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甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因转化小麦及其表达 被引量:106
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作者 郭北海 张艳敏 +5 位作者 李洪杰 杜立群 李银心 张劲松 陈受宜 朱至清 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2000年第3期279-283,共5页
采用基因枪法将山菠菜甜菜碱醛脱氢酶 (BADH)基因导入小麦 (TriticumaestivumL .)品种 ,并且得以表达。该基因由玉米Ubi1启动子控制。在盐胁迫条件下 ,多数转基因植株叶片的BADH活性比受体亲本提高 1~ 3倍 ,部分植株相对电导率比亲本... 采用基因枪法将山菠菜甜菜碱醛脱氢酶 (BADH)基因导入小麦 (TriticumaestivumL .)品种 ,并且得以表达。该基因由玉米Ubi1启动子控制。在盐胁迫条件下 ,多数转基因植株叶片的BADH活性比受体亲本提高 1~ 3倍 ,部分植株相对电导率比亲本明显低 ,表明转基因植株的细胞膜在胁迫时有受损较轻倾向。PCR和Southern杂交分析证实外源BADH基因已插入小麦基因组 ,平均转化频率为 4.1%。 展开更多
关键词 BADH基因 转基因 基因 小麦
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国内外紫苏研究进展概述 被引量:149
2
作者 谭美莲 严明芳 +2 位作者 汪磊 王力军 严兴初 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期225-231,共7页
本文概述了紫苏在开发利用、种质资源收集评价、栽培与生理、活性物质提取、组织培养、转基因及基因克隆表达分析等方面的国内外研究进展,以期为紫苏的深入研究和进一步开发应用提供参考,有效促进紫苏产业的发展。
关键词 紫苏 种质资源 栽培生理 活性物质提取 组织培养 基因克隆 转基因
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干旱诱导性启动子驱动的海藻糖-6-磷酸合酶基因载体的构建及转基因烟草的耐旱性 被引量:78
3
作者 赵恢武 陈杨坚 +2 位作者 胡鸢雷 高音 林忠平 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2000年第6期616-619,共4页
通过PCR程序克隆拟南芥 (Arabidopsisthaliana (L .)Heynh .)的干旱诱导性启动子Prd2 9A及来自酿酒酵母(SaccharomycescerevisiaeHansen)的海藻糖_6_磷酸合酶基因 (TPS) ,并将它们组成可在植物中表达的载体RT。通过根癌土壤杆菌 (Agroba... 通过PCR程序克隆拟南芥 (Arabidopsisthaliana (L .)Heynh .)的干旱诱导性启动子Prd2 9A及来自酿酒酵母(SaccharomycescerevisiaeHansen)的海藻糖_6_磷酸合酶基因 (TPS) ,并将它们组成可在植物中表达的载体RT。通过根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens (SmithetTownsend)Conn)LBA44 0 4介导 ,获得转基因烟草 (NicotianatabacumL .)。Southern分析表明TPS基因已经整合到烟草基因组中。Northern分析表明TPS基因的表达受干旱胁迫的诱导。转基因烟草的形态发生多种改变 ,包括变矮 ,茎变细 ,叶子呈柳叶状 ,腋芽明显 ,同时耐旱性得到增强。 展开更多
关键词 干旱诱导性启动子 烟草耐旱性 TPS 转基因
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农杆菌介导的苏云金杆菌抗虫基因cryIA(b)和cryIA(c)在水稻中的遗传转化及蛋白表达 被引量:70
4
