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红细胞血液制品中红细胞微粒检测方法的建立 被引量：5
1
作者 张宁洁 卜艳红 王勇军 《中国输血杂志》 CAS 北大核心 2015年第10期1218-1221,共4页
目的建立1种准确、稳定的红细胞制品中红细胞微粒(RMPs)的分离检测方法。方法首先以低速离心(3 000 g、20 min)分离得到红细胞悬液上清,再通过提高离心力(10 000 g、10 min)去除红细胞碎片等杂质,获得富含RMPs的红细胞上清,设置超滤离... 目的建立1种准确、稳定的红细胞制品中红细胞微粒(RMPs)的分离检测方法。方法首先以低速离心(3 000 g、20 min)分离得到红细胞悬液上清,再通过提高离心力(10 000 g、10 min)去除红细胞碎片等杂质,获得富含RMPs的红细胞上清,设置超滤离心管使用组和未使用组,分别从上清中分离获得RMPs。对RMPs表面特异抗原CD235a和Annexin V做荧光双染标记,进行流式细胞术检测,将CD235a-PE+/Annexin V-FITC+信号判定为RMPs,分析2组RMPs的纯度和数量差异。选择RMPs得率较高组实验方法,进一步检测储存5、9及30 d的RMPs数量。结果在首次3 000 g离心20 min,第2次10 000 g离心10 min的离心条件下,可从去白悬浮红细胞制品中分离获得富含RMPs的上清,相比于未使用超滤离心管组(1.91±0.51)%,超滤离心管使用组RMPs的获得率(48.91±4.37)%(P<0.01);储存5、30 d的RMPs相对数量分别为(44.67±6.13)%、(75.92±5.51)%(P<0.05)。结论 "二次离心"方法和超滤离心管结合应用,可明显提高RMPs的获得率;红细胞在储存条件下可产生大量RMPs,RMPs数量随着储存时间的增加而增加。 展开更多
关键词 红细胞微粒 超滤离心管 流式细胞术 输血
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多种血清小分子蛋白分离提纯方法比较研究 被引量：1
2
作者 赵莲 曾希 +2 位作者 杨静 李征 沈守荣 《现代生物医学进展》 CAS 2010年第9期1628-1630,共3页
目的:比较不同磁珠及超滤离心管对血清小分子蛋白的分离提纯能力,筛选较优的分离提纯方法。方法:分别利用Cu2+螯合磁珠(MB-IMAC Cu)、弱阳离子磁珠(MB-WCX)、反相C18磁珠(MB-RPC18)及3种不同型号的超滤离心管对同样4例血清标本进行血清... 目的:比较不同磁珠及超滤离心管对血清小分子蛋白的分离提纯能力,筛选较优的分离提纯方法。方法:分别利用Cu2+螯合磁珠(MB-IMAC Cu)、弱阳离子磁珠(MB-WCX)、反相C18磁珠(MB-RPC18)及3种不同型号的超滤离心管对同样4例血清标本进行血清小分子蛋白的分离提纯,比较6种方法对血清高丰度大蛋白的去除能力和处理后血清小分子蛋白质谱图的质量。结果:6种不同的方法均有明显对血清高丰度蛋白的去除能力,其中以超滤离心管效果最明显。在血清小分子蛋白质谱图质量上,磁珠处理后血清生成的质谱图质量更好,其中MB-WCX处理后血清质谱图中总峰数量最多,且在各分子量范围均分布均匀,适于后期鉴定。结论:利用MB-WCX对原始血清进行分离提纯能够获得质量较好的血清小分子蛋白质谱图,可以为进一步实验中寻找差异小分子蛋白并实现兴趣蛋白鉴定奠定良好基础。 展开更多
关键词 血清小分子蛋白 磁珠 超滤离心管
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Amicon~ Ultra-0.5超滤离心管在脱落细胞DNA提取中的应用
3
作者 马庆 童梦洁 夏冬景 《法医学杂志》 CAS CSCD 2018年第2期189-190,共2页
在法医物证检验中,提取产物的DNA浓度是决定该检材能否被检出和发挥作用的关键因素。当浓度较低达不到检测阈值时,常需要对提取产物进行浓缩,常用的浓缩设备为Microcon-100超滤管,但该设备仅被用于联合有机法及Chelex法来浓缩提取产物。
关键词 法医遗传学 提取法 脱落细胞 Amicon Ultra-0.5超滤离心管
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