增(LAMP)检测方法。方法根据转基因玉米BT 11品系特有序列(AY123624.1和AY629236)设计引物,优化建立LAMP反应体系,对该体系进行特异性、灵敏度、稳定性分析。结果本研究设计的引物具有很好的... 目的建立转基因玉米BT 11品系的环介导等温扩增(LAMP)检测方法。方法根据转基因玉米BT 11品系特有序列(AY123624.1和AY629236)设计引物,优化建立LAMP反应体系,对该体系进行特异性、灵敏度、稳定性分析。结果本研究设计的引物具有很好的特异性,可特异性检测出转基因玉米BT 11品系;检测灵敏度可达0.5%;经精密度实验分析,该方法的稳定性良好。结论 LAMP方法检测转基因玉米品系BT 11具有特异性高、稳定性好、快速灵敏、过程可视等优点,具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 转基因玉米bt 11 环介导等温扩增(LAMP) 品系鉴定检测
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转基因玉米质粒分子国家标准样品的构建 被引量：2
2
作者 郑秋月 曹际娟 +1 位作者 徐君怡 赵昕 《标准科学》 2012年第12期48-51,共4页
本文研制转基因玉米常见的4个品系:BT11、MON810、NK603和T25质粒分子国家标准样品。研究重点包括目标序列和内标准基因序列的选择和扩增、标准样品定值和分析等。均匀性和稳定性结果表明,所研制的转基因玉米4个品系标准样品均匀稳定。... 本文研制转基因玉米常见的4个品系:BT11、MON810、NK603和T25质粒分子国家标准样品。研究重点包括目标序列和内标准基因序列的选择和扩增、标准样品定值和分析等。均匀性和稳定性结果表明,所研制的转基因玉米4个品系标准样品均匀稳定。采用PicoGreen DNA分子荧光定量方法定值标准样品。多家单位合作定值,确定标准样品的标准值及其不确定度。所研制的转基因玉米质粒分子标准样品获得了国家标准样品证书,适用于转基因产品的定量和定性测定。 展开更多
关键词 转基因玉米bt11品系 转基因玉米MON810品系 转基因玉米NK603品系 转基因玉米T25品系 质粒分子国家标准样品
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转基因玉米Bt176液相芯片检测方法的建立 被引量：2
3
作者 程涛 王慧煜 +2 位作者 黄新 余多慰 韩雪清 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期158-164,共7页
为建立转基因玉米Bt176的液相芯片检测方法,根据已公布的转基因玉米Bt176外源插入基因CaMV35S启动子序列,外源基因3'端与玉米基因组DNA连接区序列,同时以玉米特异Zein内源基因序列为参照,利用Primer Premier5.0等软件设计特异性引... 为建立转基因玉米Bt176的液相芯片检测方法,根据已公布的转基因玉米Bt176外源插入基因CaMV35S启动子序列,外源基因3'端与玉米基因组DNA连接区序列,同时以玉米特异Zein内源基因序列为参照,利用Primer Premier5.0等软件设计特异性引物和探针。将探针与荧光编码微球偶联后,与PCR产物杂交反应,用液相芯片检测仪(Bio-plex 200)检测荧光信号。检测结果显示,该方法具有高特异性及灵敏度,各条探针之间无交叉反应,最低检测限可达0.01%。初步建立了检测转基因玉米Bt176的液相芯片技术,为其他转基因作物的快速高通量检测提供了借鉴和经验。 展开更多
关键词 转基因玉米bt176 液相芯片 灵敏度 特异性
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实时荧光定量PCR检测转基因玉米Bt176测量不确定度分析 被引量：2
4
作者 熊娟 黄启红 +4 位作者 伍玲燕 蔡大川 张志军 黄璇莹 陈敏儿 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期119-123,共5页
应用实时定量PCR方法测定样品中转基因玉米Bt176的含量,并从多个方面来分析测量的不确定度。结果显示,A类不确定度为0.0003,B类不确定度为0.0007,合成不确定度为0.001,有效自由度veff为272,包含概率P为95%,扩展不确定度U=0.002,测量结果... 应用实时定量PCR方法测定样品中转基因玉米Bt176的含量,并从多个方面来分析测量的不确定度。结果显示,A类不确定度为0.0003,B类不确定度为0.0007,合成不确定度为0.001,有效自由度veff为272,包含概率P为95%,扩展不确定度U=0.002,测量结果为(0.8±0.2)%。不确定度评估结果表明,测量不确定度的主要来源是微量液体转移量的偏差。 展开更多
关键词 转基因玉米bt176 实时荧光定量PCR 定量检测 不确定度评估
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转基因玉米Bt176品系特异性环介导等温扩增检测方法的研究 被引量：7
5
作者 凌莉 刘静宇 +5 位作者 易敏英 吴少云 刘津 蔡颖 李志勇 高东微 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期310-313,共4页
根据转基因玉米品系Bt176外源插入片段与玉米基因组序列设计和筛选品系特异性引物,并对反应体系和反应条件进行优化,最终建立转基因玉米品系Bt176的品系特异性LAMP检测方法。对该方法进行了灵敏度、特异性和稳定性评价。评价结果表明:... 根据转基因玉米品系Bt176外源插入片段与玉米基因组序列设计和筛选品系特异性引物,并对反应体系和反应条件进行优化,最终建立转基因玉米品系Bt176的品系特异性LAMP检测方法。对该方法进行了灵敏度、特异性和稳定性评价。评价结果表明:该方法定性检测低限为0.5%,特异性和稳定性均达到100%。 展开更多
关键词 环介导等温扩增 品系特异性 转基因玉米品系bt176 检测
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