作者 项友斌 梁竹青 +4 位作者 高明尉 舒庆尧 叶恭银 成雄鹰 I.Altosaar 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期494-500,共7页
通过农杆菌介导法用含有抗潮霉素和 G U S 基因的双元载体将杀虫结晶蛋白基因cry I A( b) 和cry I A(c) 导入到籼、粳稻幼穗愈伤组织中,然后经过在含有不同浓度潮霉素的培养基上进行数次筛选,获得一批 Bt 转基... 通过农杆菌介导法用含有抗潮霉素和 G U S 基因的双元载体将杀虫结晶蛋白基因cry I A( b) 和cry I A(c) 导入到籼、粳稻幼穗愈伤组织中,然后经过在含有不同浓度潮霉素的培养基上进行数次筛选,获得一批 Bt 转基因株。经 P C R、 Southern 杂交及 Western 印迹分析证实此二基因已整合进水稻中,饲虫试验结果表明,转基因株具有100 % 杀虫率。 展开更多
关键词 水稻 农杆菌介导 杀虫基因 杀虫蛋白表达 转基因
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植物基因工程表达载体的改进和优化策略 被引量:54
5
作者 侯丙凯 夏光敏 陈正华 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期492-497,共6页
外源基因在转基因植物中表达效率低一直是令相关研究者困扰的一个问题。转基因植物的生物安全性最近在全球范围内开始引起世人的担忧。本文简要介绍了近年来在植物表达载体构建方面所采用的一些新策略 ,这些策略有助于增强外源基因的表... 外源基因在转基因植物中表达效率低一直是令相关研究者困扰的一个问题。转基因植物的生物安全性最近在全球范围内开始引起世人的担忧。本文简要介绍了近年来在植物表达载体构建方面所采用的一些新策略 ,这些策略有助于增强外源基因的表达水平、提高生物工程体的安全性。 展开更多
关键词 植物 转基因 表达载体 优化 改进
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离子束生物工程应用研究进展 被引量:58
6
作者 吴丽芳 李红 《物理》 CAS 1999年第12期708-712,共5页
离子束生物工程学是一门首先兴起于中国的交叉学科.虽然仅有10 余年的发展历程,但已在诱变育种、植物转基因、生命起源和进化以及环境辐射与人类健康等方面取得了一些重要的阶段性研究结果,开辟了具有重要理论和应用价值的研究方... 离子束生物工程学是一门首先兴起于中国的交叉学科.虽然仅有10 余年的发展历程,但已在诱变育种、植物转基因、生命起源和进化以及环境辐射与人类健康等方面取得了一些重要的阶段性研究结果,开辟了具有重要理论和应用价值的研究方向,为遗传工程及相关领域提供了新的研究手段.随着离子束生物工程学的进一步发展,它还将在细胞加工。 展开更多
关键词 离子事生物工程 诱变育种 转基因
原文传递
细菌mtl-D基因的克隆及在转基因八里庄杨中的表达 被引量:41
7
作者 刘凤华 孙仲序 +3 位作者 崔德才 杜保兴 王春荣 陈受宜 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2000年第5期428-433,共6页
运用PCR方法克隆了大肠杆菌1-磷酸甘露醇脱氢酶(mtl-D)基因,序列分析表明与已发表序列相比,除第 416位密码子由 AAA代替 CAT、相应的氨基酸由 Lys代替 His外,其他部分均相同。该基因插入植物双元载体中... 运用PCR方法克隆了大肠杆菌1-磷酸甘露醇脱氢酶(mtl-D)基因,序列分析表明与已发表序列相比,除第 416位密码子由 AAA代替 CAT、相应的氨基酸由 Lys代替 His外,其他部分均相同。该基因插入植物双元载体中,经土壤农杆菌介导导入八里庄杨[1],经卡那霉素筛选后再经盐胁迫筛选获得一批较高耐盐性的转化植株,在附加 0.6%NaCl的培养基中生长良好,而对照在附加 0.4% NaCl的培养基中不能存活。对转化植株进行的 PCR检测、Northern杂交,说明外源基因已整合到染色体上并且有转录。 展开更多
关键词 大肠杆菌mtl-D基因 八里庄杨 转基因 耐盐性
