硫化氢通过glutaredoxin-1调节氧化应激减轻急性阻塞性睡眠呼吸暂停诱发房颤的机制 被引量：1

1

作者 黄辉宁 杜娟娟 +2 位作者 孙燚 侯应龙 高梅 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2022年第1期1-5,12,共6页

目的探讨硫化氢(H_(2)S)减轻急性阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)诱发房颤的机制。方法硫氢化钠(NaHS)作为外源性H_(2)S供体,8~10周龄健康成年雄性SD大鼠24只,体质量320~360 g,随机分为对照组、OSA诱发房颤组、NaHS+OSA组和氯化镉+NaHS+OSA组,... 目的探讨硫化氢(H_(2)S)减轻急性阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)诱发房颤的机制。方法硫氢化钠(NaHS)作为外源性H_(2)S供体,8~10周龄健康成年雄性SD大鼠24只,体质量320~360 g,随机分为对照组、OSA诱发房颤组、NaHS+OSA组和氯化镉+NaHS+OSA组,每组6只。按照既往文献构建OSA诱发房颤模型,实验结束后处死大鼠,留取左心耳组织。采用免疫荧光、ELISA法检测左心耳谷氧还蛋白-1的表达水平;采用硫代巴比妥酸法检测左心耳丙二醛(MDA)含量。结果与OSA组相比,NaHS+OSA组房颤诱发次数减少、房颤持续时间缩短(P<0.05);与对照组相比,OSA组左心耳谷氧还蛋白-1表达减少,MDA含量增加,应用NaHS后,NaHS+OSA组谷氧还蛋白-1表达水平较OSA组增加,MDA含量降低(P<0.01),在NaHS基础上应用谷氧还蛋白-1抑制剂氯化镉后,氯化镉+NaHS+OSA组MDA含量增加(P<0.01),H_(2)S减轻OSA诱发房颤的作用消失。结论外源性H_(2)S减轻急性OSA诱发房颤,可能是通过上调心肌细胞谷氧还蛋白-1表达从而减轻心肌细胞氧化应激。 展开更多

关键词 心房颤动 阻塞性睡眠呼吸暂停 硫化氢 谷氧还蛋白-1 氧化应激

原文传递

粉尘螨谷氧还蛋白-1样蛋白基因原核表达质粒的构建及结构分析

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作者 任雅宁 周鹰 +5 位作者 袁存银 周冬梅 廖媛芬 强士豪 罗金丹 崔玉宝 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2023年第6期672-676,682,共6页

目的获得粉尘螨谷氧还蛋白-1样蛋白(Glutaredoxin-1,Grx1)的编码基因并构建表达质粒,对该基因及其编码蛋白质进行结构预测。方法以粉尘螨总RNA为模板,RT-PCR扩增获得编码基因后插入原核表达载体pET28a(+),构建的重组质粒转化入E.coil BL... 目的获得粉尘螨谷氧还蛋白-1样蛋白(Glutaredoxin-1,Grx1)的编码基因并构建表达质粒,对该基因及其编码蛋白质进行结构预测。方法以粉尘螨总RNA为模板,RT-PCR扩增获得编码基因后插入原核表达载体pET28a(+),构建的重组质粒转化入E.coil BL21(DE3)感受态细胞中,用异丙基-b-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-beta-Dthiogalactoside,IPTG)诱导表达,SDS-PAGE分析表达产物。采用生物信息学软件分析该基因及其编码蛋白的结构等生物学特征。结果获得的粉尘螨Grx1编码基因全长315bp,构建的原核表达质粒pET28a(+)-Grx1转化入大肠埃希菌感受态细胞后经IPTG诱导,表达相对分子质量为25.9×10^(3)的重组蛋白。生物信息学分析该基因编码的蛋白质由104个氨基酸组成,主要分布于细胞核(占87.0%)。该蛋白含有11个潜在磷酸化位点(4个苏氨酸,6个丝氨酸和1个酪氨酸),二级结构为α-螺旋(45.19%)、无规则卷曲(31.73%)、延伸链(14.42%)和β-转角(8.65%)。将该基因推导出的编码氨基酸序列进行Blast获得同源基因与屋尘螨谷胱甘肽样C8样蛋白(Dermatophagoides pteronyssinus glutaredoxin-C8-like)同源性最高(83.52%)。结论获得了粉尘螨Grx1的编码基因及其原核表达质粒,生物信息学分析该蛋白含有潜在的磷酸化位点且主要分布于细胞核,可为该基因的生理功能研究及粉尘螨的防制提供参考。 展开更多

