多药耐药基因与细胞凋亡基因产物在非小细胞肺癌中的表达及其意义 被引量：7

1

作者 陈桃香 熊永炎 +1 位作者 余少平 田素芳 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2004年第1期9-11,共3页

目的　检测非小细胞肺癌 (NSCLC)多药耐药相关基因及细胞凋亡基因的表达 ,探讨其表达的相关性及临床病理意义。方法　采用SP免疫组化法检测 113例NSCLC中多药耐药相关蛋白 (MRP)、谷胱甘肽巯基转移酶π(GST π)、肺耐药相关蛋白 (LRP)... 目的　检测非小细胞肺癌 (NSCLC)多药耐药相关基因及细胞凋亡基因的表达 ,探讨其表达的相关性及临床病理意义。方法　采用SP免疫组化法检测 113例NSCLC中多药耐药相关蛋白 (MRP)、谷胱甘肽巯基转移酶π(GST π)、肺耐药相关蛋白 (LRP)、突变型 p5 3和bcl 2的表达。 结果　NSCLC中MRP、GST π、LRP、p5 3和bcl 2的检出率分别为79.6 5 %、75 .2 2 %、80 .5 3%、6 1.95 %、5 9.2 9%。MRP、LRP和bcl 2的表达与组织学类型有关 (P <0 .0 5 )。p5 3与肿瘤细胞的分化程度有关 (P <0 .0 5 ) ,随着肿瘤细胞分化的恶性程度增加呈递增趋势。MRP与GST π、LRP表达之间 ,p5 3和bcl 2表达之间相关性有统计学意义 (P <0 .0 5 )。结论　不同组织学类型NSCLC的多药耐药性各不相同 ,且其耐药性之间还存在一定的相关性。检测NSCLC的多药耐药性有助于指导肺癌的化疗。 展开更多

关键词 多药耐药 细胞凋亡 非小细胞肺癌 基因表达 谷胱甘肽巯基转移酶 化疗

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DEHP对土壤蚯蚓氧化胁迫及DNA损伤的研究 被引量：10

2

作者 刘文军 高健鹏 +3 位作者 王冠颖 朱鲁生 王金花 王军 《土壤学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期1170-1180,共11页

土壤环境中的酞酸酯污染日益严重,为了探讨和分析典型酞酸酯邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(Di(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP)对土壤动物的生态毒理效应,以赤子爱胜蚓为指示生物,暴露于DEHP浓度为CK、0.1、1、10、50 mg kg^(-1)人工土壤中... 土壤环境中的酞酸酯污染日益严重,为了探讨和分析典型酞酸酯邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(Di(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP)对土壤动物的生态毒理效应,以赤子爱胜蚓为指示生物,暴露于DEHP浓度为CK、0.1、1、10、50 mg kg^(-1)人工土壤中,并于染毒后的7、14、21、28d取样测定。通过蚯蚓体内的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物(POD)、谷胱甘肽转移酶(GST)等指标反映DEHP对蚯蚓的氧化激活程度,通过活性氧自由基(ROS)的含量反映DEHP对蚯蚓的细胞毒性,通过丙二醛(MDA)含量和Olive尾矩反映DEHP对蚯蚓的遗传毒性,从多个角度评价DEHP对蚯蚓的生态毒理效应。结果表明:(1)在DEHP的刺激下,各浓度组蚯蚓的SOD、CAT、POD、GST活性均呈激活状态,表明DEHP对蚯蚓的抗氧化酶有诱导作用;(2)DEHP影响蚯蚓的ROS含量,各染毒处理组与对照组相比均升高且差异性明显,表现出明显的剂量—效应关系;(3)对比各染毒处理组之间的数据,DEHP对蚯蚓MDA含量的影响无明显规律;(4)DEHP可使蚯蚓GST呈激活状态,表明中高浓度的DEHP对蚯蚓GST具有诱导作用;(5)DEHP能够引起蚯蚓体腔细胞DNA的损伤,且随着浓度的增加,Olive尾矩值随之增加,说明DNA损伤程度与DEHP浓度之间具有剂量-效应关系。从实验结果可以看出,DEHP可以对蚯蚓机体和DNA造成一定程度的损伤,表现出较强的生态毒理效应。 展开更多

关键词 邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯 抗氧化酶系 谷胱甘肽巯基转移酶 丙二醛 活性 氧 彗星实验

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GSTM1、GSTT1基因多态性与中国人前列腺癌风险关系 被引量：9