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杨树NL-80106转Bt基因植株的获得及抗虫性 被引量:53
8
作者 饶红宇 陈英 +3 位作者 黄敏仁 王明庥 伍宁丰 范云六 《植物资源与环境学报》 CAS CSCD 2000年第2期1-5,共5页
通过根癌农杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens)介导将苏云金杆菌 (Bacillusthuringiensis)毒蛋白基因Bt转入杨树NL 80 10 6 (美洲黑杨×小叶杨 ,Populusdeltoides×Populussimonii) ,获得了再生植株。PCR及PCR Southernblotting... 通过根癌农杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens)介导将苏云金杆菌 (Bacillusthuringiensis)毒蛋白基因Bt转入杨树NL 80 10 6 (美洲黑杨×小叶杨 ,Populusdeltoides×Populussimonii) ,获得了再生植株。PCR及PCR Southernblotting的分析结果表明 ,Bt基因已整合到基因组中。部分转基因植株的杀虫实验表明 ,转基因植株B45和B6 4对一龄舞毒蛾 (LymantriadisparLinn .)幼虫有明显抗性 ,饲喂转基因杨树叶片的幼虫死亡率显著高于未转基因的对照植株。 展开更多
关键词 杨树 转基因 抗虫性 BT基因导入
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抗菌肽基因转化樱桃矮化砧木获得抗根瘤病的转基因植株 被引量:44
9
作者 方宏筠 王关林 +3 位作者 王火旭 贾士荣 董云洲 唐益雄 《Acta Botanica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1999年第11期1192-1198,共7页
建立了樱桃(PrunuspseudocerasusLindl.)矮化砧木茎尖高频再生系统,并利用根癌土壤杆菌(Agrobacteriumtumefaciens(SmithetTownsend)Conn)介导将gus及抗菌肽基因导入樱桃矮化砧木,获得19个转化株系。经Southernblot检测证明,... 建立了樱桃(PrunuspseudocerasusLindl.)矮化砧木茎尖高频再生系统,并利用根癌土壤杆菌(Agrobacteriumtumefaciens(SmithetTownsend)Conn)介导将gus及抗菌肽基因导入樱桃矮化砧木,获得19个转化株系。经Southernblot检测证明,抗菌肽基因已整合到樱桃的基因组。转基因植株接瘤实验、gus基因表达产物的颜色反应及叶片提取液对根癌土壤杆菌C58的抑菌实验表明,抗菌肽基因在转化植株中可能已得到有效表达,试管苗具有明显的抗根瘤病特性。还研究了茎尖分生组织的种质转化特点,结果表明它是一个较好的转化系统,可获得较高的转化频率。 展开更多
关键词 樱桃 抗菌肽 基因 茎尖 根瘤菌病 转基因
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果聚糖蔗糖转移酶基因的克隆及耐盐转基因烟草的培育 被引量:32
10
作者 张慧 董伟 +3 位作者 周骏马 杜宝兴 谷冬梅 陈受宜 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期180-186,共7页
采用PCR方法克隆了枯草杆菌(Bacilussubtilis)果聚糖蔗糖转移酶基因(SacB),将其与克隆自酵母(Saccharomycescerevisiae)的羧肽酶A的液泡引导信号序列连接得到嵌合基因。测序验证... 采用PCR方法克隆了枯草杆菌(Bacilussubtilis)果聚糖蔗糖转移酶基因(SacB),将其与克隆自酵母(Saccharomycescerevisiae)的羧肽酶A的液泡引导信号序列连接得到嵌合基因。测序验证后,插入含NPTⅡ基因的植物双元表达载体pBin438中,经农杆菌介导转化烟草。部分经卡那霉素筛选的抗性芽能在含1%NaCl的MS培养基上正常生根,而未转化芽不能生根或根生长缓慢。转基因小苗移入盛蛭石的花盆并浇灌含1%NaCl的hoagland′s营养液,17d后,其中一些转基因烟草植株生长良好,而未转化苗出现明显萎蔫。PCR扩增及Northern分析证实SacB基因已导入转基因植株并得到转录。此结果表明SacB基因的植物基因工程可提高烟草植株的耐盐性。 展开更多