关键词 粉尘螨 谷氧还蛋白-1样蛋白 生物信息学 基因克隆

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谷氧还蛋白1和硫氧还蛋白1基因在云南乌金猪不同组织中的表达特点及L-组氨酸对其在氧化应激细胞中表达的影响 被引量：8

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作者 张春勇 陈克嶙 +1 位作者 黄金昌 郭荣富 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期2415-2423,共13页

本试验旨在研究抗氧化基因谷氧还蛋白1(GRX1)、硫氧还蛋白1(TRX1)在云南乌金猪脑垂体、下丘脑、甲状腺、胸腺、胰腺、生殖腺、肝脏、皮肤、十二指肠、空肠、回肠11种组织中的差异表达,探讨L-组氨酸对乌金猪氧化应激细胞中GRX1、TRX1基... 本试验旨在研究抗氧化基因谷氧还蛋白1(GRX1)、硫氧还蛋白1(TRX1)在云南乌金猪脑垂体、下丘脑、甲状腺、胸腺、胰腺、生殖腺、肝脏、皮肤、十二指肠、空肠、回肠11种组织中的差异表达,探讨L-组氨酸对乌金猪氧化应激细胞中GRX1、TRX1基因表达的调节作用。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测乌金猪组织中GRX1、TRX1基因表达;以过氧化氢(H2O2)为氧化应激源建立氧化应激细胞模型,探讨L-组氨酸对GRX1、TRX1基因表达的调节作用。结果表明:1)GRX1、TRX1基因在乌金猪被检测组织中均有表达,肝脏表达量最高,其次是皮肤、空肠,其他组织中的表达量相对较低;2)乌金猪组织中TRX1基因表达量明显高于G RX1基因表达量;3)细胞培养结果表明,受到H2O2刺激时,氧化应激细胞中GRX1、TRX1基因产生过表达,L-组氨酸对氧化应激细胞或非应激细胞中GRX1、TRX1基因表达具有调节作用,其适宜浓度约为280μg/mL。乌金猪GRX1、TRX1基因表达具有明显组织特异性,H2O2可诱导氧化应激细胞中GRX1、TRX1基因产生过表达,添加适宜浓度的L-组氨酸可以调节氧化应激细胞或非应激细胞中GRX1、TRX1基因表达。结果提示,通过营养途径可诱导乌金猪体内G RX1、TRX1基因的表达,这是缓解机体氧化应激损伤和增强抗氧化能力的一种有效方式。 展开更多

关键词 乌金猪 氧化应激 谷氧还蛋白1 硫氧还蛋白1 基因表达 L-组氨酸

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谷氧还蛋白1在氧化应激引起的老年多发疾病中的研究进展

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作者 唐娜 郭华 +1 位作者 张云云 崔小川 《实用老年医学》 CAS 2024年第5期516-520,共5页

谷氧还蛋白1(glutaredoxin1,Grx1)是一种必需的抗氧化酶,其主要作用是催化蛋白质的去谷胱甘肽化,从而维持细胞的氧化还原平衡。当发生氧化应激时,Grx1的表达及活性也会变化。近年来越来越多的研究表明,氧化应激参与了心血管系统疾病、... 谷氧还蛋白1(glutaredoxin1,Grx1)是一种必需的抗氧化酶,其主要作用是催化蛋白质的去谷胱甘肽化,从而维持细胞的氧化还原平衡。当发生氧化应激时,Grx1的表达及活性也会变化。近年来越来越多的研究表明,氧化应激参与了心血管系统疾病、中枢神经系统疾病、眼科疾病、骨骼肌萎缩、急性肺损伤等多种疾病的发病机制,而老年人也是这些疾病的多发人群。本文总结了Grx1与氧化应激在上述相关疾病发病机制中的研究进展。 展开更多