3

作者 王亚林 江军 +1 位作者 王洛夫 刘元丰 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1039-1041,共3页

目的　检测谷胱甘肽巯基转移酶GSTM1、GSTT1基因多态性与中国人前列腺癌风险关系。方法　收集重庆地区前列腺癌血标本81例,5 0岁以上对照组血标本90例,从外周血提取DNA ,采用聚合酶链反应(PCR)分析GSTM1及GSTT1无效基因型分布频率。结果... 目的　检测谷胱甘肽巯基转移酶GSTM1、GSTT1基因多态性与中国人前列腺癌风险关系。方法　收集重庆地区前列腺癌血标本81例,5 0岁以上对照组血标本90例,从外周血提取DNA ,采用聚合酶链反应(PCR)分析GSTM1及GSTT1无效基因型分布频率。结果　GSTM1无效基因型在前列腺癌和对照组分布频率分别为5 4 3 %、44 4% ,两组间无显著统计学差异(P =0 197,OR =1 486,95 %CI为0 813～2 718) ;GSTT1无效基因型在前列腺癌和对照组中分布频率分别为5 3 1%和5 3 3 % ,两组间无显著统计学差异(P =0 974,OR =0 99,95 %CI为0 5 43～1 80 7) ;GSTM1无效基因型合并GSTT1无效基因型在两组中的分布频率为3 0 %。13 3 % ,两组间有显著差异(P =0 0 3 4,OR =2 3 14 ,95 %CI为1 0 5 4～5 0 76)。结论　GSTM1无效基因型合并GSTT1无效基因型与重庆地区前列腺癌发病明显关联。GSTM1、GSTT1无效基因型与前列腺癌发病风险间无明显相关。GSTM1、GSTT1基因多态性与前列腺癌分期、分级无关。 展开更多

关键词 谷胱甘肽巯基转移酶 GSTM1 GSTT1 多态性 前列腺癌

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苯白血病患者血清GST总酶活性研究 被引量：6

4

作者 李昌吉 王文静 +2 位作者 龙云芳 詹承烈 许峻峰 《工业卫生与职业病》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期75-77,共3页

应用考马斯亮蓝 (KMSL)法测定苯白血病患者和白血病患者血清GST总酶活性。结果表明 ,苯白血病患者GST总酶活性低于白血病患者和正常对照人群。分层比较发现 ,在GST μ基因缺失的情况下 ,苯白血病组与白血病组、对照组之间GST总酶活性差... 应用考马斯亮蓝 (KMSL)法测定苯白血病患者和白血病患者血清GST总酶活性。结果表明 ,苯白血病患者GST总酶活性低于白血病患者和正常对照人群。分层比较发现 ,在GST μ基因缺失的情况下 ,苯白血病组与白血病组、对照组之间GST总酶活性差异有显著性 (P <0 0 1) ,苯白血病患者GST总酶活性显著低于白血病患者和正常人群 ,而且白血病患者GST总酶活性也低于对照组 (P <0 0 5 )。在GSTμ基因携带的情况下 ,苯白血病组与白血病组、对照组之间GST总酶活性的改变不明显。提示 ,由于GST总酶活性降低 ,从而影响了机体对苯及其衍生物的解毒作用 ,GST总酶活性的改变可能是苯致白血病的主要因素之一。GSTμ基因缺失、GST总酶活性的降低与苯白血病的发生有一定的关系。但其相关的程度如何 。 展开更多

关键词 谷胱甘肽巯基转移酶 苯白血病 白血病

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北细辛提取物对二斑叶螨的毒性 被引量：6

5

作者 韩俊艳 王军 +1 位作者 孙晓逊 纪明山 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第5期1007-1010,共4页

分别采用玻片浸渍法和叶片残毒法测定了北细辛不同溶剂提取物对二斑叶螨雌成螨和卵的触杀活性,采用生化方法测定了高活性提取物作用下雌成螨谷胱甘肽巯基转移酶(GSTs)和Na+,K+-ATP酶的活性。结果表明:北细辛甲醇提取物杀螨作用最强,经1 ... 分别采用玻片浸渍法和叶片残毒法测定了北细辛不同溶剂提取物对二斑叶螨雌成螨和卵的触杀活性,采用生化方法测定了高活性提取物作用下雌成螨谷胱甘肽巯基转移酶(GSTs)和Na+,K+-ATP酶的活性。结果表明:北细辛甲醇提取物杀螨作用最强,经1 mg/ml提取物处理24 h后,雌成螨与卵的校正死亡率分别为66.5%与45.7%,致死中浓度(LC50)分别为0.57 mg/ml和0.88 mg/ml;1/2 LC50浓度的甲醇提取物可使雌成螨GSTs活性升高,同时抑制雌成螨Na+,K+-ATP酶的活性。说明:北细辛甲醇提取物对二斑叶螨雌成螨和卵具有触杀活性,作用机制可能与抑制Na+,K+-ATP酶的活性有关。 展开更多