关键词 果聚糖 蔗糖 移酶基因 转基因 烟草 耐盐性
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使用双抗真菌蛋白基因提高水稻抗病性的研究 被引量:49
11
作者 冯道荣 许新萍 +3 位作者 卫剑文 李宝健 杨祁云 朱小源 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1999年第11期1187-1191,共5页
将含有串联的RC24基因和β-1,3-Glu基因的pGB12质粒与含有hpt基因的p35H质粒用基因枪法同时导入华南地区一优良籼稻(OryzasativaL.ssp.indica)品种“七丝软占”中。Southernblot分析证明获得17个同时整合有RC24基因和β-1,3-Gl... 将含有串联的RC24基因和β-1,3-Glu基因的pGB12质粒与含有hpt基因的p35H质粒用基因枪法同时导入华南地区一优良籼稻(OryzasativaL.ssp.indica)品种“七丝软占”中。Southernblot分析证明获得17个同时整合有RC24基因和β-1,3-Glu基因的转基因系。而Northernblot分析表明在不同的转基因系中两基因的表达量存在很大差异。对R1及R2代转基因植株的分子分析表明,这两个基因已稳定遗传到R1、R2代,并在RNA水平上持续表达。转基因植株苗期抗稻瘟病试验表明,部分R1代转基因植株苗对广东省稻瘟病菌(Magnaphorthagrisea)中的5个代表菌株表现出不同程度的抗性提高。而其中18株抗性提高的R1代转基因植株的R2代各苗对广东省稻瘟病菌优势生理小种中的3个代表菌株表现出一致的抗性提高,结合分子分析,初步证明获得10株整合有RC24和β-1,3-Glu双基因的稻瘟病抗性提高的R1代转基因纯系植株。且这些转基因纯系植株的离体叶片对纹枯病菌(RhizoctoniaSolaniKuhn的抗性也明显提高。 展开更多
关键词 转基因 水稻 碱性几丁质酶 基因 纹枯病菌
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抗虫杂交棉的选育与利用研究 被引量:67
12
作者 靖深蓉 邢朝柱 +3 位作者 袁有禄 刘少林 王海林 郭立平 《中国棉花》 1997年第7期15-17,共3页
抗虫杂交棉是以丰产、抗病、综合性状好的品种为母本,以抗棉铃虫Bt转基因棉为父本,其杂种一代既继承了母本的丰产性,又继承了父本的抗虫性,且杂种优势明显。杂种二代抗虫个体和非抗虫个体分离比例为3∶1,回交一代的分离比例为... 抗虫杂交棉是以丰产、抗病、综合性状好的品种为母本,以抗棉铃虫Bt转基因棉为父本,其杂种一代既继承了母本的丰产性,又继承了父本的抗虫性,且杂种优势明显。杂种二代抗虫个体和非抗虫个体分离比例为3∶1,回交一代的分离比例为1∶1,表现单基因显性遗传;叶色深浅与抗虫性有关,一般表现叶绿素含量高,叶色较深,抗虫效果好。抗虫杂交棉是综合治理棉铃虫最为经济有效的措施之一。 展开更多
关键词 棉花 抗虫品种 杂种优势利用 抗虫性 转基因
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论脯氨酸累积与植物抗渗透胁迫 被引量:72
13
作者 焦蓉 刘好宝 +7 位作者 刘贯山 王树林 侯娜 王全贞 刘朝科 冯祥国 胡晓明 靳义荣 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2011年第7期216-221,共6页
脯氨酸是植物体内适应逆境胁迫的一种重要的渗透调节物质。此文概述了脯氨酸在植物抗渗透胁迫中的作用、累积机制以及植物编码脯氨酸代谢、运输相关的酶基因和抗渗透胁迫基因工程改良等方面的研究进展,分析提出了目前植物抗渗透胁迫研... 脯氨酸是植物体内适应逆境胁迫的一种重要的渗透调节物质。此文概述了脯氨酸在植物抗渗透胁迫中的作用、累积机制以及植物编码脯氨酸代谢、运输相关的酶基因和抗渗透胁迫基因工程改良等方面的研究进展,分析提出了目前植物抗渗透胁迫研究方面存在的问题,并对今后研究的重点进行了展望,以期为植物抗逆性的遗传改良提供理论依据。 展开更多
