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衣原体质粒编码蛋白对衣原体在消化道定植及其耐受胃酸杀伤的作用
1
作者 马璟玥 刘全忠 +1 位作者 钟光明 刘原君 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 2023年第11期726-733,共8页
目的初步探索鼠衣原体质粒编码蛋白(pGP)维持鼠衣原体定植在消化道的作用,并分析具体参与鼠衣原体在消化道抵制胃酸杀伤作用的pGP种类。方法选取6周龄雌性健康C57BL/6J小鼠进行灌胃感染不同剂量的鼠衣原体,包括质粒完整衣原体、质粒缺... 目的初步探索鼠衣原体质粒编码蛋白(pGP)维持鼠衣原体定植在消化道的作用,并分析具体参与鼠衣原体在消化道抵制胃酸杀伤作用的pGP种类。方法选取6周龄雌性健康C57BL/6J小鼠进行灌胃感染不同剂量的鼠衣原体,包括质粒完整衣原体、质粒缺乏衣原体、质粒缺陷衣原体(pGP3S-CM、pGP4S-CM、pGP5S-CM、pGP6S-CM、pGP7S-CM、pGP8d-CM)。于感染后第3、7、14、21、28、35、42、49、56、63天采集直肠拭子,感染后第3、7、14、21、28天取小鼠消化道不同部位组织(胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠、盲肠),离心取上清液,将上清液接种于海拉细胞进行间接免疫荧光染色,荧光显微镜下计数衣原体包涵体,计算组织中鼠衣原体的感染数量。将pH值为1.0、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0的模拟胃酸分别与质粒完整衣原体、pGP3S-CM和pGP4S-CM共同孵育10 min,计算经过不同pH值模拟胃酸杀伤后存活鼠衣原体的数量。统计学比较采用两独立样本t检验。结果采用剂量分别为1×103衣原体包涵体形成单位(IFUs)、1×10^(4) IFUs、1×10^(5) IFUs、1×10^(6) IFUs质粒完整衣原体灌胃小鼠后,感染第7至56天小鼠直肠拭子均可检测到质粒完整衣原体,而质粒缺乏衣原体仅在高剂量1×10^(5) IFUs和1×10^(6) IFUs灌胃小鼠感染后第14天、第7天的直肠拭子中分别被检测到,较质粒完整衣原体在消化道被检出时间明显延迟。采用1×10^(5) IFUs质粒完整衣原体灌胃小鼠感染后第3至21天的胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠、直肠组织中均可检测出衣原体,第28天后局限在盲肠、结肠、直肠,而质粒缺乏衣原体以相同剂量灌胃感染后仅在第14、21、28天的盲肠、结肠、直肠中被检出。pGP3S-CM与pH值为3.0、3.5、4.0、4.5模拟胃酸共同孵育后存活的鼠衣原体数量均低于质粒完整衣原体组,差异均有统计学意义(t=-0.79、-6.44、-6.99、- 展开更多
关键词 胃酸 衣原体 消化道 质粒编码蛋白
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沙眼衣原体质粒编码蛋白3的致病性及免疫保护性研究
2
作者 邓晗 程瑞琴 +7 位作者 陈土地 宋雅欣 梁银迎 李平露 赵婉星 马璟玥 王惠平 侯淑萍 《中国中西医结合皮肤性病学杂志》 CAS 2024年第1期6-11,共6页
目的 探索沙眼衣原体(CT)质粒编码蛋白3(Pgp3)的致病性及免疫保护性。方法 CT L2构建株(GFP)、野生株(WT)和质粒缺失株(PF)分别感染Hela细胞,蛋白质免疫印迹法(Western blotting)和间接免疫荧光法(IFA)检测Pgp3蛋白表达水平;L2 GFP、WT... 目的 探索沙眼衣原体(CT)质粒编码蛋白3(Pgp3)的致病性及免疫保护性。方法 CT L2构建株(GFP)、野生株(WT)和质粒缺失株(PF)分别感染Hela细胞,蛋白质免疫印迹法(Western blotting)和间接免疫荧光法(IFA)检测Pgp3蛋白表达水平;L2 GFP、WT和PF菌株经阴道分别感染C3H小鼠,感染后不同时间点经IFA评估生殖道包涵体形成单位(IFU)数量;组氨酸标记的Pgp3(His-Pgp3)体外刺激人输卵管上皮细胞,24 h后经Hoechst 33 528染色和流式细胞术检测细胞凋亡情况;L2 WT体外感染L929和L929-Pgp3细胞,在感染后30、60及80 h固定细胞并计算IFU和细胞核数量。L2 GFP和WT菌株经阴道分别感染C3H小鼠,50 d后各组均以L2 WT菌株攻毒,攻毒后不同时间点评估生殖道IFU数量。结果 L2 GFP Pgp3蛋白表达水平高于L2 WT,L2 PF无Pgp3蛋白表达;小鼠感染后第3、7、10和14天,L2 GFP感染组IFU数量显著高于L2 WT和L2 PF感染组,且L2 GFP组感染周期最长;Pgp3体外干预组细胞凋亡率显著低于空白组,L2 WT体外感染L929和L929-Pgp3细胞60 h和80 h后,L929-Pgp3组IFU值显著高于L929组,且宿主细胞消亡数量显著低于L929组;动物实验显示L2 GFP组经L2 WT菌株攻毒后下生殖道IFU数量显著低于L2 WT组,且L2 GFP组感染周期显著短于L2 WT组。结论 Pgp3可抑制宿主细胞凋亡并促进CT在细胞间播散感染;内源性Pgp3有良好的免疫保护性。 展开更多
关键词 沙眼衣原体 质粒编码蛋白3 致病性 免疫保护性
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衣原体pORF5质粒编码蛋白致病机制的研究进展 被引量：1
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作者 李群 李忠玉 《微生物学免疫学进展》 2019年第2期75-78,共4页
衣原体(Chlamydia)是一类具有独特的两相发育周期、专性细胞内寄生的革兰阴性菌,能引起人类多种疾病。pORF5是衣原体隐蔽性质粒编码的分泌性效应蛋白。近年来研究证实,pORF5质粒编码蛋白是衣原体重要的毒力蛋白,与衣原体致病密切相关。... 衣原体(Chlamydia)是一类具有独特的两相发育周期、专性细胞内寄生的革兰阴性菌,能引起人类多种疾病。pORF5是衣原体隐蔽性质粒编码的分泌性效应蛋白。近年来研究证实,pORF5质粒编码蛋白是衣原体重要的毒力蛋白,与衣原体致病密切相关。现就衣原体pORF5质粒编码蛋白的生物学特性、致炎性作用、抗凋亡作用及促自噬作用作一概述。 展开更多
关键词 衣原体 pORF5质粒编码蛋白 致病机制
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