关键词 北细辛 二斑叶螨 杀螨剂 谷胱甘肽巯基转移酶

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可溶性GST-CRH蛋白原核表达条件的优化及纯化 被引量：5

6

作者 郁硕 陈锋 +5 位作者 刘英富 霍景瑞 李光宗 张益 丁辉 樊毫军 《天津医药》 CAS 2017年第2期146-150,共5页

目的通过谷胱甘肽巯基转移酶(GST)-促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)原核表达条件的优化及纯化,获得可溶性好、纯度高的重组GST-CRH蛋白。方法通过对GST-CRH转化菌表达温度、菌液密度(OD600)、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)浓度以及诱... 目的通过谷胱甘肽巯基转移酶(GST)-促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)原核表达条件的优化及纯化,获得可溶性好、纯度高的重组GST-CRH蛋白。方法通过对GST-CRH转化菌表达温度、菌液密度(OD600)、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)浓度以及诱导时间的摸索,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测可溶性GST-CRH蛋白的表达情况,GST琼脂糖凝胶进行GST-CRH的纯化,Western Blot对表达的目的蛋白进一步鉴定。结果起始OD6000.8、IPTG工作浓度0.1 mmol/L、30℃诱导8 h为GST-CRH最优诱导条件;融合蛋白经Western Blot鉴定为表达的GST-CRH,纯化后纯度>95%。结论建立了GST-CRH的原核表达及纯化方法,获得了高纯度的GST-CRH可溶性蛋白。 展开更多

关键词 促肾上腺皮质素释放激素 谷胱甘肽巯基转移酶 原核表达 纯化

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北细辛挥发油对二斑叶螨的毒性及其酶的影响 被引量：5

7

作者 韩俊艳 王军 +1 位作者 韩雪 纪明山 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期525-528,共4页

采用气相/质谱分析了北细辛挥发油的化学成分,并研究了北细辛挥发油对二斑叶螨的薰蒸毒性,以及对谷胱甘肽巯基转移酶(GSTs)与Na+,K+-ATP酶活性的影响。结果表明:有9种含量大于1%的化学成分占北细辛挥发油总量的86.1%,其中甲基丁香酚含... 采用气相/质谱分析了北细辛挥发油的化学成分,并研究了北细辛挥发油对二斑叶螨的薰蒸毒性,以及对谷胱甘肽巯基转移酶(GSTs)与Na+,K+-ATP酶活性的影响。结果表明:有9种含量大于1%的化学成分占北细辛挥发油总量的86.1%,其中甲基丁香酚含量最高(22.9%),其次为黄樟醚(19.8%);北细辛挥发油在8μg/mL时对二斑叶螨的熏蒸毒性最强,其24和48 h的螨死亡率分别为72.6%和100%;以4μg/mL北细辛挥发油薰蒸,在24 h内螨Na+,K+-ATP酶活性下降、GSTs活性升高。本研究结果提示北细辛挥发油有开发为农业用杀螨剂的潜在价值。 展开更多

关键词 北细辛 挥发油 二斑叶螨 薰蒸 谷胱甘肽巯基转移酶

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越橘谷胱甘肽巯基转移酶基因的克隆及表达 被引量：4

8

作者 刘禹姗 陈丽 +3 位作者 邓宇 蔡莉 李亚东 孙海悦 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期423-431,共9页