关键词 脯氨酸 累积 渗透胁迫 脯氨酸合成酶基因 转基因
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农杆菌介导将Bt杀虫蛋白基因导入优良玉米自交系的研究 被引量:43
14
作者 张艳贞 王罡 +4 位作者 胡汉桥 魏松红 季静 王军军 李昌 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期35-39,共5页
以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系 34 0、4112为材料 ,用带有质粒pGBIL0 4(Pactin -Bt-Tnos)的根癌农杆菌LBA44 0 4转化其幼胚及其初始愈伤组织 ,共培养 3天后 ,在含PPT的培养基上连续筛选培养 3代 ,然后分化获得再生植株。PCR检... 以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系 34 0、4112为材料 ,用带有质粒pGBIL0 4(Pactin -Bt-Tnos)的根癌农杆菌LBA44 0 4转化其幼胚及其初始愈伤组织 ,共培养 3天后 ,在含PPT的培养基上连续筛选培养 3代 ,然后分化获得再生植株。PCR检测证明目的基因已整合到再生植株的基因组中。实验结果表明幼胚预培养后形成的新鲜的初始愈伤组织是比较适宜的转化受体 ,结果还发现将共培养温度降到 2 2℃可以提高农杆菌介导的玉米遗传转化的筛选频率。 展开更多
关键词 玉米 自交系 转基因 农杆菌 预培养 共培养温度 PCR Bt杀虫蛋白基因
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重要禾谷类植物转基因研究 被引量:27
15
作者 徐子勤 《生物工程进展》 CSCD 2001年第1期59-74,共16页
与双子叶植物相比 ,禾谷类植物的离体培养和再生主要采用一些胚性组织 ,对它们的转基因研究发展相对比较缓慢。 90年代以来 ,离体培养方面的经验被有效地融入DNA转移技术 ;通过筛选和再生少量的转化细胞 ,已得到了不少可育的小麦、水稻... 与双子叶植物相比 ,禾谷类植物的离体培养和再生主要采用一些胚性组织 ,对它们的转基因研究发展相对比较缓慢。 90年代以来 ,离体培养方面的经验被有效地融入DNA转移技术 ;通过筛选和再生少量的转化细胞 ,已得到了不少可育的小麦、水稻、玉米、大麦等禾谷类转基因植物。本文着重综述了禾谷类植物转化方法和选择体系方面的研究现状 ,同时讨论了该研究方向的未来发展趋势。 展开更多
关键词 禾谷类植物 转基因 研究现状 胚性组织 选择体系
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核桃体细胞胚发生与转基因研究进展 被引量:47
16
作者 汤浩茹 王永清 任正隆 《林业科学》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期102-110,共9页
总结了核桃体细胞胚发生的研究进展 ,列表统计已报道的核桃 5个种和 3个杂种体细胞胚发生的外植体与诱导条件 ,重点论述了影响核桃体细胞胚发生与次生胚发生的因素 ,介绍了核桃体细胞胚萌发与转化的方法。还总结核桃转基因研究的进展 。
关键词 核桃 体细胞胚发生 转基因 离体培养
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草莓叶片再生芽及遗传转化系统的建立 被引量:53
17
作者 邓馨 胡文玉 《植物学通报》 CSCD 2000年第2期174-178,共5页
本文从五个草莓品种中筛选了再生频率高的品种M1 4,并进一步提高其再生频率至 1 0 0 % ,单叶盘再生芽数至 1 0 .0个 ;石蜡切片法观察其芽多起源于愈伤组织 ,少数由叶细胞脱分化后直接形成 ;该再生体系用于根癌农杆菌菌株EHA1 0 5介导的... 本文从五个草莓品种中筛选了再生频率高的品种M1 4,并进一步提高其再生频率至 1 0 0 % ,单叶盘再生芽数至 1 0 .0个 ;石蜡切片法观察其芽多起源于愈伤组织 ,少数由叶细胞脱分化后直接形成 ;该再生体系用于根癌农杆菌菌株EHA1 0 5介导的基因转化 ,并以 1 4.5%频率得到抗卡那霉素的抗性芽 ,初步鉴定是转化芽。上述结果表明高频率稳定的草莓品种M1 4叶片再生芽及遗传转化系统已经形成 ,并可以用于转基因研究。 展开更多