关键词 谷氧还蛋白1 氧化应激 发病机制

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Grx1抑制高糖诱导的H9c2细胞中Caspase-8/3和JNK/c-Jun凋亡通路的激活 被引量：5

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作者 张春晶 侯金才 +5 位作者 王滨 齐晓丹 李淑艳 孙艳 师岩 于海涛 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期579-583,共5页

谷氧还蛋白1(glutaredoxin 1,Grx1)作为一种重要的抗氧化剂,通过响应多种重要蛋白质的活动和功能调节细胞的关键过程.了解Grx1功能,对寻求糖尿病和心肌病等,以凋亡失调和氧化还原稳态改变为发病机制的疾病的新颖治疗策略至关重要.为研究... 谷氧还蛋白1(glutaredoxin 1,Grx1)作为一种重要的抗氧化剂,通过响应多种重要蛋白质的活动和功能调节细胞的关键过程.了解Grx1功能,对寻求糖尿病和心肌病等,以凋亡失调和氧化还原稳态改变为发病机制的疾病的新颖治疗策略至关重要.为研究Grx1对高糖诱导的大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及相关信号机制,本研究以高糖诱导大鼠心肌细胞H9c2建立高糖损伤模型,采用免疫印迹实验检测caspase-3、8、9蛋白活性片段的表达和凋亡信号蛋白JNK/c-Jun的磷酸化水平.结果显示,与正常对照组相比,高糖组caspase家族中,剪切的caspase-3、caspase-8、caspase-9相对含量均显著增多,JNK和c-Jun蛋白的磷酸化水平均显著上调.但给予外源性Grx1保护后,剪切的caspase-3和caspase-8相对含量均显著降低,JNK和c-Jun蛋白的磷酸化水平均显著下调.上述结果表明,高糖通过介导caspase-8/3和caspase-9/3凋亡通路,并激活凋亡相关信号通路JNK/c-Jun诱导H9c2心肌细胞凋亡.给予外源性Grx1保护后,可通过抑制caspase-8/3凋亡通路和JNK/c-Jun信号通路的激活,拮抗高糖诱导的心肌细胞凋亡. 展开更多

关键词 谷氧还蛋白1 糖尿病心肌病 JNK c-Jun信号通路 凋亡

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胰高血糖素样多肽-1拮抗2型糖尿病胰岛细胞凋亡损伤（英文） 被引量：2

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作者 刘颖 程昊 +10 位作者 孙晓杰 齐晓丹 朱文斌 师岩 徐晶 李淑艳 衣同辉 陈影 于海涛 赵正林 张春晶 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1342-1349,共8页

胰高血糖素样多肽-1(glucogen-like peptide-1,GLP-1)在胰岛素分泌过程中扮演重要角色,并在改善β细胞功能方面有着令人瞩目的效应,但有关其作用机制尚需更深入研究。本研究探讨GLP-1对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠模... 胰高血糖素样多肽-1(glucogen-like peptide-1,GLP-1)在胰岛素分泌过程中扮演重要角色,并在改善β细胞功能方面有着令人瞩目的效应,但有关其作用机制尚需更深入研究。本研究探讨GLP-1对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠模型胰岛细胞损伤的影响,观察GLP-1在T2DM大鼠胰岛细胞凋亡损伤机制中所发挥的作用。HE染色结果发现,糖尿病大鼠胰岛损伤。ELISA结果表明,糖尿病患者和糖尿病大鼠血清中GLP-1表达水平上调。放射免疫结果表明,GLP-1和谷氧还蛋白1(Grx1)促进HIT-T 15细胞分泌胰岛素,Cd抑制胰岛素的分泌。免疫组化结果表明,糖尿病大鼠GLP-1加药处理后,各组与糖尿病组相比,药物提高了Grx1和胰岛素表达水平,降低了胰高血糖素表达水平,同时降低了活性胱天蛋白酶3(caspase-3)的表达。本研究结果提示,GLP-1在肥胖T2DM大鼠胰岛细胞凋亡中起保护作用,同时可调节胰岛素和胰高血糖素水平,其机制可能与Grx1相关。 展开更多