以越橘(Vaccinium L.)品种"北陆"为试材,采用反转录PCR克隆技术成功克隆越橘谷胱甘肽巯基转移酶基因c DNA全长序列,获得一个完整的编码区c DNA序列,长为690 bp,编码229个氨基酸,将其命名为VcGSTU1(Gen Bank登录号KT601064)。... 以越橘(Vaccinium L.)品种"北陆"为试材,采用反转录PCR克隆技术成功克隆越橘谷胱甘肽巯基转移酶基因c DNA全长序列,获得一个完整的编码区c DNA序列,长为690 bp,编码229个氨基酸,将其命名为VcGSTU1(Gen Bank登录号KT601064)。经与谷胱甘肽巯基转移酶家族其他成员的氨基酸序列比对和系统进化分析,初步确定VcGSTU1属于谷胱甘肽巯基转移酶Tau家族。生物信息学分析表明,该蛋白不稳定指数为28.80,属于稳定蛋白。预测该蛋白分子量为25.499 ku,等电位点为5.68。蛋白质序列同源比对发现其含有完整的GST-N-Tau和GST-C-Tau结构域。利用反转录PCR和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)2种方法分析谷胱甘肽巯基转移酶的表达模式,该基因在越橘的根、茎、叶芽、叶、花芽、绿果、粉果、蓝果、蓝果果皮、蓝果种子中均有表达,且在蓝果种子中相对表达量最高。 展开更多

关键词 越橘 花青素 谷胱甘肽巯基转移酶 基因克隆 基因表达

原文传递

双歧杆菌对人大肠癌HT_(29)细胞谷胱甘肽巯基转移酶基因的诱导表达 被引量：4

9

作者 唐立 赵宝昌 崔秀云 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2000年第1期17-18,共2页

应用北杂交技术研究双歧杆菌对大肠癌HT29细胞谷胱甘肽巯基转移酶基因的诱导表达发现:双歧杆菌及其发酵过滤液在作用HT29细胞2小时后,谷胱甘肽巯基转移酶基因的mRNA分别提高1.4倍和1.3倍,提示诱导谷胱甘肽巯基转移酶基因的高效表达,阻... 应用北杂交技术研究双歧杆菌对大肠癌HT29细胞谷胱甘肽巯基转移酶基因的诱导表达发现:双歧杆菌及其发酵过滤液在作用HT29细胞2小时后,谷胱甘肽巯基转移酶基因的mRNA分别提高1.4倍和1.3倍,提示诱导谷胱甘肽巯基转移酶基因的高效表达,阻断外来致癌物的亲核攻击可能是双歧杆菌抗肿瘤的一个分子机制。 展开更多

关键词 双歧杆菌 谷胱甘肽巯基转移酶 诱导表达 大肠癌

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苯白血病患者GST_μ基因缺失情况分析 被引量：4

10

作者 王文静 李昌吉 +2 位作者 龙云芳 詹承烈 许峻峰 《职业卫生与病伤》 2000年第4期193-195,共3页

目的 :探讨苯白血病患者 GSTμ 基因缺失频度 ,为进一步研究 GSTμ 基因缺失与苯白血病之间的关系寻找线索。方法 :采用聚合酶链反应 (Polymerase Chain Reaction,PCR)技术检测 GSTμ 基因型。结果 :苯白血病组 GSTμ 基因缺失率为 73.5... 目的 :探讨苯白血病患者 GSTμ 基因缺失频度 ,为进一步研究 GSTμ 基因缺失与苯白血病之间的关系寻找线索。方法 :采用聚合酶链反应 (Polymerase Chain Reaction,PCR)技术检测 GSTμ 基因型。结果 :苯白血病组 GSTμ 基因缺失率为 73.5 3% ,明显高于白血病组 (44 .44% )和对照组 (46 .88% ) (P<0 .0 1 )。苯白血病组的相对危险度为 3.1 5 ,说明在同样接触苯的情况下 ,GSTμ 基因缺失者患苯白血病的危险性是 GSTμ 基因携带者的 3.1 5倍。结论 :GSTμ 基因缺失可能是苯白血病的危险性因素之一。 展开更多

关键词 谷胱甘肽巯基转移酶 GSTμ基因缺失 苯白血病

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肠毒素大肠杆菌耐热肠毒素与谷胱甘肽巯基转移酶融合蛋白的制备和耐热肠毒素抗体测定 被引量：2

11

作者 郑继平 刘向昕 +3 位作者 王令春 王芃 李淑琴 张兆山 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期617-618,共2页

目的:弥补ST的弱抗原性,实现ST抗体测定。方法:采用生物工程技术,融合表达GST和带有前导序列的突变耐热肠毒素proSTm,制备ST融合蛋白,测定ST抗体。结果:测到了抗ST的血清IgG和黏膜IgA。结论:融合蛋白GST/proSTm能有效提高ST的抗原活性,... 目的:弥补ST的弱抗原性,实现ST抗体测定。方法:采用生物工程技术,融合表达GST和带有前导序列的突变耐热肠毒素proSTm,制备ST融合蛋白,测定ST抗体。结果:测到了抗ST的血清IgG和黏膜IgA。结论:融合蛋白GST/proSTm能有效提高ST的抗原活性,可直接用于ST抗体测定。 展开更多

