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猪繁殖和呼吸综合征病毒膜蛋白和核衣壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达
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作者 蔡家利 蔡宝祥 姜平 《中国病毒学》 CSCD 1999年第3期244-248,共5页
以 Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ 弱毒株膜蛋白（ Ｍ） 和核衣壳（ Ｎ） 蛋白基因为模板，设计的一对含有 Ｅｃｏ Ｒ Ｉ 和 Ｂａｍ Ｈ Ｉ酶切位点的引物，通过 Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ 扩增出一约９００ ｂｐ 的 Ｍ Ｎ 基因片段，将此基因片段成功克隆... 以 Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ 弱毒株膜蛋白（ Ｍ） 和核衣壳（ Ｎ） 蛋白基因为模板，设计的一对含有 Ｅｃｏ Ｒ Ｉ 和 Ｂａｍ Ｈ Ｉ酶切位点的引物，通过 Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ 扩增出一约９００ ｂｐ 的 Ｍ Ｎ 基因片段，将此基因片段成功克隆于高效表达载体ｐ Ｂ Ｖ２２０ ，构建成重组质粒ｐ Ｂ Ｖ Ｍ Ｎ，导入大肠杆菌 Ｄ Ｈ５α，经温敏诱导，成功地表达了 Ｍ Ｎ 基因。表达产物经 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 电泳和 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 印迹分析，其分子量约３４ ｋ Ｄ，与兔抗 Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ 高免血清发生反应，经光密度扫描分析，表达产物量占菌体总蛋白的１２ ％ 。该研究为 Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ 展开更多
关键词 猪 繁殖呼吸综合征 病毒 质粒pv220 表达 M蛋白
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