关键词 谷氧还蛋白1 胰高血糖素样多肽 胱天蛋白酶3 胰岛素 胰高血糖素

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人谷氧还蛋白1基因克隆及真核表达载体的构建 被引量：1

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作者 邹朝霞 张春晶 +3 位作者 吴丽芳 刘莹莹 房绍红 周宏博 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2006年第5期354-357,共4页

目的从ECV304细胞中克隆谷氧还蛋白1(glutaredoxin1,Grx1)的cDNA序列并构建真核表达载体pcD-NA3.1(+)-Grx1。方法利用Trizol一步法从ECV304细胞中提取总RNA,采用RT-PCR技术从中获得Grx1的cD-NA,将质粒pcDNA3.1(+)进行双酶切、CIP处理并... 目的从ECV304细胞中克隆谷氧还蛋白1(glutaredoxin1,Grx1)的cDNA序列并构建真核表达载体pcD-NA3.1(+)-Grx1。方法利用Trizol一步法从ECV304细胞中提取总RNA,采用RT-PCR技术从中获得Grx1的cD-NA,将质粒pcDNA3.1(+)进行双酶切、CIP处理并回收纯化,与纯化后的Grx1cDNA连接构成重组表达载体pcD-NA3.1(+)-Grx1,转化大肠杆菌JM109,筛选阳性克隆鉴定并进行测序分析。结果经RT-PCR和测序鉴定,成功地克隆了人Grx1cDNA。结论从ECV304细胞中获得Grx1的cDNA,成功构建了真核表达载体pcDNA3.1(+)-Grx1,对Grx1在体外表达、进一步研究其在氧化应激中的作用及其作用机制具有重要意义。 展开更多

关键词 谷氧还蛋白1 基因克隆 序列分析 真核表达

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谷氧还蛋白1调节高糖诱导的心肌细胞自噬 被引量：2

8

作者 张春晶 侯金才 +3 位作者 齐晓丹 王滨 孙艳 于海涛 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期912-918,共7页

人谷氧还蛋白1（Grx1）在体内具有广泛的抗氧化、抗凋亡作用,与氧化应激损伤导致的糖尿病和心肌病等多种疾病的发病机制密切相关.研究表明,糖尿病心血管病与自噬调节异常密切相关,但糖尿病心血管病变时自噬水平如何调节才能够保护受损... 人谷氧还蛋白1（Grx1）在体内具有广泛的抗氧化、抗凋亡作用,与氧化应激损伤导致的糖尿病和心肌病等多种疾病的发病机制密切相关.研究表明,糖尿病心血管病与自噬调节异常密切相关,但糖尿病心血管病变时自噬水平如何调节才能够保护受损的心肌还尚未定论.为研究自噬在高糖诱导心肌细胞凋亡中的作用及其与Grx1的关系,以明确Grx1对高糖诱导的心肌细胞凋亡的抑制作用及相关机制,本研究以高糖诱导大鼠心肌细胞H9c2建立高糖损伤模型,采用氧化还原蛋白免疫印迹法检测蛋白质的氧化水平.免疫印迹检测活性caspase 3蛋白和自噬蛋白Beclin1和LC3以及抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平.研究发现,高糖可诱导蛋白质的氧化水平增加,而Grx1可拮抗高糖诱导的H9c2细胞中蛋白质的氧化.并且含血清的高糖（25和50 mmol/L）作用H9c2心肌细胞后,自噬蛋白Beclin 1表达水平在6-48 h显著上调.同时发现,活性caspase 3水平也呈时间依赖性表达上调,caspase 3和自噬蛋白表达水平的同趋势增加,说明升高的自噬水平与心肌细胞凋亡的调节有关.Grx1保护组的自噬蛋白及活性caspase 3表达水平均显著下调,Grx1抑制剂镉组可拮抗Grx1调节的自噬蛋白和凋亡蛋白水平,说明Grx 1通过抑制自噬及caspase 3水平抑制高糖诱导的心肌细胞凋亡.以上研究结果提示,通过提高Grx1/GSH抗氧化系统功能,调节氧化还原稳态,可以有效减少高糖诱导的心肌损伤,保护糖尿病心脏功能. 展开更多