关键词 耐热肠毒素 谷胱甘肽巯基转移酶 融合蛋白 抗体测定

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弓形虫不同分离株致密颗粒蛋白基因的序列分析及其在大肠埃希菌中的表达 被引量：3

12

作者 郑斌 郑焕钦 +4 位作者 何蔼 李卓雅 曹爱莲 张瑞琳 詹希美 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期100-105,共6页

目的分析弓形虫不同分离株致密颗粒蛋白7(densegranuleprotein,GRA7)基因的异同及在大肠埃希菌中表达致密颗粒蛋白。方法从弓形虫不同分离株(RH株、ZS2株和GT株)的基因组中特异地扩增出GRA7基因,将目的基因定向克隆至原核表达载体pGEX-4... 目的分析弓形虫不同分离株致密颗粒蛋白7(densegranuleprotein,GRA7)基因的异同及在大肠埃希菌中表达致密颗粒蛋白。方法从弓形虫不同分离株(RH株、ZS2株和GT株)的基因组中特异地扩增出GRA7基因,将目的基因定向克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,转化大肠埃希菌JM109并测序。利用互联网上的在线工具CLUSTALW进行序列分析。异丙基-B-D-硫代半乳糖苷(IPTG)体外诱导pGEX-4T-1/GRA7重组质粒菌的表达,对表达的目的蛋白进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),分别以抗抗谷胱甘肽巯基转移酶(GST)抗体、人抗弓形虫阳性血清为一抗进行Westernblotting分析。以纯化的重组蛋白作为包被抗原,ELISA法检测抗弓形虫阴性、阳性血清。结果弓形虫不同分离株GRA7的基因序列相同;pGEX-4T-1/GRA7重组质粒在大肠埃希菌中表达了目的蛋白,Westernblotting分析表明该蛋白为GST融合蛋白,且能被人抗弓形虫阳性血清所识别;ELISA结果表明该蛋白能与人抗弓形虫阳性血清、兔抗弓形虫阳性血清特异结合,而与抗弓形虫阴性血清无反应。结论弓形虫不同分离株GRA7基因具有高度保守性;GRA7基因在大肠埃希菌中以GST融合蛋白的形式得到表达,且该重组蛋白具有一定免疫反应性。 展开更多

关键词 大肠埃希菌 弓形虫 分离株 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 蛋白基因 blotting Western GST融合蛋白 分析及 GRA7基因 谷胱甘肽巯基转移酶 ELISA法检测 致密颗粒蛋白 protein 阳性血清 原核表达载体 重组质粒 重组蛋白

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南昌国境口岸中华按蚊氟氯氰菊酯抗药性及其机制研究 被引量：3

13

作者 徐铁龙 张强 +5 位作者 刘岚 赵明惠 廖芸 廖立新 王建军 郑彬 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期146-149,共4页

目的了解南昌昌北国际机场中华按蚊的氟氯氰菊酯抗药性,初步探索其产生机制。方法应用WHO成蚊生测法检测当地中华按蚊抗药性水平,将生测过程中即将死亡蚊虫归为敏感蚊,存活蚊虫归为抗性蚊,检测并比较两组蚊虫P450单加氧酶、谷胱甘肽巯... 目的了解南昌昌北国际机场中华按蚊的氟氯氰菊酯抗药性,初步探索其产生机制。方法应用WHO成蚊生测法检测当地中华按蚊抗药性水平,将生测过程中即将死亡蚊虫归为敏感蚊,存活蚊虫归为抗性蚊,检测并比较两组蚊虫P450单加氧酶、谷胱甘肽巯基转移酶(GST)活性;同时记录每只敏感蚊生测死亡时间,对生测死亡时间与P450单加氧酶、GST活性进行相关分析。结果当地中华按蚊生测死亡率为59.5%;抗性蚊、敏感蚊、实验室敏感蚊的P450单加氧酶活性差异具有统计学意义(F=151.89,P<0.01),其中抗性蚊>敏感蚊>实验室敏感蚊;但三者GST活性差异无统计学意义(F=0.72,P>0.05);蚊虫生测死亡时间与P450单加氧酶活性呈正相关性,相关系数为0.88,回归方程为y=79.479+1.512x;生测死亡时间与GST活性不具有相关性。结论南昌昌北国际机场中华按蚊对氟氯氰菊酯已产生抗药性,P450单加氧酶活性增强可能是其抗药性产生的机制之一。 展开更多