关键词 草莓 再生芽 转基因
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转基因水稻研发进展 被引量:67
18
作者 朱祯 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2010年第2期9-16,共8页
水稻是世界上最重要的粮食作物之一,在我国粮食生产中占有举足轻重的地位。我国在杂交水稻育种领域取得了世界瞩目的成就,为我国粮食安全作出了重要贡献。转基因技术为水稻育种提供了新的手段,自20世纪80年代启动转基因水稻项目以来,我... 水稻是世界上最重要的粮食作物之一,在我国粮食生产中占有举足轻重的地位。我国在杂交水稻育种领域取得了世界瞩目的成就,为我国粮食安全作出了重要贡献。转基因技术为水稻育种提供了新的手段,自20世纪80年代启动转基因水稻项目以来,我国全方位地开展了转基因水稻育种研究。目前,我国转基因水稻的研究总体处于国际先进水平,转基因抗虫水稻研究处于世界领先水平,有可能率先实现产业化,转基因水稻的应用将为确保我国粮食安全作出重要的贡献。 展开更多
关键词 转基因 水稻育种 研发进展 产业化
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油菜农杆菌转基因体系的建立及转PEP反义基因油菜的获得 被引量:43
19
作者 郎春秀 胡张华 +2 位作者 刘智宏 黄锐之 陈锦清 《浙江农业学报》 CSCD 1999年第2期55-58,共4页
本研究建立了油菜农杆菌转基因技术体系,用根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)共培养法将PEP反义基因导入甘蓝型油菜(BrasicanapusL.)主栽品种浙油758和浙优油1号,获得高含油量... 本研究建立了油菜农杆菌转基因技术体系,用根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)共培养法将PEP反义基因导入甘蓝型油菜(BrasicanapusL.)主栽品种浙油758和浙优油1号,获得高含油量的油菜植株。实验所用外植体为培养8~10d的无菌苗下胚轴;农杆菌为EHA101(含AntiPEP/PIG121),外植体经农杆菌感染后共培养2d,转入含500mg/L羧青霉素的MS培养基上,1周后转入含羧青霉素及潮霉素的培养基上,以后每2周继代一次至出现抗性芽,转化频率为275%(浙优油1号);分化的茎芽在含相同抗生素的生根培养基中生根并长成完整小植株,转入土壤成为正常植株。经GUS组织化学染色及PCR扩增检测,证明外源基因已插入油菜基因组并得到表达。 展开更多
关键词 根癌农杆菌 油菜 转基因 PEP反义基因
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利用转基因技术育成耐贮藏番茄——华番1号 被引量:39
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作者 叶志彪 李汉霞 +4 位作者 刘勋甲 向长萍 郑世发 王春梅 余科秀 《中国蔬菜》 北大核心 1999年第1期6-10,共5页
利用转基因技术将乙烯形成酶(EFE)反义基因导入到番茄中获得耐贮藏番茄系统D2,再结合杂种优势育种方法用A53与其杂交配组育成杂种一代华番1号。该品种在常温条件(13~30℃)下可贮藏45d(天)左右,产量与当地主栽... 利用转基因技术将乙烯形成酶(EFE)反义基因导入到番茄中获得耐贮藏番茄系统D2,再结合杂种优势育种方法用A53与其杂交配组育成杂种一代华番1号。该品种在常温条件(13~30℃)下可贮藏45d(天)左右,产量与当地主栽品种早丰相当,且品质好,适应性广。 展开更多
关键词 番茄 华番1号 转基因 耐贮藏 一代杂种
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