关键词 谷氧还蛋白1 糖尿病心肌病 自噬 凋亡

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云南普洱瓢鸡、腾冲雪鸡GRX1、TRX1基因差异性表达 被引量：1

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作者 李美荃 宋聪 +4 位作者 张春勇 安清聪 潘洪斌 陈克嶙 郭荣富 《家畜生态学报》 北大核心 2015年第12期19-23,59,共6页

谷氧还蛋白(GRX1)和硫氧还蛋白(TRX1)在动物机体抗氧化系统中发挥重要作用。试验对地方鸡种八个组织进行实时荧光定量,旨在探索抗氧化基因GRX1、TRX1在不同鸡种、组织间的差异表达。试验测定GRX1、TRX1基因在普洱瓢鸡、腾冲雪鸡和三黄... 谷氧还蛋白(GRX1)和硫氧还蛋白(TRX1)在动物机体抗氧化系统中发挥重要作用。试验对地方鸡种八个组织进行实时荧光定量,旨在探索抗氧化基因GRX1、TRX1在不同鸡种、组织间的差异表达。试验测定GRX1、TRX1基因在普洱瓢鸡、腾冲雪鸡和三黄鸡的十二指肠、回肠、肺脏、心脏、肝脏、肾脏、皮肤、肌肉八个组织中的mRNA表达水平。结果表明,普洱瓢鸡的GRX1、TRX1基因mRNA表达水平极显著高于腾冲雪鸡,腾冲雪鸡的GRX1、TRX1基因mRNA表达水平极显著高于三黄鸡(P<0.01);普洱瓢鸡、腾冲雪鸡各组织中的TRX1、GRX1的表达量极显著高于三黄鸡(P<0.01);TRX1在三个鸡种中的表达量极显著高于GRX1(P<0.01)。结果显示,普洱瓢鸡、腾冲雪鸡与三黄鸡抗氧化基因表达存在明显差异,这可能是影响本地鸡种与培育鸡种抗氧化能力的重要途径之一。 展开更多

关键词 谷氧还蛋白1 硫氧还蛋白1 普洱瓢鸡 腾冲雪鸡 基因表达

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文心兰‘南茜’谷氧还蛋白基因克隆定位及表达 被引量：1

10

作者 高玉莹 白玉 +5 位作者 时欢 陈晓慧 郝向阳 林玉玲 叶开温 赖钟雄 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期533-540,共8页