关键词 中华按蚊 氟氯氰菊酯 抗药性 P450单加氧酶 谷胱甘肽巯基转移酶 昌北国际机场

原文传递

氨氮胁迫对四鼻须鲤鱼肝脏GST酶活力的影响 被引量：3

14

作者 刘洋 凌去非 +2 位作者 王磊 王大鹏 佟广军 《水产养殖》 CAS 2011年第7期13-15,共3页

实验采用生态毒理学方法,以NH4Cl为实验药物,设置0、50、150和250mg/L实验浓度。通过对野生和养殖群体的四鼻须鲤鱼氨氮对肝脏谷胱甘肽巯基转移酶(GST)活力的影响,比较两个群体抗氨氮能力。结果表明:在相同的氨氮浓度和胁迫时间下,四鼻... 实验采用生态毒理学方法,以NH4Cl为实验药物,设置0、50、150和250mg/L实验浓度。通过对野生和养殖群体的四鼻须鲤鱼氨氮对肝脏谷胱甘肽巯基转移酶(GST)活力的影响,比较两个群体抗氨氮能力。结果表明:在相同的氨氮浓度和胁迫时间下,四鼻须鲤鱼养殖群体GST酶活力的变化趋势与野生群体大致相同。除250mg/L浓度组在胁迫5d和10d时,野生群体酶活性略低于养殖群体外,在其余时间点的野生群体酶活性均高于养殖群体,而且,在高浓度氨氮胁迫下,野生群体肝脏的GST酶活性达到峰值的时间比养殖群体更短,显示出较强的抗氨氮能力。 展开更多

关键词 氨氮胁迫 四鼻须鲤鱼 野生群体 养殖群体 谷胱甘肽巯基转移酶

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紫茉莉乙醇提取物对二斑叶螨生物酶活性的影响 被引量：3

15

作者 赵赫南 雷廷 +3 位作者 李冰 曹永昶 任航 韩俊艳 《沈阳大学学报（自然科学版）》 CAS 2016年第3期198-202,共5页

为探讨紫茉莉乙醇提取物杀二斑叶螨作用机制,研究了紫茉莉乙醇提取物(MEE)对几种生物酶活性的影响.以MEE最大可耐受剂量1.2mg/mL采用触杀法处理雌成螨,分别在处理后4、8、12、16、20、24h后测定酶活性变化.处理组螨的蛋白酶活性、酯酶... 为探讨紫茉莉乙醇提取物杀二斑叶螨作用机制,研究了紫茉莉乙醇提取物(MEE)对几种生物酶活性的影响.以MEE最大可耐受剂量1.2mg/mL采用触杀法处理雌成螨,分别在处理后4、8、12、16、20、24h后测定酶活性变化.处理组螨的蛋白酶活性、酯酶活性及Na^+,K^+-ATP酶活性均呈持续下降状态,谷胱甘肽巯基转移酶(GST)活性呈先上升后下降状态,在24h内活性均高于对照组.试验结果表明,MEE对二斑叶螨的几种酶活性产生影响,提示其杀螨作用机制与这些酶有关. 展开更多

关键词 生物农药 杀螨剂 谷胱甘肽巯基转移酶 Na+ K+ATP酶 蛋白酶

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人MD-2/GST融合蛋白在大肠杆菌的表达 被引量：3

16

作者 徐发良 顾长国 +1 位作者 胡承香 李磊 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期206-208,共3页

构建人髓样分化蛋白 2 (humanmyeloiddifferentiatonprotein 2 ,hMD 2 )与谷胱甘肽巯基转移酶 ( glutathione S transferase,GST)的融合蛋白(hMD 2 /GST)表达载体PGEX 4T 1/hMD 2 ,在大肠杆菌中融合表达hMD 2 /GST。以真核表达载体PEF B... 构建人髓样分化蛋白 2 (humanmyeloiddifferentiatonprotein 2 ,hMD 2 )与谷胱甘肽巯基转移酶 ( glutathione S transferase,GST)的融合蛋白(hMD 2 /GST)表达载体PGEX 4T 1/hMD 2 ,在大肠杆菌中融合表达hMD 2 /GST。以真核表达载体PEF BOS/hMD 2为模板 ,用PCR法在MD 2编码序列上下游引入酶切位点和终止密码子 ;将hMD 2编码序列克隆入原核表达载体PGEX 4T 1的相应酶切位点 ;用PCR和酶切筛选、鉴定重组质粒PGEX 4T 1/hMD 2 ,并对插入基因片断测序 ;重组质粒PGEX 4T 1/hMD 2转化大肠杆菌 ,经IPTG诱导后用SDS PAGE分析表达产物。结果PCR、酶切鉴定和序列测定证实MD 2编码序列正向插入原核表达载体PGEX 4T 1的相应酶切位点 ,片断与PCR扩增产物大小相同、序列无误、阅读框架正确 ;SDS PAGE证实hMD 2 /GST在大肠杆菌中表达 ,表达量约占菌体总蛋白的 3 0 %。说明成功构建了PGEX 4T 1/hMD 2载体 ,hMD 2 /GST融合蛋白在大肠杆菌中得到初步表达 ,为MD 展开更多