为研究文心兰谷氧还蛋白超家族基因ROXY在花药发育中的功能,以文心兰‘南茜’（Oncidium Gower Ramsey）为试验材料,从‘南茜’的转录组网站选取一条与拟南芥At ROXY1/2相似度最高的基因序列（命名为OnROXY1）,以该序列的cDNA为模版设... 为研究文心兰谷氧还蛋白超家族基因ROXY在花药发育中的功能,以文心兰‘南茜’（Oncidium Gower Ramsey）为试验材料,从‘南茜’的转录组网站选取一条与拟南芥At ROXY1/2相似度最高的基因序列（命名为OnROXY1）,以该序列的cDNA为模版设计引物,用RT-PCR从‘南茜’花器官中扩增该基因,并对扩增产物进行测序和保守结构域分析.结果表明,OnROXY1基因编码区402 bp,编码133个氨基酸,与‘南茜’转录组网站中的预测序列只有一个碱基差异,但与该预测序列的氨基酸序列和保守结构域完全一致（GenBank登录号：MF696154）.OnROXY1基因具有典型的谷氧还蛋白（Glutaredoxin,GRX）基因家族的结构域和CMCC活性位点,因此该基因属于GRX基因家族,并且属于亚类CC型的GRX基因.进化树分析表明,OnROXY1与水稻的Os ROXY1、Os ROXY2和拟南芥的At ROXY1、At ROXY2蛋白序列的一致性最高,进化距离最近.亚细胞定位结果显示,OnROXY1主要定位于细胞核中,少量定位在细胞质中.RT-PCR检测发现,在不同组织部位中,OnROXY1在假鳞茎中的表达量最高,唇瓣中的表达量最低;不同花期的定量结果显示,OnROXY1在脱落干枯期时的表达量最高,盛开期时的表达量最低.本研究推测谷氧还蛋白基因OnROXY1可能在文心兰假鳞茎与根的发育、消除植物体内过多的活性氧以及延缓文心兰花器官的衰老等方面具有重要作用. 展开更多

关键词 文心兰 谷氧还蛋白基因OnROXY1 qPCR RT-PCR

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活性氧促进中性粒细胞与骨髓基质细胞黏附及机制初探

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作者 尤媛媛 许倩 +9 位作者 祝飞美 任泓宇 杜宇 苗峻铭 王祎 陈善泽 陈军利 王晓樱 李婧瑜 黄宁 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期2255-2260,共6页

目的:探讨活性氧对中性粒细胞与骨髓基质细胞(BMSCs)黏附的影响及其机制。方法:采用密度梯度离心法从小鼠胫骨和股骨分离骨髓中性粒细胞,并用DMSO诱导HL60细胞分化为成熟中性粒细胞(d HL60细胞)。利用分光光度法检测CFDA-SE标记的小鼠... 目的:探讨活性氧对中性粒细胞与骨髓基质细胞(BMSCs)黏附的影响及其机制。方法:采用密度梯度离心法从小鼠胫骨和股骨分离骨髓中性粒细胞,并用DMSO诱导HL60细胞分化为成熟中性粒细胞(d HL60细胞)。利用分光光度法检测CFDA-SE标记的小鼠骨髓中性粒细胞和d HL60细胞在H_2O_2刺激下与BMSCs的黏附。利用荧光显微成像技术和Western blot检测携带去谷胱甘肽化酶谷氧还蛋白1(Grx1)表达载体的慢病毒感染的d HL60细胞中Grx1的表达。PCR检测Grx1敲除小鼠的基因型。结果:(1) Diff-Quick染色显示,分离的骨髓中性粒细胞纯度高于90%; H_2O_2处理后,中性粒细胞与BMSCs黏附率显著增加(P <0. 01)。(2)荧光显微镜观察和Western blot结果表明,Grx1稳转株d HL60细胞中Grx1的表达水平较空载体稳转株细胞显著增加;体外黏附实验表明过表达Grx1的d HL60细胞较对照组d HL60细胞,在相同H_2O_2浓度下,黏附到BMSCs程度显著下降(P <0. 01)。(3)经PCR鉴定,实验所用基因敲除小鼠在全基因水平上未见Grx1;且敲除Grx1的小鼠较野生型小鼠,在相同浓度H_2O_2刺激下,其骨髓中性粒细胞与BMSCs黏附率显著升高。(4)血管细胞黏附分子1(VCAM-1)抗体预处理BMSCs后,由H_2O_2引起的d HL60与BMSCs之间的黏附增强回复到了静息水平。结论:活性氧促进骨髓中中性粒细胞与BMSCs的黏附,其可能的机制是通过诱导VCAM-1黏附信号的S-谷胱甘肽化。 展开更多

关键词 活性氧 中性粒细胞 骨髓基质细胞 细胞黏附 谷氧还蛋白1

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