关键词 重组融合蛋白类 谷胱甘肽巯基转移酶 人髓样分化蛋白-2 遗传载体

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不同蛋白标签对LMO2融合蛋白沉淀实验的影响 被引量：3

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作者 袁伟 孙伟 +6 位作者 杨爽 闫继东 翟春利 杜君 王兆琦 安迪 朱天慧 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期887-891,共5页

融合蛋白沉淀技术是一种用来研究蛋白质相互作用的新的体外实验技术,通常利用蛋白亲和标签与探针蛋白融合表达来钓取未知相互作用蛋白或验证已知蛋白间的相互作用,其中以谷胱甘肽巯基转移酶(GST)标签最为常用。LMO2(由LIMonly缩写得名,... 融合蛋白沉淀技术是一种用来研究蛋白质相互作用的新的体外实验技术,通常利用蛋白亲和标签与探针蛋白融合表达来钓取未知相互作用蛋白或验证已知蛋白间的相互作用,其中以谷胱甘肽巯基转移酶(GST)标签最为常用。LMO2(由LIMonly缩写得名,也称Ttg-2或Rbtn2)是一种小分子量难溶蛋白。利用原核系统分别表达了含有GST和麦芽糖结合蛋白(MBP)两种标签的LMO2融合蛋白,发现GST-LMO2融合蛋白以包涵体的形式表达,而MBP-LMO2融合蛋白则能够以可溶形式表达,而且MBP-LMO2的表达量明显高于GST-LMO2融合蛋白。将可溶性的MBP-LMO2融合蛋白和复性后的GST-LMO2融合蛋白分别用于钓取K562细胞中LMO2的结合蛋白,结果显示二者都可以结合K562细胞中内源性的GATA1蛋白,而MBP-LMO2融合蛋白捕获的GATA1蛋白明显多于复性后的GST-LMO2融合蛋白。这一结果提示,在研究一些分子量小、疏水性强的蛋白质时改变标签蛋白可能是一种有益的尝试。 展开更多

关键词 蛋白质沉淀技术 谷胱甘肽巯基转移酶 麦芽糖结合蛋白 LMO2

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不同价态无机砷对罗非鱼肝脏砷积累及GSH/GST解毒代谢的影响 被引量：2

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作者 裴佳 范文宏 董兆敏 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期107-114,共8页

低剂量中长期暴露下的氧化胁迫是砷对水生生物致毒的重要机制之一。本文通过对罗非鱼进行32 d的食物相砷暴露,测定不同时间点罗非鱼肝脏中谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量和谷胱甘肽巯基转移酶(glutathione S-transferase,GST)活性,揭示... 低剂量中长期暴露下的氧化胁迫是砷对水生生物致毒的重要机制之一。本文通过对罗非鱼进行32 d的食物相砷暴露,测定不同时间点罗非鱼肝脏中谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量和谷胱甘肽巯基转移酶(glutathione S-transferase,GST)活性,揭示不同价态无机砷对罗非鱼肝脏中GSH/GST的影响机制。经三价砷(As(III))暴露后,砷含量在2 d内显著增加而在随后的30 d内无显著性差异; 0～2 d内GSH含量显著增加,后降低,13 d后GSH含量均低于空白组; 0～6 d GST活性均大于空白组,6～8 d GST活性降低,8 d后活性高于空白组,且32 d达到最大值。经五价砷(As(V))暴露后,罗非鱼肝脏中砷含量逐渐增加,在20 d时达到最大值而后无显著性差异; 0～2 d时GSH含量降低,随后逐渐增加,在16 d达到最大值,16 d后GSH含量均低于空白组; 0～8 d时GST被大量诱导合成,8～20 d时GST合成被抑制,20 d后活性增加,在32 d达到最大值。As(III)和As(V)对罗非鱼GSH/GST的不同影响与其在罗非鱼体内的积累量有关。As(III)暴露后各时间点罗非鱼肝脏中的砷含量与GSH含量呈统计学正相关,而As(V)暴露无明显相关性。这是因为As(V)进入罗非鱼肝脏后会还原为As(III),进而GSH作为可提供巯基的还原剂而被大量消耗。另外,As(III)暴露后各时间点罗非鱼肝脏中的砷含量与GST活性呈显著负相关,而As(V)暴露却呈现出很强的滞后性,这是由于进入生物体内的As(V)需转化为As(III)后,才可直接作用于酶系统。可见,不同形态砷对水生生物的致毒机制需进一步深入研究。 展开更多

关键词 无机砷 罗非鱼 积累量 谷胱甘肽 谷胱甘肽巯基转移酶

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不同年龄小鼠脑组织中谷胱甘肽系统的比较

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作者 梁青宁 夏玉叶 +3 位作者 盛雨辰 闵旸 蒋萍 季莉莉 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1650-1652,共3页

目的探讨不同年龄小鼠脑组织中谷胱甘肽(GSH)含量及相关酶活性的差异。方法比较3,8和24周龄小鼠脑组织中GSH含量及GSH合成酶(GCL)、GSH还原酶(GR)、GSH过氧化物酶(GSH-Px)和GSH巯基转移酶(GST)活性的差异。结果不同年龄小鼠脑内GSH含量... 目的探讨不同年龄小鼠脑组织中谷胱甘肽(GSH)含量及相关酶活性的差异。方法比较3,8和24周龄小鼠脑组织中GSH含量及GSH合成酶(GCL)、GSH还原酶(GR)、GSH过氧化物酶(GSH-Px)和GSH巯基转移酶(GST)活性的差异。结果不同年龄小鼠脑内GSH含量、GCL和GR活性无明显变化。8和24周龄小鼠脑内GSH-Px明显低于3周龄组。24周龄小鼠脑内GST活力明显高于3和8周龄。结论小鼠脑内GSH含量及其合成相关的GCL和GR活性不随年龄明显改变,而GSH依赖的抗氧化酶GST和GSH-Px的活性则具有明显差异。 展开更多

关键词 谷胱甘肽 谷胱甘肽合成酶 谷胱甘肽还原酶 谷胱甘肽过氧化物酶 谷胱甘肽巯基转移酶

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多药耐药相关蛋白在原发性肝癌患者外周血淋巴细胞及癌组织中的表达 被引量：2

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作者 王雷 王煜霞 薛会朝 《新乡医学院学报》 CAS 2017年第6期538-541,共4页

目的探讨多药耐药相关蛋白P-糖蛋白(P-gp)、肺耐药蛋白(LRP)和谷胱甘肽巯基转移酶-π(GST-π)在原发性肝癌(HCC)患者外周血淋巴细胞及癌组织中的表达。方法选择2014年1月至2015年1月在新乡医学院第一附属医院经影像学检查及病理学确诊的... 目的探讨多药耐药相关蛋白P-糖蛋白(P-gp)、肺耐药蛋白(LRP)和谷胱甘肽巯基转移酶-π(GST-π)在原发性肝癌(HCC)患者外周血淋巴细胞及癌组织中的表达。方法选择2014年1月至2015年1月在新乡医学院第一附属医院经影像学检查及病理学确诊的HCC患者69例(HCC组),采用免疫组织化学染色检测3种耐药相关蛋白P-gp、LRP和GST-π在HCC患者外周血淋巴细胞及癌组织中的表达水平;另选择40例健康人作为对照组,检测外周血淋巴细胞中P-gp、LRP和GST-π表达水平。结果 P-gp、LRP及GST-π在HCC组患者外周血淋巴细胞中的阳性表达率均高于对照组(P<0.05)。P-gp、LRP及GST-π在外周血淋巴细胞和癌组织中的阳性表达率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。不同TNM分期HCC患者外周血淋巴细胞与癌组织中P-gp、LRP及GST-π阳性表达率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论多药耐药相关蛋白P-gp、LRP和GST-π在HCC患者外周血淋巴细胞及癌组织中的表达一致,可以使用外周血淋巴细胞检测多药耐药相关蛋白。 展开更多

关键词 原发性肝癌 外周血淋巴细胞 多药耐药蛋白 P-糖蛋白 肺耐药蛋白 谷胱甘肽巯基转移酶-π

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